操作規(guī)程:
1、在96孔板加入細(xì)胞00μL/孔,通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入00微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實驗每孔加入00微升5000~0000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及00%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×00
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時的藥物濃度(IC90)
中文名稱:鞭毛染色液(Loffler法)
英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:2×50ml 發(fā)貨周期:1~3天 用途: 又稱羅夫藍(lán)染色,試劑操作簡單,結(jié)果判斷更可靠 注意事項: 細(xì)菌鞭毛是細(xì)菌的運動器官,幽門螺桿菌能夠從強酸性的胃內(nèi)腔穿過胃上皮細(xì)胞上的黏液層達(dá)到胃上皮細(xì)胞的中性環(huán)境,這就是鞭毛運動作用的很好例證。通過鞭毛染色,可以觀察到鞭毛形態(tài)、數(shù)量和鞭毛在菌體分布的位置,鞭毛數(shù)量和在菌體上的分布位置是鑒定細(xì)菌的重要依據(jù)之一 儲存條件:室溫,避光,12個月 |
注意事項:
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導(dǎo)致錯誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長時間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會增加空白吸收,從而影響檢測結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性,則測定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進行檢測。
9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時間的長短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實驗情況而定,對于大多數(shù)情況孵育 1 小時即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長時間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測,MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
波羅的海萊茵海默氏菌頂體前體蛋白抗體Human MBIP ELISA Kit小鼠中性粒彈性蛋白(NE)免疫試劑盒
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Phoma medicaginis var. medicaginis脂肪增強結(jié)合蛋白1Human MAGEB18 ELISA Kit小鼠粘蛋白/粘液2(MUC2)免疫試劑盒
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型副傷寒沙門菌Salmonella│paratyphi A 質(zhì)量規(guī)格:>98%,進分變腎上腺試劑盒柚皮-7-O-葡萄糖苷
: =IFO14056資源名稱: 印度斯坦鏈異壁菌 質(zhì)量規(guī)格:>99%,AR鞭毛蛋白試劑盒茵芋堿
鞭毛染色液(Loffler法)曲利藍(lán)
其他臺盼藍(lán);臺盼蘭;曲利本蘭;錐蟲藍(lán);直接藍(lán)3B;錐藍(lán);直接藍(lán)14;曲利本藍(lán);3,3'-{[3,3'-二甲基-(1,1'-二基)-4,4'-二基]雙(偶氮)}-雙(5-基-4-羥基-2,7-萘二磺)四鈉鹽;錐蟲蘭;雙(甲基偶氮基萘酚二磺鈉)
英文名稱:Trypan blue
其他英文名稱:Sodiumditolyl-4,4-bis(2-azo-8-amino-1-naphthol-3,6-disulfonate);Naphthyl-amine blue;Benzamine blue;Direct blue 14;Benzo blue 3B;Direct blue 3B;Niagara blue 3B;Diamino blue 3B
產(chǎn)品規(guī)格:AR,60%
包裝:5克/25克/100克/500克
CAS號:72-57-1
C34H24N6Na4O14S4=960.81
級別:AR
含量:≥60.0%
保存:RT