詳細介紹
組成及試劑配制:
1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
50次 | FS-P013490 |
使用方法:
一、稀釋PCR陽性對照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例) 1. 注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對照。 2. 標記6個離心管,分別為7,6,5,4,3,2。 3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。 4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。 5. 換槍頭,在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。 6. 換槍頭,在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。 7. 重復上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。 | 二、樣品DNA的制備 8. 如果有N個樣品,必須設置N+2個提取, 多出的一個是PC(樣品制備陽性對照), 一個是NC(樣品制備陰性對照)。 可以用10μL上步制備的PCR陽性對照的第4號(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當于1萬拷貝)或第5號(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。 9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒。 | 三、設置qPCR反應(20 μL體系,在樣品制備室進行) 10. 如果只做1次重復,則標記N+9個PCR管,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,1個用于PCR陰性對照,6個用于PCR陽性對照。如果做2-3次重復,則反應設置數(shù)量相應增加2或3倍。 11. 產(chǎn)品僅用于科研在標記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復。樣品管和陰性對照設置完畢后才設置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加)
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實驗外包:
1.基因組學:基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學分析
2.轉(zhuǎn)錄組學:microRNA芯片、LncRNA芯片、表達譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學:2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測:Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細胞分選
7.代謝組學:GC-MS、LC-MS、NMR
8.細胞及動物模型:原代細胞、細胞模型、動物模型構(gòu)建
Human Alpha Lactalbumin, Alpha-La ELISA Kit 人α乳清蛋白Multi-class antibodies: 48T
SREBP-2 調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白2抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Goat human IgM/PE PE標記的羊抗人IgM 0.1ml
HSP gp96 ELISA Kit 大鼠熱休克蛋白糖蛋白96 96T
phospho-NFATc2(Ser326) 磷化核因子活化T細胞胞漿蛋白2抗體 0.1ml
B7-DC 程序性死亡配體2抗體 0.1ml
SREBP-2 調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白2抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
FSP(Human Fibroblast surface protein) ELISA Kit 人纖維母細胞表面抗原Multi-class antibodies: 48T
PKA 蛋白激A抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh HIPK2 Fas相互作用蛋白激2抗體 0.2ml
PABA(Mouse para-aminobenzoic acid) ELISA Kit 小鼠對基 96T
PSCD1 胞粘蛋白1抗體抗體 0.1ml
phospho-CREM (Ser271 +Ser 274) 磷化環(huán)磷腺苷反應元件調(diào)節(jié)蛋白抗體 0.1ml
PKA 蛋白激A抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rabbit MG IgG/Cy5 Cy5標記的兔抗長爪沙鼠IgG 0.1ml
GGNBP2 鋅指蛋白403/喉癌相關(guān)蛋白1抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh AQP1/CHIP 通道蛋白1抗體 0.2ml
IL-3R Alpha/CD123/FITC 熒光標記白介3受體a鏈抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Mink IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標記的兔抗貂IgG 0.1ml
PR/FITC 熒光標記孕受體抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
牛腺病毒(4-8型)通用PCR試劑盒50次牛型分枝桿菌種屬: Mycobacterium│bovis提供形式: 凍干物安全等級: 3模式菌株: no培養(yǎng)基: CM0125生長條件: 37℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
嗜熱嗜脂肪地芽孢桿菌種屬: Geobacillus│stearothermophilus提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0002生長條件: 30℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
草分枝桿菌種屬: Mycobacterium│phlci提供形式: 凍干物安全等級: 3模式菌株: yes應用領(lǐng)域: 研究生長條件: 37℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
鏈霉菌種屬: Streptomyces│sp.分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0012生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
間皮(MSLN)ELISA試劑盒氫氧化鋇,八 ACS, 98% 對乙基 97%鹽甲氧那明
間變性瘤激(ALK)ELISA試劑盒鎂 AR,99.5%2-乙氧基 98%(S)-1-基-1,2,3,4-四氫異喹啉
間α-胰蛋白抑制因子重鏈H1(ITIH1)ELISA試劑盒2,2-偶氮二異丁 98%3-乙氧基 98%鹽羅沙替丁醋酯
間-alpha-胰蛋白抑制劑重鏈H4(ITIH4/IHRP/ITIHL1/PK120/PRO1851)ELISA試劑盒對溴甲 99%5-氟-2-甲氧基 97%培
甲狀腺抗體(TAb)ELISA試劑盒對溴乙 98%5-甲基呋喃-2- 97%培美塞(標準品)
甲狀腺(T4)ELISA試劑盒碳鋇 ACS5-基-2-噻吩 97%尼泊金甲酯;對羥基甲甲酯
甲狀腺球蛋白(TG)ELISA試劑盒二氧化錳 AR,85%5-氟-2- 98%尼泊金酯;對羥基甲酯
甲狀腺抗體(TAb)ELISA試劑盒二氧化錳 GR,91%4-氟-2- 97%周效磺(磺多辛)
甲狀腺結(jié)合球蛋白(TBG)ELISA試劑盒8-氨基喹啉 98%4-氟-3- 99%周效磺(標準品)
甲狀腺受體β(THRb)ELISA試劑盒6-氨基喹啉 98%2-甲?;?98%乙偶姻
甲狀腺過氧化物(TPO)ELISA試劑盒6-甲基喹啉 98%3-甲?;? 97%青霉G鈉鹽
甲狀腺非肽抗體(THAA)ELISA試劑盒8-甲基喹啉 99%2-氟 98%青霉G鈉(標準品)
甲狀腺激球蛋白(TSI)ELISA試劑盒7-甲基喹啉 97%3-氟基 97%米格列奈鈣
甲狀旁腺樣蛋白(PLP)ELISA試劑盒7-甲基喹啉 75%2-氟聯(lián)基-4- 97%米格列奈鈣(標準品)
甲狀旁腺相關(guān)蛋白(PTHrP)ELISA試劑盒5-硝基喹啉 98%3-氟-4-基 98%基硫氧嘧啶 /6-正基-2-硫代尿嘧啶
甲狀旁腺1受體(PTH1R)ELISA試劑盒2-氨基甲酰 98%3-氟-5-三氟 97%氟米龍醋酯
PCR實驗步驟:
①取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1ml試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混勻后,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。