詳細介紹
注意事項
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器、耗材應(yīng)獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在第一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨存放。
6.為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進行任何標(biāo)記。
7.儀器擴增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進行無害化處理后方可丟棄。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:人免疫缺陷病毒I型通用RT-PCR試劑盒50次
產(chǎn)品貨號:FS-P013482
產(chǎn)品規(guī)格:50次
產(chǎn)品分類:純化試劑盒
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
實驗過程:
一、試劑準(zhǔn)備 1. DNA模板 2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 二、操作步驟 1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。 2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。 3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。 |
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
3.樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。
Phospho-RSK2 (Ser227) /FITC 熒光標(biāo)記磷化核糖體S6激RSK2抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
SRG2 /FITC 熒光標(biāo)記突觸結(jié)合蛋白相關(guān)基因2抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh AGT 血管緊張原抗體 0.1ml
Rabbit Guinea pig IgG/RBITC 羅丹明標(biāo)記的兔抗豚鼠IgG 0.3ml
GLUT3 葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白3抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Goat IgG/PE PE標(biāo)記的兔抗羊IgG 0.1ml
SRG2 /FITC 熒光標(biāo)記突觸結(jié)合蛋白相關(guān)基因2抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
MHB(Human Methemoglobin) ELISA Kit 人高鐵血紅蛋白Multi-class antibodies: 48T
PTTG 垂體轉(zhuǎn)化基因抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh HAUS4/C14orf94 14號染色體開放閱讀框94抗體 0.2ml
Cyclin-D2 ELISA Kit 大鼠細胞周期D2 96T
PSGD/HOXB13 同源盒蛋白HOXB13抗體 0.2ml
phospho-Bik(Thr33) 磷化促凋亡Bik蛋白抗體 0.1ml
PTTG 垂體轉(zhuǎn)化基因抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rabbit MG IgG/Cy7 Cy7標(biāo)記的兔抗長爪沙鼠IgG 0.1ml
GLI1 腦膠質(zhì)瘤相關(guān)蛋白抗體(鋅指蛋白5) 0.1ml
Rhesus antibody Rh APPL1 銜接因子蛋白含pH域磷酪結(jié)合域和亮拉鏈蛋白1抗體 0.1ml
phospho-IKK gamma (Ser31) /FITC 熒光標(biāo)記磷化核因子κB激gamma抑制劑抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit MG IgG/PE-Cy7 PE-Cy7標(biāo)記的兔抗長爪沙鼠IgG 0.1ml
Phospho-Rb (Ser807/Ser811)/FITC 熒光標(biāo)記磷化視網(wǎng)膜母細胞瘤相關(guān)蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
人免疫缺陷病毒I型通用RT-PCR試劑盒50次滄州擬諾卡氏菌種屬: Nocardiopsis│cangzhouensis分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 模式菌株培養(yǎng)基: 0424生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
西蘭地沙門氏菌種屬: Salmonella│selandia提供形式: 凍結(jié)物安全等級: 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 3,15 e,h 1,7培養(yǎng)基: CM0051生長條件: 37℃存儲條件: 定期移植法
鏈霉菌種屬: Streptomyces│sp.分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0149生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
蘇云金芽胞桿菌種屬: Bacillus│thuringiensis分離基物: 1-5cm土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 科研研究培養(yǎng)基: 0002生長條件: 30℃存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;礦物油法
人抗白蛋白抗體(AAA)ELISA試劑盒羅丹明6G AR芘 99%華法林
人抗α干擾抗體(IFNα-Ab)ELISA試劑盒玫瑰紅 Indicator二異 94%華法林(標(biāo)準(zhǔn)品)
人抗α-胞襯蛋白抗體IgG/IgA(α-Fodrin IgG/IgA)ELISA試劑盒蘇丹Ⅳ AR1-十二烯 95%白楊(標(biāo)準(zhǔn)品)
人抗sp100抗體(sp100)ELISA試劑盒蘇丹Ⅳ 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥96.0% (HPLC),用于食品分析1-癸烯 95%白楊
人抗Smith抗體(Sm)ELISA試劑盒蘇丹II Biological stain十六烯 94%芒柄花(標(biāo)準(zhǔn)品)
人抗Sc1-70抗體(Sc1-70-Ab)ELISA試劑盒蘇丹II 90%1-辛烯 98%芒柄花
人抗Sa抗體(anti-Sa-Ab)ELISA試劑盒蘇丹 分析標(biāo)準(zhǔn)品1-十四烯 95%大豆,黃元(標(biāo)準(zhǔn)品)
人抗Q熱抗體(anti-Q-Ab)ELISA試劑盒蘇丹 高純級甲 Standard for GC, ≥99.5% (GC)大豆,黃元
人抗Mi2抗體(anti-Mi2-Ab)ELISA試劑盒蘇丹 Biological stain甲 色譜固定液,140℃+++D-別蘇氨
人抗Ku抗體(anti-Ku-Ab)ELISA試劑盒蘇丹Ⅰ AR甲 CP,98%醋去氧皮質(zhì)酮
人抗IgA抗體(anti-IgA-Ab)ELISA試劑盒蘇丹I Dye content 98%甲 無級, 99.8%醋去氧皮質(zhì)酮(標(biāo)準(zhǔn)品)
人抗DNAB抗體(anti-DNase B)ELISA試劑盒B AR甲 ACS, ≥99.0%奧美沙坦酯
人抗DNAB抗體(anti-DNase B Ab)ELISA試劑盒B 分析標(biāo)準(zhǔn)品甲 分析標(biāo)準(zhǔn)品奧美沙坦酯
人抗BP180抗體(BP180-Ab)ELISA試劑盒蘇丹1 分析標(biāo)準(zhǔn)品,用于食品分析,≥98.5% (HPLC)甲 AR,99%四氫生物蝶呤;沙蝶呤;(6R)-BH4
人抗BP180抗體(anti-BP180-Ab)ELISA試劑盒百里香酚酞 AR甲 >99.0% (GC)安倍生坦
人抗BB抗體(BB-Ab)ELISA試劑盒鈦鐵試劑 AR甲 重蒸餾, ≥99.5%安倍生坦(標(biāo)準(zhǔn)品)