詳細介紹
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:非洲豬瘟病毒探針法熒光定量PCR試劑盒50次
產(chǎn)品貨號:FS-P013483
產(chǎn)品規(guī)格:50次
產(chǎn)品分類:純化試劑盒
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
實驗過程:
一、試劑準備 1. DNA模板 2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 二、操作步驟 1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。 2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。 3.結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。 |
注意事項
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器、耗材應獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解,樣本處理過程應在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻,并應瞬時離心。
5.試劑盒內所配陰性和陽性對照在第一次使用前應全部轉移至標本準備區(qū),并單獨存放。
6.為防止熒光干擾,應避免裸手直接接觸PCR反應管,并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7.儀器擴增相關參數(shù)應按照本說明書相關要求進行設置;不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
RSK3/Ribosomal S6 kinase 3/FITC 熒光標記核糖體蛋白S6激家族RSK3抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
SRG11/Spata17/FITC 熒光標記凋亡基因抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh AGPB/Alpha 1 acid glycoprotein 2 α1性糖蛋白2抗體(類粘蛋白2) 0.2ml
Rabbit Guinea pig IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標記的兔抗豚鼠IgG 0.1ml
glypican 3 磷脂酰基醇蛋白聚糖-3抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Goat IgG/FITC FITC標記的兔抗羊IgG 0.3ml
SRG11/Spata17/FITC 熒光標記凋亡基因抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
CTX(Human cytotoxin) ELISA Kit 人細胞Multi-class antibodies: 48T
Phospho-PLC beta3 (Ser537) 磷化磷酯Cβ3抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rhesus antibody Rh HIG1/HIGD1A 缺氧誘導基因1蛋白抗體 0.2ml
AT II R1(Human angiotension II receptor 1 Antibody) ELISA Kit 人血管緊張Ⅱ受體1抗體 96T
PSF2 PSF2蛋白抗體 0.2ml
C7orf65 7號染色體開放閱讀框65抗體 0.2ml
Phospho-PLC beta3 (Ser537) 磷化磷酯Cβ3抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rabbit MG IgG/RBITC 羅丹明標記的兔抗長爪沙鼠IgG 0.3ml
GRO gamma/CXCL3 生長調節(jié)致癌基因gamma(GROγ)抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh APR3/C2orf28 凋亡相關蛋白3抗體 0.2ml
phospho-IKK gamma (Ser85) /FITC 熒光標記磷化核因子κB激gamma抑制劑抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit MG IgG/RBITC 羅丹明標記的兔抗長爪沙鼠IgG 0.3ml
Phospho-Rb (Ser780)/FITC 熒光標記磷化視網(wǎng)膜母細胞瘤相關蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
非洲豬瘟病毒探針法熒光定量PCR試劑盒50次菲律賓鏈霉菌種屬: StreptomycesfilipinensisAmmannetal.安全等級: 1模式菌株: yes應用領域: 模式菌株,產(chǎn)菲律賓菌。培養(yǎng)基: 38生長條件: 26℃
東方諾卡氏菌種屬: Nocardia│orientalis提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 573生長條件: 30℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
嗜松青霉種屬: Penicillium pinophilum提供形式: 凍干粉安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 14生長條件: 25℃
稻腸桿菌種屬: Enterobacter│Oryzae分離基物: 廣州刺竹根提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 研究培養(yǎng)基: 0003生長條件: 30℃存儲條件: -80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法;礦物油法
軍團菌抗原(LP Ag)ELISA試劑盒鈦鐵試劑 95% >99.0%(GC)鹽決奈達隆
軍團菌抗體IgM(LP Ab-IgM)ELISA試劑盒甲藍O Biological stain AR決奈達隆(標準品)
軍團菌抗體IgG(LP Ab-IgG)ELISA試劑盒達旦黃 CP Standard for GC雷諾
軍團菌抗體IgA(LP Ab-IgA)ELISA試劑盒百里香酚酞絡合劑 Indicator,1G/L4-乙酰 98%雷諾(標準品)
卷曲蛋白8(FZD8)ELISA試劑盒維多利亞藍B Biological stain3-乙?;?98%樂卡地平鹽鹽
聚集蛋白(Agrin)ELISA試劑盒鋅試劑 ≥85%(HPLC)4-乙?;?97%樂卡地平鹽鹽(標準品)
巨噬移動因子(MIF)ELISA試劑盒二乙基二硫代氨鋅 98%5-乙?;绶?2- 98%鹽異
巨噬移動抑制因子(MIF)ELISA試劑盒鉑 六合物 AR,Pt ≥37.5%3-甲酰氨 95%阿戈美拉汀(II型)
巨噬炎性蛋白5(MIP-5)ELISA試劑盒金 48~50% Au basis3-氨基鹽鹽 98%阿戈美拉?。↖型)
巨噬炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)ELISA試劑盒銥 Ir 35% in HCl4-氨酰 98%吡
巨噬炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)ELISA試劑盒三化銥 試劑級,Ir>52%2-氨基-5-硝基-6-甲基吡啶 98%雷美替
巨噬炎性蛋白2(MIP-2)ELISA試劑盒化鈀 Pd 59-60%2-氨基-3-硝基-6-甲基吡啶 98%拉科酰
巨噬炎性蛋白1β(MIP-1β/CCL4)ELISA試劑盒硝鈀(II) 合物 Pd ≥39.0%4-聯(lián) 98%米那普侖鹽鹽
巨噬炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)ELISA試劑盒鈀粉 99.9% metals basis,粒徑0.5μm正丁基 98%米那普侖鹽鹽(標準品)
巨噬替代激活相關化學因子1(AmAC-1)ELISA試劑盒亞鈀 Pd ≥32.6% 2,3-二氟溴 98%丁那
巨噬趨化因子(MCF)ELISA試劑盒硝銠溶液 10 % 溶液2,4-二氟溴 98%丁那(標準品)
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
3.樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值。