操作規(guī)程:
1、在96孔板加入細胞00μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入00微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入00微升5000~0000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及00%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×00
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時的藥物濃度(IC90)
中文名稱:Caspase-3活性測定試劑盒
英文名稱:Caspase-3 Activity colorimetric assay Kit
產(chǎn)品規(guī)格:20T|50T|100T
發(fā)貨周期:1~3天
本試劑盒適用于測定哺乳動物組織、細胞caspase-3活性。測定原理基于Caspase-3特異水解多肽底物acetyl-Asp-Glu-Val-Asp p-nitroanilide(Ac-DEVD-pNA),釋放硝基pNA。游離硝基pNA呈黃色在405nm具有大吸收峰,用普通可見光分光光度比色方法測定。根據(jù)pNA標準管吸光度OD值和標準曲線,計算來自底物肽釋放的pNA濃度,得到Caspase-3水解活性。 |
Caspase-3是凋亡過程中主要的終末剪切酶,因而也是研究多的caspase,它激活pro-caspase-2,6,7,9等,特異水解多種凋亡關(guān)鍵蛋白如PARP,介導(dǎo)細胞核染色質(zhì)固縮、凋亡小體生成、核DNA斷裂。
運輸及保存:試劑常溫運輸。到達后按要求儲存,1年內(nèi)穩(wěn)定。
所需儀器:酶標儀與96孔酶標板;或可見光分光光度計配100μl容積的石英比色杯。
工作波長:大吸收波長405nm,如不具備也可在400~450nm范圍內(nèi)測定,但靈敏度略降。
注意事項:
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。
4、樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導(dǎo)致錯誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長時間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會增加空白吸收,從而影響檢測結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性,則測定不含細胞,僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進行檢測。
9、細胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時間的長短根據(jù)細胞的類型和細胞的密度等實驗情況而定,對于大多數(shù)情況孵育 1 小時即可,白細胞需要培養(yǎng)較長時間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測,MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
磺二嘧啶 (標準品)英文名稱: Oseltamivir phosphate 凝集蛋白家族11抗體包裝1g
磺二氧基嘧啶(標準品)英文名稱: Oseltamivir phosphate 銅代謝結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體包裝5g
磺惡唑(標準品)英文名稱: Dibucaine HCl20號染色體開放閱讀框96抗體包裝25g
磺基嘧啶(標準品)英文名稱: Donepezil 3號染色體開放閱讀框26抗體包裝5g
磺氧噠(標準品)英文名稱: Doripenem 粘附分子2抗體包裝25g
磺間二氧嘧啶鈉(標準品)英文名稱: Doripenem 耳聾-狀腺腫綜合征相關(guān)COBL蛋白抗體包裝5g
磺間氧嘧啶(標準品)英文名稱: Doxapram Hydrochloride20號染色體開放閱讀框195抗體包裝1g
磺脒(標準品)英文名稱: Doxapram Hydrochloride7號染色體開放閱讀框62抗體包裝1g
磺嘧啶(標準品)英文名稱: Doxylamine succinate9號染色體開放閱讀框174抗體包裝1g
磺嘧啶鈉(標準品)英文名稱: Doxylamine succinate6號染色體開放閱讀框64抗體包裝25g
磺嘧啶銀(標準品)英文名稱: Drospirenone免疫球蛋白G Fc段受體Ⅱ抗體包裝5g
磺噻唑(標準品)英文名稱: Drospirenone透明質(zhì)介導(dǎo)游走受體抗體包裝1g
磺異噁唑(標準品)英文名稱: Ethiny Estradiol周期樣Y1抗體包裝5g
磺芐西林(標準品)英文名稱: Ethiny Estradiol周期J抗體包裝100ml
磺草靈(標準品)英文名稱: Ethionamide周期L抗體包裝25g
小單孢菌屬Micromonospora│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR心肌肌鈣蛋白Ⅰ試劑盒吳茱萸內(nèi)酯;Evodine
地衣芽孢桿菌Bacillus│licheniformis 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BP協(xié)同激分子受體試劑盒五味子;Schisandrin C
鏈狀假絲酵母Candida│catenulata 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品小而密低密度脂蛋白試劑盒五味子乙;schisandrol B
Caspase-3活性測定試劑盒鹽黃連
其他 鹽小檗堿;小檗堿鹽鹽;3-二正丁基基-1-炔;黃苓苷;鹽小薜堿;黃蓮鹽鹽
英文名稱: Berberine hydrochloride
其他英文名稱: Berberine chloride form;Natural Yellow 18
產(chǎn)品規(guī)格: BR,98%
包 裝: 5克/25克
產(chǎn)品規(guī)格: 分析標準品,98%
包 裝: 20毫克
CAS號:633-65-8
C20H18ClNO4=371.81
級別:BR
含量:≥98.0%(TLC)
水分:8~15%
級別:分析標準品
含量:≥98.0%(TLC)
性狀:黃色至橙色粉末。一種生物堿,熔點:200℃。
用途:生化研究。用于在肥大細胞中肝鈉的熒光染色。一種生物堿,帶有弱的特性,多重耐藥外排泵(MDR efflux pumps)的底物。 berberine的抗微生物活性可被MDR抑制劑5-methoxyhydnocarpin (5-MHC)強化。Berberine調(diào)控肝癌細胞Pgp基因的表達
保存:RT