培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
產(chǎn)品屬于:
商品介紹:
用途:
肌纖維染色,可區(qū)分肌纖維和膠原纖維
注意事項(xiàng):
肌纖維和肌上皮細(xì)胞呈玫瑰紅色,膠原纖維呈黃色。
儲(chǔ)存條件:4℃,避光,12個(gè)月
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
鵝不食草(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 6-O-Benzylguanine(O6BG)JWA蛋白抗體包裝100g
厄弗酚英文名稱: Hypocrellin連接蛋白JPH3抗體包裝25g
餓螞蝗(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Fluorometholone連接粘附分子C抗體包裝5g
蒽醌(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Fluorometholone蛋白質(zhì)酪激JAK-1抗體包裝100g
兒茶(兒茶)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Acemetacin組蛋白去基化JMJ2A抗體包裝25g
兒茶沒食子酯英文名稱: Acemetacin組蛋白去基化JMJD5抗體包裝5g
二基庚烷A(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Chlorpromazine HCl磷化γ連環(huán)蛋白抗體包裝1g
二羥茶堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Chlorpromazine HClJNK相互作用蛋白4抗體包裝5g
二氫丹參I(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Dirithromycin基末端激1/2抗體包裝1g
二氫辣椒堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Dirithromycin基末端激1/2/3抗體包裝1g
二氫獼猴桃內(nèi)酯,奇異果內(nèi)酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: (2S)-2-amino-5-[(N,N'-dimethylcarbamimidoyl)amino]pentanoic acid基末端激1/3抗體包裝25g
二氫歐山芹當(dāng)歸酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ceftizoxime sodium連接蛋白JPH4抗體包裝5g
二氫小檗堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ceftizoxime sodium組蛋白去基轉(zhuǎn)移JMJD7抗體包裝1g
二氫楊梅(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Pyrogallol磷化原癌基因c-Jun抗體包裝1g
二氫醉椒英文名稱: Trametinib (GSK1120212)磷化活化蛋白激D抗體包裝10MG
: Bt0266資源名稱: 蘇云金芽胞桿菌 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品抗組?;鵷RNA合成,質(zhì)試劑盒胡椒堿;Piperine
: =NBRC13957=ATCC14485資源名稱: 嗜熱鏈球菌 質(zhì)量規(guī)格:≥99%,BR抗內(nèi)膜抗體試劑盒高熊果酚苷;
: ATCC43964資源名稱: Hyphomonasjohnsonii 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品抗滋養(yǎng)膜抗體試劑盒甘草次十八酯;Stearyl glyc
肌纖維染色液(Puchtler鞣酸偶氮熒光桃紅法)蘇丹Ⅲ
其他三號(hào);黃光油溶紅;油紅;基偶氮(4-偶氮-1)-2-萘酚;蘇旦Ⅲ;Ⅲ;1-[4-(基偶氮)基偶氮]-2-萘酚;溶劑紅23;偶氮偶氮-2-萘酚;透明紅HRR
英文名稱:Sudan Ⅲ
其他英文名稱:Fat ponceau G;Sudan red;Cerasin red;Oil red;Solvent red 23;Tony red;Tetraazobenzene-β-naphthol, 1-(p-Phenylazophenylazo)-2-naphthol;Sudan red BK
產(chǎn)品規(guī)格:BS
包裝:25克
CAS號(hào):85-86-9
C22H16N4O=352.39
級(jí)別:BS
生物染色試驗(yàn):合格
吸收光譜試驗(yàn):合格
性狀:紅棕色粉末。易溶于,溶于、冰乙、乙、、不揮發(fā)油、熱甘油和揮發(fā)油,不溶于水。熔點(diǎn) 195℃。大吸收波長(zhǎng) 507(354)nm。小致死量(兔,皮下)1000mg/kg。有刺激性
用途:生化研究。生物染色劑,如脂肪及其類似物質(zhì)染色,蘇丹Ⅲ可以用油紅O代替
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