詳細介紹
培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
產(chǎn)品屬于:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
BX517 | 1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg | 1~3天 |
商品介紹:
BX517是一種有效的,選擇性的PDK1抑制劑,IC50值為6nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:850717-64-5 純度:98.0% 分子量:282.3 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
枯草芽孢桿菌枯草亞種Pichia burtonii
皮狀絲孢酵母Saccharomyces cerevisiae
微菌核鏈霉菌Issatchenkia orientalis
小雞縱花2-2Saccharomycopsis fibuligera
香菇Kluyveromyces sinensis
大腸埃希菌Kluyveromyces hubeiensis
費氏中華根瘤菌Schwanniomyces occidentalis var. occidentalis
糞生糞殼Kluyveromyces marxianus var. marxianus
抗壞血克呂沃爾氏菌Sporidiobolus johnsonii
大豆慢生根瘤菌Saccharomyces cerevisiae
山地青霉Saccharomyces cerevisiae
新月彎孢Saccharomycopsis fibuligera
樹舌Schizoblastosporion starkeyi-henricii
南非分枝桿菌Yarrowia lipolytica
釀酒酵母Saccharomyces cerevisiae
腦膜炎奈瑟氏球菌Phaffia rhodozyma
小鼠腦腸肽(BGP/Gehrelin)免疫試劑盒載脂蛋白L1抗體人Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽(ⅠCTP)ELISA試劑盒萊苞迪甙A
小鼠內(nèi)脂/內(nèi)臟脂肪(visfatin)免疫試劑盒載脂蛋白L4抗體人Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽(ⅠCTP)ELISA試劑盒萊苞迪甙C
小鼠內(nèi)臟脂肪特異性絲蛋白抑制劑(vaspin)免疫試劑盒載脂蛋白L5抗體人Ⅰ型膠原C端肽(CTX-Ⅰ)ELISA試劑盒萊苞迪甙D
小鼠內(nèi)皮脂肪(EL)免疫試劑盒載脂蛋白M抗體人Ⅰ型膠原C端肽(CTX-Ⅰ)ELISA試劑盒萊菔
PDK1抑制劑(BX517)D-(-)水楊苷
其他柳;水楊;水楊糖;D(-)-水楊;水楊甙;水楊糖
英文名稱:D-(-)Salicin
其他英文名稱:2-(Hydroxymethyl)phenyl-beta-D-glucopyranoside
產(chǎn)品規(guī)格:BR,99%
包裝:5克/25克/100克
CAS號:138-52-3
C13H18O7=286.28
級別:BR
含量:≥99.0% (HPLC)
比旋光度:?62.5±2°(c=3% in H2O)
砷:≤1ppm
鉛:≤5ppm
汞:≤0.1ppm
鎘:≤0.1ppm
性狀:淡黃色結(jié)晶。非還原性四糖,內(nèi)含綿子糖。熔點160~170℃。旋光度+148°(在水中),淡甜味。存在于豆科植物中,是大豆中的主要碳水化合物。水溶解性:50mg/ml
用途:生化研究。能被α-半乳糖苷分解為蔗糖和半乳糖。在β-呋喃果糖苷的作用下,葡萄糖-果糖結(jié)合鍵可被水解。
保存:RT