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人結(jié)直腸腺癌細胞;HT-29品牌購買細胞的客戶應(yīng)有培養(yǎng)細胞的經(jīng)驗,如果沒有,我公司可提供相應(yīng)的??蛻羰盏郊毎螅坷锏呐囵B(yǎng)液可以收集起來繼續(xù)使用,在*次消化傳瓶時,客戶請保留一瓶細胞繼續(xù)使用原培養(yǎng)液,其它瓶的細胞可使用自己的培養(yǎng)液,如此一來可減少由于細胞不適應(yīng)培養(yǎng)液導(dǎo)致的各種麻煩。
細胞名稱 人結(jié)直腸腺癌細胞;HT-29品牌
形態(tài)特性 上皮樣;多角
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞是1964年由Fogh J用移植培養(yǎng)方法和含15%FBS的F12培養(yǎng)液從原發(fā)性腫瘤分離的。近來,已建株的培養(yǎng)細胞用含血清的McCoy's 5a培養(yǎng)基培養(yǎng)。 該細胞系在裸鼠中成瘤,也能在類固醇處理的地鼠中成瘤。該細胞可合成IgA、CEA、TGFβ結(jié)合蛋白和黏液素;表達尿激酶受體,但沒有檢測到血漿酶原活性;不表達CD4,但細胞表面表達半乳糖神經(jīng)酰胺(HIV的可能替代受體)。該細胞系癌基因c-myc、K-ras、H-ras、N-ras、Myb、sis、fos陽性;p53基因過表達,并且在273位密碼子處發(fā)
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 15%NBS
傳代方法 1:
3傳代;3-4天一次
傳代情況 不詳
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法(-)
STR Amelogenin:X;D8S1179:10, 16;D21S11:29,30;D7S820:10;CSF1PO:11, 12;D3S1358:15, 17;TH01:6, 9;D13S317:11, 12;D16S539:11, 12;D2S1338:19, 23;D19S433:14;vWA:17, 19;THOX:8, 9;D18S51:13;D5S818:11, 12;FGA:20, 22。
同工酶
染色體 68-72
使用權(quán)限 A類
注意事項:
?首先肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色,然后再借助顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張),這樣做可方便后期的對比。
?一定要用75%的酒精消毒(75%的酒精的水要經(jīng)過殺菌處理)。
?嚴格按照在無菌環(huán)境下操作的原則,打開細胞培養(yǎng)瓶。
?將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(要換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞)。
?用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
?1000rpm,5min離心,重懸細胞。
?換新的細胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2培養(yǎng)。
磷酸吡哆醛CAS 訂購|咨詢規(guī)格:100mg
L-丙氨酸CAS 訂購|咨詢規(guī)格:100mg
煙酸CAS 59-67-6訂購|咨詢規(guī)格:100mg
奈福泮CAS 23327-57-3訂購|咨詢規(guī)格:100mg
藤黃微球菌CAS 訂購|咨詢規(guī)格:凍干粉
羅哌卡因CAS 訂購|咨詢規(guī)格:100mg
(R,S)-告依春CAS 訂購|咨詢規(guī)格:20mg
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菝葜皂苷元CAS 訂購|咨詢規(guī)格:20mg
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鵝去氧膽酸CAS 474-25-9訂購|咨詢規(guī)格:30mg
溴脫氧尿嘧啶核苷(BrdU)溶液(10毫摩爾)規(guī)格:1毫升進口/國產(chǎn)
羅丹明123(RHODANMINE123)溶液(50微摩爾)規(guī)格:0.5毫升進口/國產(chǎn)
6%次氯酸鈉溶液規(guī)格:100毫升進口/國產(chǎn)
基質(zhì)金屬蛋白酶3抑制劑(NNGH)規(guī)格:500微升進口/國產(chǎn)
0.2 毫摩爾Cyclosporine A規(guī)格:500微升進口/國產(chǎn)
TAK1-TAB1規(guī)格:5微克進口/國產(chǎn)
磷酸二酯酶1(Phosphodiesterase 1)規(guī)格:0.25單位進口/國產(chǎn)
溴脫氧尿嘧啶核苷(BrdU)溶液(100毫摩爾)規(guī)格:1毫升進口/國產(chǎn)
尼羅紅(NILE RED)溶液(0.5毫克/毫升)規(guī)格:1毫升進口/國產(chǎn)
膠原酶潛酶活化劑(APMA)規(guī)格:500微升進口/國產(chǎn)
0.2摩爾基質(zhì)金屬蛋白酶2/9抑制劑卡托普利(captopril)規(guī)格:1毫升進口/國產(chǎn)
基質(zhì)金屬蛋白酶1抑制劑 規(guī)格:500微升進口/國產(chǎn)
磷酸二酯酶(Phosphodiesterase;PDE)規(guī)格:0.25單位進口/國產(chǎn)