詳細介紹
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:豬源性成分PCR試劑盒
產(chǎn)品貨號:FS-P013368
產(chǎn)品規(guī)格: 50次
產(chǎn)品分類:純化試劑盒
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
實驗過程:
一、試劑準備 1. DNA模板 2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 二、操作步驟 1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。 2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。 3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。 |
注意事項
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個檢測過程應(yīng)嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器、耗材應(yīng)獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在第一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū),并單獨存放。
6.為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進行任何標記。
7.儀器擴增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進行無害化處理后方可丟棄。
LDL ELISA Kit 大鼠低密度脂蛋白Multi-class antibodies: 48T
Tap1/ABCB2 ATP結(jié)合轉(zhuǎn)運因子1抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Goat Chicken IgG/PE PE標記的羊抗雞IgG 0.1ml
NGAL(Human neutrophil gelatinase-associated lipocalin) ELISA Kit 人中性粒細胞明膠相關(guān)脂質(zhì)運載蛋白 96T
NLGN4X 神經(jīng)元X連鎖蛋白/兒童自閉癥相關(guān)蛋白抗體 0.2ml
BEND2 BEND2蛋白抗體 0.2ml
Tap1/ABCB2 ATP結(jié)合轉(zhuǎn)運因子1抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
AAA(Human albumin antibody) ELISA Kit 人抗白蛋白抗體Multi-class antibodies: 48T
IL-16 白介16抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh LZTS1 假定抑制亮拉鏈蛋白1抗體 0.2ml
FFA(Human free fatty acids) ELISA Kit 人游離脂肪 96T
Rad51 Rad51抗體 0.1ml
CCR-2 細胞表面趨化因子受體2抗體 0.1ml
IL-16 白介16抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rabbit MK IgM/PE PE標記的兔抗猴IgM 0.1ml
GABPB2 核呼吸因子2抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh ANKRD12 錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白12抗體 0.2ml
Phospho-IRAK1 (Thr209) /FITC 熒光標記磷化白介-1受體相關(guān)激1抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit human IgG F(ab')2/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標記的兔抗人IgG F(ab')2 0.1ml
Phospho-SATB1 (Ser47)/FITC 熒光標記磷化核基質(zhì)結(jié)合區(qū)結(jié)合蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
豬源性成分PCR試劑盒人磷脂D2(PLD2)elisa檢測試劑盒
人磷肌醇-3-催化亞基σ肽(PIK3Cσ)elisa檢測試劑盒
人磷脂B(PLB)elisa檢測試劑盒
人γ干擾誘導(dǎo)單核因子(MIγ/CXCL9)elisa檢測試劑盒
人α谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移(α-GST)elisa檢測試劑盒
人TATA框結(jié)合蛋白相關(guān)因子13(TAF13)elisa檢測試劑盒
人γ谷氨酰半胱合成(γ-ECS)elisa檢測試劑盒
人X組磷脂A2(PLA2G10)elisa檢測試劑盒
人XC趨化因子受體1(XCR1)elisa檢測試劑盒
人β血小板球蛋白/β血栓環(huán)蛋白(β-TG)elisa檢測試劑盒
人白介1受體關(guān)聯(lián)3 (IRAK3)elisa檢測試劑盒
人T特異性鳥苷三磷(Tgtp)elisa檢測試劑盒
人αL艾杜糖(IDUα)elisa檢測試劑盒
人Syncollin蛋白(SYCN)elisa檢測試劑盒
人α1抗胰蛋白(α1-AT)elisa檢測試劑盒
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設(shè)置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
3.樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。