產(chǎn)品簡介
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 |
---|---|---|---|
貨號 | A01X2225 | 主要用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) |
組織來源 | 正常牙組織 | 種屬來源 | 兔 |
上海撫生實(shí)業(yè)有限公司 |
—— 銷售熱線 ——
18201748966 |
參考價 | ¥4050 |
5×105 | 4050元 | 15 瓶 可售 |
更新時間:2024-03-29 14:51:20瀏覽次數(shù):472
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 |
---|---|---|---|
貨號 | A01X2225 | 主要用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) |
組織來源 | 正常牙組織 | 種屬來源 | 兔 |
兔牙周膜成纖維細(xì)胞
一、細(xì)胞基本屬性
細(xì)胞名稱 | 兔牙周膜成纖維細(xì)胞 | 商品貨號 | A01X2225 |
組織來源 | 正常牙組織 | 種屬來源 | 兔 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 生長特性 | 貼壁 |
換液頻率 | 每2-3天換液一次 | 細(xì)胞形態(tài) | 成纖維樣細(xì)胞 |
培養(yǎng)基:原代成纖維細(xì)胞培養(yǎng)體系
傳代特性:根據(jù)細(xì)胞特性
消化液:0.25%胰dan白酶
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
細(xì)胞簡介:牙周膜由致密結(jié)締組織所構(gòu)成,牙周膜內(nèi)有神經(jīng)、血管、淋巴和上皮細(xì)胞。
牙周膜成纖維細(xì)胞是牙周膜中主要的細(xì)胞,其功能是參與膠原蛋白的合成與吸收,使牙周膜中的膠原能不斷更新;還與基質(zhì)形成有關(guān)。
作為牙周膜的主體細(xì)胞,參與了牙周組織的病變、修復(fù)及再生過程?,F(xiàn)在, 利用牙周膜細(xì)胞建立體外模型, 已經(jīng)成為有關(guān)人員研究牙周組織疾病的重要手段。
原代細(xì)胞分離培養(yǎng)的思路:
取材--分離--培養(yǎng)--鑒定
首先將組織從機(jī)體中取出,經(jīng)胰dan白酶/膠原酶處理后分散成單細(xì)胞,再在合適的培養(yǎng)基中培養(yǎng),使細(xì)胞繁殖到一定系數(shù)后進(jìn)行細(xì)胞鑒定。
實(shí)驗(yàn)步驟:
一、取7-10d雄性SD大鼠,頸椎脫臼處死,浸泡于75%乙醇消毒3-5min。
二、在超凈工作臺中,將大鼠斷頭置于玻璃培養(yǎng)皿中,打開顱腔后取出全腦,放在盛有預(yù)冷的PBS玻璃培養(yǎng)皿中,去除小腦和間腦。
三、將大腦半球在干濾紙上緩慢滾動以去除軟腦膜和腦膜大血管,再放在新的盛有預(yù)冷的PBS玻璃培養(yǎng)皿中。
四、用細(xì)解剖鑷去除大腦白質(zhì)、殘余大血管和軟腦膜,保留大腦皮質(zhì)。
五、大腦皮質(zhì)放于DMEM中,剪碎成約1mm3大小,放入50ml的離心管中,加入混合酶液I(0.05-0 .1%II型膠原酶,0 .025-0 .05%IV型膠原酶,200-400U DNaseI),混勻后37℃水浴消化1-1.5h。
六、室溫1 000×g離心8min,去上清液。
七、沉淀中加入20%BSA重懸浮,充分混勻,1 000×g,20min,4℃離心,去上清。
八、沉淀加入4ml混合酶液II( 0.05-0.1%的膠原酶/分散酶,0.05-0.1%I型膠原酶,100-300U DNaseI )重懸浮,混勻,37℃水浴消化0.5-1h,700×g室溫離心6min,去上清液。
九、沉淀加入2ml DMEM培養(yǎng)液懸浮混勻,鋪于經(jīng)離心形成連續(xù)梯度的12ml 50%Percoll(25 000×g,60min,4℃),1000×g,4℃離心10min。
十、靠近底部的紅細(xì)胞層之上的白黃色的層面即為純化的微血管段,吸出后DMEM漂洗兩次(離心1000×rpm,6min,室溫),去上清液。
加入DMEM培養(yǎng)液(20%FBS,4ug/ml素 )重懸浮,接種于含5%的大鼠 血清37℃孵育過夜所制備的細(xì)胞培養(yǎng)皿中,置于37℃、5%CO2培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)24h后更換不含素的混合培養(yǎng)基,隨后隔天換液。
注意事項(xiàng):
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,yi酶消化時間不宜過長,否則會影響細(xì)胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和技術(shù)部溝通;由于運(yùn)輸?shù)脑?,個別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,詳盡告知細(xì)胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。
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