化工儀器網(wǎng)
產(chǎn)品簡介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號 | A01X2026 | 主要用途 | 僅供科研實驗 |
| 組織來源 | 心臟 | 種屬來源 | 兔 |
詳細(xì)介紹
兔冠狀動脈平滑肌細(xì)胞
一、細(xì)胞基本屬性
細(xì)胞名稱 | 兔冠狀動脈平滑肌細(xì)胞 | 商品貨號 | A01X2026 |
組織來源 | 心臟 | 種屬來源 | 兔 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 生長特性 | 貼壁 |
換液頻率 | 每2-3天換液一次 | 細(xì)胞形態(tài) | 長梭形細(xì)胞，不規(guī)則細(xì)胞 |
培養(yǎng)基：原代平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)體系
傳代特性：根據(jù)細(xì)胞特性
消化液：0.25%胰dan白酶
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
細(xì)胞簡介：冠狀動脈是供給心臟血液的動脈，起于主動脈根部，分左右兩支，行于心臟表面。冠狀動脈疾病發(fā)生和發(fā)展的一個主要因素是由于血管平滑肌細(xì)胞轉(zhuǎn)變成為了具有繁殖能力的表型。
近期的研究表明平滑肌細(xì)胞能表達(dá)鈣離子通道，ICAM-1和VCAM-1。其中ICAM-1和VCAM-1的表達(dá)可能是造成血管壁炎癥反應(yīng)，并進(jìn)一步造成血管疾病的原因 。因此，對冠狀動脈血管平滑肌細(xì)胞的體外培養(yǎng)和研究可用來發(fā)現(xiàn)和確定新的冠狀血管疾病的靶向治療方法。
原代細(xì)胞分離培養(yǎng)的思路：
取材--分離--培養(yǎng)--鑒定
首先將組織從機(jī)體中取出，經(jīng)胰dan白酶/膠原酶處理后分散成單細(xì)胞，再在合適的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，使細(xì)胞繁殖到一定系數(shù)后進(jìn)行細(xì)胞鑒定。
實驗步驟：
一、取7-10d雄性SD大鼠，頸椎脫臼處死,浸泡于75％乙醇消毒3-5min。
二、在超凈工作臺中，將大鼠斷頭置于玻璃培養(yǎng)皿中，打開顱腔后取出全腦,放在盛有預(yù)冷的PBS玻璃培養(yǎng)皿中，去除小腦和間腦。
三、將大腦半球在干濾紙上緩慢滾動以去除軟腦膜和腦膜大血管，再放在新的盛有預(yù)冷的PBS玻璃培養(yǎng)皿中。
四、用細(xì)解剖鑷去除大腦白質(zhì)、殘余大血管和軟腦膜，保留大腦皮質(zhì)。
五、大腦皮質(zhì)放于DMEM中，剪碎成約1mm3大小，放入50ml的離心管中，加入混合酶液I(0.05-0 .1％II型膠原酶，0 .025-0 .05％IV型膠原酶，200-400U DNaseI)，混勻后37℃水浴消化1-1.5h。
六、室溫1 000×g離心8min，去上清液。
七、沉淀中加入20％BSA重懸浮，充分混勻，1 000×g，20min，4℃離心，去上清。
八、沉淀加入4ml混合酶液II( 0.05-0.1％的膠原酶/分散酶，0.05-0.1％I型膠原酶，100-300U DNaseI )重懸浮，混勻，37℃水浴消化0.5-1h，700×g室溫離心6min，去上清液。
九、沉淀加入2ml DMEM培養(yǎng)液懸浮混勻，鋪于經(jīng)離心形成連續(xù)梯度的12ml 50％Percoll(25 000×g，60min，4℃)，1000×g，4℃離心10min。
十、靠近底部的紅細(xì)胞層之上的白黃色的層面即為純化的微血管段，吸出后DMEM漂洗兩次(離心1000×rpm，6min，室溫)，去上清液。
加入DMEM培養(yǎng)液(20％FBS，4ug/ml素 )重懸浮，接種于含5％的大鼠 血清37℃孵育過夜所制備的細(xì)胞培養(yǎng)皿中，置于37℃、5％CO2培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)24h后更換不含素的混合培養(yǎng)基，隨后隔天換液。
注意事項：
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中，yi酶消化時間不宜過長，否則會影響細(xì)胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和技術(shù)部溝通；由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，詳盡告知細(xì)胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。
公司正在出售的產(chǎn)品：
人椎間盤纖維環(huán)細(xì)胞 | 16HBE (人支氣管上皮樣細(xì)胞) |
三聚氰胺單克隆抗體 | 生物標(biāo)記的多肽N-乙酰氨基半乳糖轉(zhuǎn)移1抗體 |
TE-1 (人食管癌細(xì)胞) (STR鑒定正確) | 生物標(biāo)記的色氨羥化抗體 |
TF-1 (人血液白血病細(xì)胞) (STR鑒定正確) | 生物標(biāo)記的視神變誘導(dǎo)蛋白抗體 |
THP-1 (人單核細(xì)胞白血病) (STR鑒定正確) | 生物標(biāo)記的6號染色體開放閱讀框191抗體 |
TSCCa (人舌鱗癌細(xì)胞) | 生物標(biāo)記的磷化神經(jīng)突觸1抗體 |
U-2 OS [U2OS] (人骨肉瘤細(xì)胞) (STR鑒定正確) | 生物標(biāo)記的接頭蛋白DOK7抗體 |
U251 (人膠質(zhì)瘤細(xì)胞) (STR鑒定正確) | 生物標(biāo)記的LRRC39蛋白抗體 |
U-87 MG (人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞) (STR鑒定正確) | 生物標(biāo)記的血管生長因子VG5Q抗體 |
U-937 (人組織細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞) (STR鑒定正確) | 生物標(biāo)記的MREG蛋白抗體 |
VCaP (人前列腺癌細(xì)胞) (STR鑒定正確) | 生物標(biāo)記的22號染色體開放閱讀框29抗體 |
WI-38 (人胚肺細(xì)胞) (STR鑒定正確) | 兔冠狀動脈平滑肌細(xì)胞生物標(biāo)記的FLJ40288蛋白抗體 |
WISH (人羊膜細(xì)胞) (Hela污染細(xì)胞系) | 生物標(biāo)記的轉(zhuǎn)錄因子MYB相關(guān)蛋白B抗體 |
ZR-75-1 (人乳腺癌細(xì)胞) (STR鑒定正確) | 生物標(biāo)記的細(xì)胞周期蛋白依賴性激抑制劑2C抗體 |
CAL 27 (人舌鱗癌細(xì)胞) (STR鑒定正確) | 生物標(biāo)記的細(xì)胞角蛋白2e抗體 |
化工儀器網(wǎng)