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試對蝦桿狀病毒染料法熒光定量PCR劑盒

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更新時間:2022-04-14 10:44:26瀏覽次數(shù):179

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50次
貨號 FS-P013415 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 公司產(chǎn)品僅供科研    
試對蝦桿狀病毒染料法熒光定量PCR劑盒正在出售的產(chǎn)品:PKR (Phospho-Thr446) Antibody
GAP43 (Phospho-Ser41) Antibody
Integrin β3 (Phospho-Tyr785) Antibody

詳細介紹

實驗外包:

1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學(xué)分析

2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達譜芯片、RNA-seq

3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM

4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR

5.蛋白質(zhì)檢測:Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA

6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細胞分選

7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR

8.細胞及動物模型:原代細胞、細胞模型、動物模型構(gòu)建

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號

試對蝦桿狀病毒染料法熒光定量PCR劑盒

50次

FS-P013415

 

QQ截圖20201022162313.png 

組成及試劑配制:

1、酶標板:一塊(96孔)

2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。

3、 樣品稀釋液:1×20ml。

4、 檢測稀釋液A:1×10ml。

使用方法:

一、稀釋PCR陽性對照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例)

1. 注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對照。

2. 標記6個離心管,分別為7,6,5,4,3,2。

3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。

4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。

5. 換槍頭,在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。

6. 換槍頭,在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。

7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。

二、樣品DNA的制備

8. 如果有N個樣品,必須設(shè)置N+2個提取,

多出的一個是PC(樣品制備陽性對照),

一個是NC(樣品制備陰性對照)。

可以用10μL上步制備的PCR陽性對照的第4號(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當于1萬拷貝)或第5號(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。

9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒。

三、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,在樣品制備室進行)

10. 如果只做1次重復(fù),則標記N+9個PCR管,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,1個用于PCR陰性對照,6個用于PCR陽性對照。如果做2-3次重復(fù),則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。

11. 產(chǎn)品僅用于科研在標記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加)

 

 

 

 

 

 

 

 

PCR實驗步驟:

①取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。

②兩相分離 每1ml的試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。

③RNA沉淀將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。

④RNA清洗 移去上清液,每1ml試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝螅?℃下7000rpm離心5分鐘。

⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。

⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。

特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!

DPP IV ELISA Kit 大鼠二肽基肽ⅣMulti-class antibodies: 48T

 sVEGFR2 可溶性血管內(nèi)皮生長因子受體2抗體Multi-class antibodies: 0.1ml

Rhesus antibody Rh Galectin 7 半乳糖凝集7抗體  0.2ml

CCL1(Human Eotaxin 1) ELISA Kit 人嗜粒細胞趨化蛋白 96T

NEK7 絲/蘇蛋白激Nek7抗體 0.1ml

phospho-TEM8 (Tyr382) 磷化血管內(nèi)皮標志物8抗體 0.1ml

 sVEGFR2 可溶性血管內(nèi)皮生長因子受體2抗體Multi-class antibodies: 0.1ml

AGAA(Human  golgi apparatus antibody) ELISA Kit 人抗高爾基體抗體Multi-class antibodies: 48T

 IRAK 白介-1受體相關(guān)激1/2抗體Multi-class antibodies: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Ligamentum Nuchae Elastin 項韌帶彈性蛋白抗體  0.2ml

UU-Ab(Human Ureaplasma urealyticum antibody) ELISA Kit 人解脲脲原體抗體 96T

Quiescin Q6 巰基氧化1抗體 0.2ml

CNGB1 環(huán)核苷門控陽離子通道蛋白CNG-1β抗體 0.2ml

 IRAK 白介-1受體相關(guān)激1/2抗體Multi-class antibodies: 0.2ml

Rabbit  mouse Kappa light chain/Cy5 Cy5標記的兔抗小鼠k鏈 0.1ml

GHRHR 生長釋放因子受體抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh ANTXR1/TEM8 血管內(nèi)皮標志物8抗體  0.1ml

 IL-20RB/IL-20R2/FITC 熒光標記白介20受體β鏈抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Rabbit  human IgM/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標記的兔抗人IgM  0.1ml

 Rb/P105 RB/FITC 熒光標記兔抗人、大、小鼠成視網(wǎng)膜細胞瘤抑癌蛋白抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
試對蝦桿狀病毒染料法熒光定量PCR劑盒惡臭假單胞菌種屬: Pseudomonas│putida分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 639生長條件: 30℃存儲條件: 真空冷凍干燥法

自養(yǎng)假諾卡氏菌種屬: Pseudonocardia│autotrophica提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 模式菌株培養(yǎng)基: 0240生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

宋內(nèi)氏志賀氏菌種屬: Shigella│sonnei提供形式: 凍干物安全等級: 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 噬菌體用 D培養(yǎng)基: CM0051生長條件: 37℃存儲條件: 真空冷凍干燥法

蘇云金芽孢桿菌種屬: Bacillus thuringiensis Berliner提供形式: 凍干管安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 殺鱗翅目昆蟲培養(yǎng)基: 營養(yǎng)肉汁瓊脂:蛋白胨 5.0g,牛肉浸取物 3.0g,NaCl 5.0g,瓊脂 15.0g,蒸餾 1.0L,pH7.0。[注] 培養(yǎng)芽孢桿菌時加入5mg MnSO4·H2O,則有利于產(chǎn)生芽孢。生長條件: 30℃,好氧。存儲條件: 2-8℃

胃泌抗體(GCA)ELISA試劑盒四丁基氫氧化銨 ~40% 溶液,離子色譜級2--1,3-二甲基化咪唑鎓 90%氟替卡松(標準品)

胃泌釋放肽前體(ProGRP)ELISA試劑盒2,4,5-三酚 分析標準品代二碳鎓六氟鹽 98%哌拉西林鈉

胃泌釋放多肽(GRP)ELISA試劑盒甲基叔戊基 97%代三吡咯基鏻六氟鹽 98%哌拉西林鈉(標準品)

胃泌(Gastrin)ELISA試劑盒DL-α-酚琥珀酯 分析標準品多肽試劑TCTU 98%環(huán)吡司; 環(huán)吡酮

胃泌(GAS)ELISA試劑盒基氧鎓四氟鹽 96%2--1,3-二甲基咪唑六氟鹽 98%環(huán)吡司; 環(huán)吡酮(標準品)

胃動(MTL)ELISA試劑盒(基硅基)重氮 2.0M 己溶液3-(二乙氧基酰氧基)-1,2,3-并三-4-酮 98% 頭孢西丁鈉

胃動蛋白2(GKN2)ELISA試劑盒三(2-氨基乙基) 97%代二乙酯 純度 ≥90%頭孢西丁鈉(標準品)

胃蛋白原C(PG-C)ELISA試劑盒2-硫脲嘧啶 分析標準品2-(2-吡啶酮-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲四氟鹽  99%頭孢西?。^孢西?。?/span>

胃蛋白原A(PG-A)ELISA試劑盒四己基硫氫銨 用于離子色譜, ≥99.0% (T)N,N'-二環(huán)己基碳二亞 99.0%頭孢西丁(頭孢西?。藴势罚?/span>

胃蛋白(PP)ELISA試劑盒N,N,N',N'-四甲基-1,3-二 99%N,N'-琥珀酰亞基碳酯 98%纈沙坦

胃蛋白(PG)ELISA試劑盒N,N,N',N'-四甲基-1,3-二 97%4-二甲氨基吡啶 99%纈沙坦(標準品)

胃蛋白(GT)ELISA試劑盒2,4,5-三 分析標準品,99%4,4'-二甲氧基三基 98%格列吡

未甲基化寡聚脫氧核苷(CpG-ODN)ELISA試劑盒1,2,3,4-四 分析標準品,98%4,5-二基咪唑 98%格列吡 (標準品)

尾肢同源蛋白2(PYGO2/PP7910)ELISA試劑盒5-硫代-D-葡萄糖 96%4,5-二基咪唑 99%鹽多奈哌齊I型

尾加壓2(UST2)ELISA試劑盒三溶液 50%溶液二吡咯基(N-琥珀酰亞氨氧基)碳六氟鹽  98%雌酚酮/雌酮

維生K依賴蛋白Z(PROZ)ELISA試劑盒二十三 分析標準品,99.5%4-(4,6-二甲氧基三)-4-甲基嗎啉鹽鹽 97%雌酚酮/雌酮(標準品)


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