詳細(xì)介紹
培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
產(chǎn)品屬于:
中文名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
Hoechst 33342 | 10mg | 1~3天 |
商品介紹:
本Hoechst 33342是一種可以穿透細(xì)胞膜的藍(lán)色熒光染料,對(duì)細(xì)胞的毒性較低。 Hoechst 33342染色常用于細(xì)胞凋亡檢測(cè),染色后用熒光顯微鏡觀(guān)察或流式細(xì)胞儀檢測(cè)。Hoechst 33342也常用于普通的細(xì)胞核染色,或常規(guī)的DNA染色。 Hoechst 33342的最大激發(fā)波長(zhǎng)為346nm,最大發(fā)射波長(zhǎng)為460nm;Hoechst 33342和雙鏈DNA結(jié)合后,最大激發(fā)波長(zhǎng)為350nm,最大發(fā)射波長(zhǎng)為461nm。 |
Hoechst 33342溶于水,溶解度可達(dá)20mg/ml。用于細(xì)胞核染色時(shí),推薦的Hoechst 33342工作濃度為0.5-10μg/ml。
CAS:23491-52-3
分子式:C27H28N6O·3HCl·3H2O
分子量:615.99
儲(chǔ)存條件:-20℃避光,有效期一年。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀(guān)察圖像并拍照。
磷酸肌醇3激酶(PI3K)elisa試劑盒英文名稱(chēng):PI3K ELISA Kit自噬相關(guān)蛋白4D抗體包裝25g
磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(pAMPK)elisa試劑盒英文名稱(chēng):pAMPK ELISA Kit自噬相關(guān)蛋白9A抗體包裝5g
磷酸化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶(p-ERK)elisa試劑盒英文名稱(chēng):p-ERK ELISA Kit縮酶C抗體包裝500mg
磷酸化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶(pERK)elisa試劑盒英文名稱(chēng):pERK ELISA Kit谷草轉(zhuǎn)氨酶抗體包裝100g
磷酸化酪蛋白激酶JAK3(pJAK3)elisa試劑盒英文名稱(chēng):pJAK3 ELISA Kit三磷酸腺苷結(jié)合轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白G超家族成員5抗體包裝25g
磷酸化核因子-κB(p-NF-κB)elisa試劑盒英文名稱(chēng):p-NF-κB ELISA Kit三磷酸腺苷結(jié)合轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白G超家族成員8抗體包裝500g
磷酸化蛋白激酶C(P-PKC)elisa試劑盒英文名稱(chēng):P-PKC ELISA Kit?;摎涿搁L(zhǎng)鏈抗體包裝25g
磷酸化蛋白激酶B(P-PKB)elisa試劑盒英文名稱(chēng):P-PKB ELISA Kit酰基脫氫酶中鏈抗體包裝5g
磷酸化表皮生長(zhǎng)因子受體(pEGFR)elisa試劑盒英文名稱(chēng):pEGFR ELISA Kit?;摎涿付替溈贵w包裝1g
磷酸化氨基末端蛋白激酶(P-JNK)elisa試劑盒英文名稱(chēng):P-JNK ELISA Kit過(guò)氧化物酶?;趸?抗體包裝25g
淋巴細(xì)胞趨化因子(Lptn/LTN/XCL1)elisa試劑盒英文名稱(chēng):Lptn/LTN/XCL1 ELISA Kit磷酸化凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激酶1抗體包裝5g
淋巴細(xì)胞功能相關(guān)抗原3(LFA-3/CD58)elisa試劑盒英文名稱(chēng):LFA-3/CD58 ELISA Kit轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β誘導(dǎo)蛋白3抗體(半酸富含核蛋白1)包裝1g
酸腦啡肽(Leu-ENK)elisa試劑盒英文名稱(chēng):Leu-ENK ELISA Kit有絲分裂激酶A/B/C抗體包裝5g
粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子(GM-CSF)elisa試劑盒英文名稱(chēng):GM-CSF ELISA Kit蛋白激酶ATK抗體包裝1g
粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)elisa試劑盒英文名稱(chēng):G-CSF ELISA Kit長(zhǎng)鏈脂肪酸連接酶1/2抗體包裝1g
ASCL2蛋白抗體免疫球蛋白G(IgG)Torezolid (TR-701; tedizolid) is a novel oxazolidinone for gram-positive infecti
Hoechst 33342細(xì)胞藍(lán)色熒光染料脂肪酶(假絲酵母)
其他脂酶;脂肪水解酶;脂肪分解酵素;三?;视王;饷?;微生物脂肪酶
英文名稱(chēng):Lipase(Candida)
其他英文名稱(chēng):Lipase from Candida;Microbial lipase
產(chǎn)品規(guī)格:BR,5000u/g
包裝:1克
CAS號(hào):9001-62-1
級(jí)別:BR
分子量:一般在67000
活力:≥5000u/g
干燥失重:≤8.0%
溫度穩(wěn)定性:40度以下穩(wěn)定,超過(guò)50度將嚴(yán)重失活。短時(shí)間以40~42度為宜,長(zhǎng)時(shí)間以38~40度為宜
PH穩(wěn)定性:以PH7.0~7.5為宜
分子量:~250KDa
活力:2000~5000u/mg
活力定義:1u指在pH 7.0,25℃條件下每分鐘分解1.0 μmole的H2O2,同時(shí)H2O2的濃度會(huì)從10.3 降低到 9.2 mM
PH:5.0~8.0
級(jí)別:High purity grade
分子量:250kDa
活力:≥20000u/mg
活力定義:One unit will decompose 1.0 μmole of H2O2 per min at pH 7.0 at 25℃, while the H2O2 conc. falls from 10.3 to 9.2 mM, measured by the rate of decrease of A240
性狀:深褐色粉末,溶于水和稀緩沖液。用溫水可溶,溫度控制在40~45℃,55℃以上失活,不溶于有機(jī)溶劑。干燥時(shí)在室溫中穩(wěn)定。Ca2+對(duì)其有保護(hù)和激活作用。一種氧化還原酶。該酶可將過(guò)氧化氫氧化為氧,與此同時(shí)將另一分子過(guò)氧化氫還原為水
用途:生化研究。常用診斷用酶。配合偶聯(lián)反應(yīng),測(cè)定葡萄糖等。食物防腐、分解過(guò)氧化氫。
保存:-20℃