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詳細(xì)介紹
參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：鉤端螺旋體通用染料法熒光定量PCR試劑盒
產(chǎn)品貨號：FS-P013430
產(chǎn)品規(guī)格： 50次
產(chǎn)品分類：純化試劑盒
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
實(shí)驗(yàn)過程：
一、試劑準(zhǔn)備 1. DNA模板 2．對應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物） 3．10×PCR Buffer 4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5．Taq酶 | 二、操作步驟 1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1（10pM） 2μl 引物2（10PM） 2μl Taq酶（2U/μl） 1μl DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。 2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。 3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4．PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。 |
注意事項(xiàng)
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個(gè)檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作，各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器、耗材應(yīng)獨(dú)立使用，不能混用；實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作；三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在第一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨(dú)存放。
6.為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7.儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置；不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9.實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
Human Acylation Stimulating Protein,ASP ELISA Kit 人酰化刺激蛋白Multi-class antibodies： 48T
Substance P P物質(zhì)抗體Multi-class antibodies： 0.1ml
Rhesus antibody Rh Goat Mouse IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標(biāo)記的羊抗小鼠IgG 0.1ml
MC Ab ELISA Kit 大鼠黑色細(xì)胞抗體 96T
Phospho-NFKB1(Ser932) 磷化細(xì)胞核因子p50/k基因結(jié)合核因子抗體 0.1ml
Bax beta BCL2相關(guān)X蛋白抗體 0.2ml
Substance P P物質(zhì)抗體Multi-class antibodies： 0.1ml
CA-2(Human carbonic anhydrase 2) ELISA Kit 人碳酐2Multi-class antibodies： 48T
CD304/Neuropilin-1 神經(jīng)纖毛蛋白-1抗體Multi-class antibodies： 0.1ml
Rhesus antibody Rh IFN-β 干擾β抗體 0.1ml
IL-23(Mouse Interleukin 23)ELISA Kit 小鼠白介23 96T
PTRH2 Bcl-2轉(zhuǎn)錄抑制因子1抗體 0.2ml
C1orf220 1號染色體開放閱讀框220抗體 0.2ml
CD304/Neuropilin-1 神經(jīng)纖毛蛋白-1抗體Multi-class antibodies： 0.1ml
Rabbit rat IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標(biāo)記的兔抗大鼠IgG 0.1ml
GIMAP7 GTPIMAP家族成員7抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh APE/Girdin 肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白Girdin抗體 0.1ml
IL-17(Interleukin-17)human/FITC 熒光標(biāo)記白介-17抗體(人)IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit human IgM/PE-Cy3 PE-Cy3標(biāo)記的兔抗人IgM 0.1ml
Phospho-Rad17 (Ser645) /FITC 熒光標(biāo)記磷化細(xì)胞周期檢控Rad17蛋白抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
鉤端螺旋體通用染料法熒光定量PCR試劑盒那波鏈霉菌交沙霉亞種種屬: Streptomyces│narbonensis subsp.josamyceticu提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 產(chǎn)生Josamycin交沙霉培養(yǎng)基: CM0027生長條件: 28C存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥
斜鏈擬青霉種屬: Paecilomyces│cateniobliquus提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 模式菌株；昆蟲病源培養(yǎng)基: 0015生長條件: 24-26℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
蘇云金芽胞桿菌種屬: Bacillus│thuringiensis分離基物: 1-5cm土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 科研研究培養(yǎng)基: 0002生長條件: 30℃存儲(chǔ)條件: -80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法；礦物油法
亞利桑那沙門氏菌種屬: Salmonella│arizona提供形式: 凍干物安全等級: 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 63 z4,z23 -培養(yǎng)基: CM0051生長條件: 37℃存儲(chǔ)條件: -80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法
嗜粒趨化蛋白Eotaxin 1(Eotaxin 1/CCL11)ELISA試劑盒硝鉑溶液 Pt, 15%酯 99%鹽利因(標(biāo)準(zhǔn)品)
嗜環(huán)蛋白/親環(huán)B(CyPB)ELISA試劑盒二溴化鈀 Pd 40 % 菲 97%嗎啉惡酮（雷奈佐利， 利奈唑，利奈唑，利奈唑 ）
嗜環(huán)蛋白/親環(huán)A(CyPA)ELISA試劑盒鈀 Pd 26.2%戊二酐 98%嗎啉惡酮（標(biāo)準(zhǔn)品）
嗜鉻蛋白A(CgA)ELISA試劑盒化鈀 Pd 59-60%戊二酐 95%賴諾普利
嗜肺軍團(tuán)菌抗原(LP Ag)ELISA試劑盒鉑 98%除草劑、劑 分析標(biāo)準(zhǔn)品，99.1%賴諾普利(標(biāo)準(zhǔn)品)
視網(wǎng)膜母瘤抑制蛋白(pRB)ELISA試劑盒氫氧化鈀 AR,99.99%錫 三合物 95%鹽洛貝林
視黃誘導(dǎo)基因/RIG-1樣受體(RLR)ELISA試劑盒硫鈀 Pd 51.2%-53.9%錫 三合物 99.9% metals basis尼達(dá)明
視黃結(jié)合蛋白4(RBP-4)ELISA試劑盒硫鈀，二 Pd ≥44% 葉縮 98%洛匹那韋
視黃結(jié)合蛋白4(RBP4)ELISA試劑盒化金 Au≥52%葉縮 98%, Kosher洛匹那韋（標(biāo)準(zhǔn)品）
視黃結(jié)合蛋白(RBP)ELISA試劑盒氧化鉑化物 AR,99.95% 甲位戊基桂 97%雷他定
食欲受體(OXR)ELISA試劑盒二化鉑 Pt basis ≥73%甲位戊基桂 97%，Kosher雷他定(標(biāo)準(zhǔn)品)
食欲/阿立新B(OX-B)ELISA試劑盒四化鉑 鉑含量，58%環(huán)己基烯酯 98%褪黑,松果體
生長抑(SS)ELISA試劑盒海綿鉑 99.95%環(huán)己基烯酯 ≥98%, FCC, FG褪黑,松果體（標(biāo)準(zhǔn)品）
生長相關(guān)蛋白43(GAP-43)ELISA試劑盒海綿鉑 99.99%楊梅 98%美
生長調(diào)節(jié)致癌基因γ/黑瘤生激因子(GROγ/CXCL3/MGSA)ELISA試劑盒海綿鉑 99.999%甲丁酯 95%美(標(biāo)準(zhǔn)品)
生長調(diào)節(jié)致癌基因β/黑瘤生激因子(GROβ/CXCL2/MGSA)ELISA試劑盒化鈀 Pd ≥27.5%龍腦 55%鹽米諾環(huán),美滿霉;二四環(huán)鹽鹽
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL；
3.樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加。
4.除空白孔外，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機(jī)洗板）。
6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長處測定各孔的OD值。
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