中文名稱:細(xì)胞凋亡DNA Ladder檢測(cè)試劑盒
英文名稱:Cell Apotosis DNA Ladder Detection Kit
產(chǎn)品規(guī)格:20T|50T|100T
發(fā)貨周期:1~3天
本試劑盒可應(yīng)用于培養(yǎng)細(xì)胞凋亡檢測(cè)(不推薦用于檢測(cè)組織樣本)。細(xì)胞核染色質(zhì)DNA 斷裂是細(xì)胞凋亡的標(biāo)志特征。在細(xì)胞發(fā)生凋亡時(shí),核酸內(nèi)切酶被激活,選擇性降解染色質(zhì)DNA,形成50-300 kb 的大片段,并進(jìn)而在核小體連接處斷裂,形成180-200 bp 或其整倍數(shù)的DNA片段,這些DNA 片段可從細(xì)胞中提取出來(lái),通過(guò)瓊脂糖凝膠電泳,溴化乙啶染色呈現(xiàn)為梯狀條帶(DNALadder),并據(jù)此判斷細(xì)胞凋亡產(chǎn)生。我司細(xì)胞凋亡DNA Ladder 檢測(cè)試劑盒提供了一種簡(jiǎn)便、快速地提取染色質(zhì)DNA 的方法,并增加對(duì)小片段DNA 的回收,從而增強(qiáng)了檢測(cè)的敏感性。 |
注意事項(xiàng)
1. DNA Ladder 出現(xiàn)在細(xì)胞凋亡晚期,觀察細(xì)胞形態(tài)已發(fā)生皺縮出芽,染色質(zhì)*凝聚,細(xì)胞核已固縮斷裂的凋亡晚期形態(tài),建議該種形態(tài)的凋亡細(xì)胞比例在30%以上時(shí)進(jìn)行DNA Ladder 檢測(cè)或良好行Tunel檢測(cè).
2. DNA Ladder 出現(xiàn)在一個(gè)較短的時(shí)間段,在凋亡早期取樣,則無(wú)DNA 降解的條帶,而在凋亡末期取樣則產(chǎn)生與細(xì)胞壞死相似的DNA 彌散條芾。因此取樣時(shí)間需根椐不同種類的細(xì)胞和誘導(dǎo)劑而摸索確定。
3. 貼壁細(xì)胞最好不用胰酶消化而用細(xì)胞刮收集。
4. 某些細(xì)胞不產(chǎn)生這種核小體間的DNA 斷裂,而是產(chǎn)生50-300kb 的大片段斷裂。
注意事項(xiàng):
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開(kāi)蓋時(shí)試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長(zhǎng)時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會(huì)增加空白吸收,從而影響檢測(cè)結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來(lái)配制待檢測(cè)藥物。如果待測(cè)藥物有還原性,則測(cè)定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測(cè)藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對(duì)較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測(cè)。
9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長(zhǎng)短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定,對(duì)于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長(zhǎng)時(shí)間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測(cè),MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
操作規(guī)程:
1、在96孔板加入細(xì)胞00μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升5000~0000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及00%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×00
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時(shí)的藥物濃度(IC90)
白介素13(IL-13)elisa試劑盒英文名稱:IL-13 ELISA Kit脂肪炎癥因子Apelin抗體包裝25g
白介素12(IL-12)elisa試劑盒英文名稱:IL-12 ELISA Kit氫ATP酶通道蛋白抗體包裝5g
白介素11(IL-11)elisa試劑盒英文名稱:IL-11 ELISA KitATP5A抗體包裝25g
白介素10(IL-10)elisa試劑盒英文名稱:IL-10 ELISA Kit即刻早期基因ARC抗體包裝5g
白介素10(IL-10)elisa試劑盒英文名稱:IL-10 ELISA KitADP核糖基化因子6抗體包裝5g
白介素1(IL-1)elisa試劑盒英文名稱:IL-1 ELISA Kit芳香化酶抗體包裝1g
白介素1(IL-1)elisa試劑盒英文名稱:IL-1 ELISA KitArtemin抗體包裝25g
白蛋白(albumin)elisa試劑盒英文名稱:albumin ELISA Kitalpha 1腎上腺素能受體A抗體包裝5g
白蛋白(ALB)elisa試劑盒英文名稱:ALB ELISA Kit血管緊張素Ⅱ-1型受體抗體包裝1g
胺氧化酶(含黃素)A(MAOA)elisa試劑盒英文名稱:MAOA ELISA Kit活化轉(zhuǎn)錄因子3抗體包裝5g
癌胚抗原(CEA/CD66)elisa試劑盒英文名稱:CEA/CD66 ELISA Kit血管緊縮素樣蛋白1抗體包裝250mg
癌胚抗原(CEA)elisa試劑盒英文名稱:CEA ELISA Kit自噬相關(guān)蛋白7抗體包裝1g
阿立新A(Orexin A)elisa試劑盒英文名稱:Orexin A ELISA Kit炭疽素受體2抗體包裝1g
γ突觸核蛋白(SNCG)elisa試劑盒英文名稱:SNCG ELISA Kit自噬相關(guān)蛋白4C抗體包裝5g
γ干擾素誘導(dǎo)蛋白16/p16(IFI16/p16)elisa試劑盒英文名稱:IFI16/p16 ELISA Kit自噬蛋白5/凋亡的特異性蛋白抗體包裝5g
磷化蛋白激酶AKT1抗體基質(zhì)金屬蛋白酶10(MMP10)CCG-1423是一種新型的RhoA/C介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)錄抑制劑,能抑制的轉(zhuǎn)移前列腺癌PC-3侵襲模型。
細(xì)胞凋亡DNA Ladder檢測(cè)試劑盒柚皮苷
其他 柚甙;橙皮甙;柚皮素-7-鼠李葡萄糖苷;柚苷;柑桔苷;柚皮甙;7-[[2-O-(6-脫氧-A-L-甘露吡喃基)-B-D-葡萄吡喃基]氧代]-2,3-二氫-5-羥基-2-(4-羥基)-4H-1-并吡喃-4-酮;川陳皮素
英文名稱: Naringin
其他英文名稱: Naringenin-7-rhamno glucoside;4′,5,7-Trihydroxyflavanone 7-rhamnoglucoside
產(chǎn)品規(guī)格: BR,98%
包 裝: 10克/50克
產(chǎn)品規(guī)格: 分析標(biāo)準(zhǔn)品,98%
包 裝: 20毫克
CAS號(hào):10236-47-2
C27H32O14=580.54
級(jí)別:BR
含量:≥95.0%(HPLC)
比旋光度:+89~+92°(c=1, ethanol)
水分:4.0~9.0%
級(jí)別:Analytical standard
含量:≥98.0%(HPLC)
性狀:或淺黃色結(jié)晶粉末。有苦味。對(duì)濕敏感。40℃時(shí)1g溶于1000ml水,在75℃時(shí)溶于10ml水,溶于酮、乙和熱乙。熔點(diǎn)171℃(二水合物)。比旋光度[α]19D-82°(乙溶液中)。
用途:生化研究??辔秳?。本品經(jīng)水解加氫所得柚苷二氫查耳酮為甜味劑,甜度約為蔗糖的150倍。
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