詳細介紹
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:鴨瘟病毒PCR試劑盒50次
產(chǎn)品貨號:FS-P013571
產(chǎn)品規(guī)格:50次
產(chǎn)品分類:純化試劑盒
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
實驗過程:
一、試劑準備 1. DNA模板 2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 二、操作步驟 1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。 2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。 3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。 |
注意事項
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個檢測過程應(yīng)嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器、耗材應(yīng)獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在第一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū),并單獨存放。
6.為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進行任何標記。
7.儀器擴增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進行無害化處理后方可丟棄。
Human histatin 5,HTN5 ELISA Kit 人富組蛋白Multi-class antibodies: 48T
Smad7 Smad 7抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rhesus antibody Rh Goat rabbit IgG/APC APC標記的羊抗兔IgG 0.1ml
AQP-5(Mouse Aquaporin 5) ELISA Kit 小鼠通道蛋白5 96T
NUP88 核孔復(fù)合體蛋白88抗體 0.2ml
Batroxobin Protein 蛇毒巴曲抗體 0.2ml
Smad7 Smad 7抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
E(Human estrogen) ELISA Kit 人雌Multi-class antibodies: 48T
lamin A 核纖層蛋白A抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh KLHL22 Kelch樣蛋白22抗體 0.2ml
OXR(Human Orexin receptor) ELISA Kit 人食欲受體 96T
Profilin 2 前纖維蛋白2抗體 0.1ml
CD2BP3 CD2結(jié)合蛋白3抗體 0.2ml
lamin A 核纖層蛋白A抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Donkey Goat IgG/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標記的驢抗羊IgG 0.1ml
GLT28D1 糖基轉(zhuǎn)移28家族1抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh ASF1A 細胞衰老相關(guān)蛋白ASF1A抗體 0.1ml
HSP-47/FITC 熒光標記熱休克蛋白-47蛋白抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit mouse IgG/Cy3 Cy3標記的兔抗小鼠IgG 0.1ml
Phospho-Pin1 (Ser16)/FITC 熒光標記磷化肽基脯氨酞順反異構(gòu)Pinl抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
鴨瘟病毒PCR試劑盒50次非O1群霍亂弧菌種屬: Vibrio│cholerae non-O1提供形式: 凍干物安全等級: 3模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 分型血清 非O1 VBO-90培養(yǎng)基: CM0116生長條件: 37℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
肉桂色曲霉種屬: Aspergillus│cinnamomeus提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 糖化作用。培養(yǎng)基: CM0077生長條件: 28℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
Stigmatellaerecta種屬: Stigmatellaerecta分離基物: 楊樹皮,加拿大安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 169生長條件: 30℃
大腸埃希氏菌種屬: Escherichia│coli提供形式: 凍干物安全等級: 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 致病菌檢測芯片培養(yǎng)基: 51生長條件: 37℃存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Ⅱ型前膠原羧基端肽(PⅡCP)ELISA試劑盒次硝鉍 AR,99.5%1H-咪唑-4-甲 98%葡萄糖-6-脫氫
Ⅱ型前膠原N端前肽(PⅡNP)ELISA試劑盒硝鉍 CP,99.0%三氟磺酐 98%戊二(>98%,BR)
Ⅱ型膠原螺旋肽(HELIX-Ⅱ)ELISA試劑盒次碳鉍 AR,90.0%3-溴 98%戊二酐(>96%,BR)
Ⅱ型膠原交聯(lián)C端肽(CTX-Ⅱ)ELISA試劑盒化鈣,二 AR并-15-冠-5 98%三醋甘油酯(>98%,BR)
Ⅱ型膠原代謝產(chǎn)物C2C(C2C)ELISA試劑盒無化鈣 AR,96.0%鄰二酚-O,O′-二乙 97%甘氨鈉(>98%,BR)
Ⅱ型膠原C端肽(CTX-Ⅱ)ELISA試劑盒無化鈣 CP,96.0%1-(3-氨基基)吡咯 97%乙(>98%,BR)
Ⅱ型膠原(Col Ⅱ)ELISA試劑盒無化鈣 ACS2-氧基溴乙 98%硬脂單甘油酯(>98%,BR)
Ⅱ型肺泡表面抗原(KL-6/MUC1)ELISA試劑盒無化鈣 99.99% metals basis代異丁 98%化金
Ⅰ型前膠原羧基末端前肽(PⅠCP)ELISA試劑盒檸檬,一 99.995% metals basis代正 99%石墨粉(>99%,BR)
Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)ELISA試劑盒尼泊金乙酯 AR,99%代正 分析標準品,≥99.8% (GC)硝胍(分子生物學(xué)級)
Ⅰ型前膠原氨基端肽(PⅠNP)ELISA試劑盒硫亞鐵,七 AR代仲丁 99%己二(>98%,BR)
Ⅰ型前膠原N端前肽(PⅠNP)ELISA試劑盒硫亞鐵,七 99.99% metals basis1-代正戊 Standard for GC, ≥99.5% (GC)六甲基酰三(>98%,BR)
Ⅰ型前膠原C末端肽(CⅠCP)ELISA試劑盒硫亞鐵,七 ACS, ≥99.0%1-代正戊 99%還原茚三酮二合物(>98%,BR)
Ⅰ型膠原羧基端肽(ⅠCTP)ELISA試劑盒硫亞鐵,七 for plant cell culture, ≥99%環(huán)戊乙 98%氫(>40%,BC)
Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽(CTX-I)ELISA試劑盒檸檬 CP,99.0%1,4-二丁 98%中粘度羥基纖維
Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽(ⅠCTP)ELISA試劑盒鈉石灰 醫(yī)用級,紅色2-羥基-4-甲氧基甲 98%3-吲哚基-beta-D-吡喃半乳糖苷(>98%(TLC),BR)
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設(shè)置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
3.樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。