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產(chǎn)品屬于:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
500T | 1~3天 |
商品介紹:
熒光染料PKH67 是一種可對(duì)活細(xì)胞進(jìn)行熒光標(biāo)記的新型染料,可以標(biāo)記活體細(xì)胞,通過與膜結(jié)構(gòu)的脂質(zhì)分子結(jié)合而標(biāo)記細(xì)胞。 PKH67對(duì)細(xì)胞毒性較小,熒光背景低,脂溶性高,能夠輕易穿透細(xì)胞膜,有著強(qiáng)而穩(wěn)定的綠色熒光。經(jīng)PKH67標(biāo)記的細(xì)胞可用于體外和體內(nèi)增殖研究,且具有不會(huì)使鄰近細(xì)胞染色的功能。 在細(xì)胞分裂增殖過程中,PKH67 的熒光強(qiáng)度會(huì)隨著細(xì)胞的分裂而逐級(jí)遞減,標(biāo)記熒光可平均分配至兩個(gè)子代細(xì)胞中,因此其熒光強(qiáng)度是親代細(xì)胞的一半,根據(jù)這一特性,它可被用于檢測(cè)細(xì)胞增殖,細(xì)胞周期的估算及細(xì)胞分裂等方面。PKH67標(biāo)記細(xì)胞的熒光非常均一,并且分裂后的子代細(xì)胞的熒光分配也更均一。在細(xì)胞分裂增殖過程中,PKH67標(biāo)記熒光可平均分配至兩個(gè)子代細(xì)胞中,熒光強(qiáng)度變?yōu)橛H代細(xì)胞的一半,通過流式細(xì)胞儀根據(jù)熒光強(qiáng)度的不同,可檢測(cè)出未分裂細(xì)胞,分裂一次(1/2 的熒光強(qiáng)度),二次(1/4 的熒光強(qiáng)度),三次(1/8 的熒光強(qiáng)度),以及更多分裂次數(shù)的細(xì)胞。PKH67 可檢測(cè)分裂次數(shù)多達(dá)六次甚至更多。 除了用于細(xì)胞增殖檢測(cè),PKH67 還可以用于細(xì)胞的體外盒體內(nèi)示蹤,標(biāo)記后熒光在胞內(nèi)表達(dá)穩(wěn)定,陽(yáng)性標(biāo)記率達(dá)98%以上,標(biāo)記細(xì)胞形態(tài)良好,能有效地觀察細(xì)胞在體外的誘導(dǎo)分化情況;或?qū)?biāo)記的細(xì)胞注入體內(nèi),可以有效的顯示移植細(xì)胞在活體組織中的遷移及分化。 |
PKH67標(biāo)記的細(xì)胞用于體內(nèi)觀察可以長(zhǎng)達(dá)數(shù)周之久,它常被用來(lái)做活體細(xì)胞檢測(cè)實(shí)驗(yàn)和用熒光電鏡觀察細(xì)胞長(zhǎng)期活動(dòng)的實(shí)驗(yàn)。PKH67 毒性較小,不影響細(xì)胞的增殖能力。此方法操作簡(jiǎn)單,且不用放射性同位素,不存在安全隱患??梢愿焖?,更準(zhǔn)確和更安全地得到想要的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。
PKH67標(biāo)記細(xì)胞后通常用流式細(xì)胞儀進(jìn)行細(xì)胞增殖檢測(cè)。
PKH67標(biāo)記細(xì)胞呈綠色熒光,熒光波長(zhǎng):λex=490 nm,λem=502 nm。
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存。
培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
羅漢果皂苷Ive(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Dimethyl sulfoxide磷化GATA結(jié)合蛋白4抗體包裝1g
羅漢果皂苷V(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ethylene glycolGATA結(jié)合蛋白6抗體包裝25g
羅漢果皂苷ⅡA2英文名稱: Glycerol in water for HPLC verificationGLP-1單克抗體包裝5g
羅漢果皂苷ⅢA1英文名稱: Lithium carbonate顆粒B抗體包裝25g
羅漢果皂苷Ⅲe英文名稱: Neocuproine hydrochloride monohydrateG蛋白偶聯(lián)受體30抗體包裝5g
羅漢松樹脂酚-4'-O-β-龍膽二糖苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Potassium bromide神經(jīng)節(jié)苷脂誘導(dǎo)分化相關(guān)蛋白2抗體包裝100g
羅通定/左旋延胡索乙/左旋四氫巴馬汀(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Arsenazo I Hydrate3-磷甘油脫氫包裝25g
蘿卜硫;萊菔硫烷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Sodium sulfate anhydrousGDNF家族受體α-1抗體包裝5g
裸花紫珠(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Dimethyl sulfone運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元存活蛋白結(jié)合蛋白1抗體包裝1g
絡(luò)塞定(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 1,3-Propanediol葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1抗體包裝100mg
絡(luò)塞琳(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: DHA葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2抗體包裝10mg
絡(luò)塞維(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Dimetridazole磷化糖皮質(zhì)激受體抗體包裝100g
絡(luò)石苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Penicillin V potassium saltG蛋白偶聯(lián)受體GPR158蛋白抗體包裝1g
絡(luò)石藤(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 2-NP-AOZγ連環(huán)蛋白/Catenin γ /γ鏈接抗體包裝5g
絡(luò)緦(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: SulfacetamideG1基丁A型受體相似蛋白2抗體包裝1g
海假交替單胞菌Pseudoalteromonas│marina 質(zhì)量規(guī)格:purity>99.5%,EP6,BR前顆粒蛋白試劑盒貓眼草黃;Chrysospleneti
鏈單孢菌屬菌種Streptomonospora│sp. 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品前膠原C內(nèi)肽增強(qiáng)子1試劑盒木栓;Friedelin
熱帶假絲酵母Candida│tropicalis 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR前膠原C端肽試劑盒白綿馬AP;Albaspidin AP
細(xì)胞膜染色試劑盒(PKH67)維生E
其他天然維生E;生育酚;維他命 E;[2R-[2R*(4R*,8R*)]]-3,4-二氫-2,5,7,8-四甲基-2-(4,8,12-基十三烷基)-6-色滿;(+)-5,7,8-基母育酚;2,5,7,8-四甲基-2-(4’,8’,12’-基十三烷基)-6-色滿醋酯;維他命戊
英文名稱:VE
其他英文名稱:Vitamin E;D-alpha-Tocopherol;(2R)-3,4-Dihydro-2,5,7,8-tetramethyl-2-[(4R,8R)-4,8,12-trimethyltridecyl]-2H-1-benzopyran-6-ol
產(chǎn)品規(guī)格:BR,50%
包裝:10克/100克
CAS號(hào):59-02-9
C29H50O2=430.71
含量:≥50.0%(HPLC)
干燥失重:≤1.0%
重金屬:≤10ppm
砷:≤1ppm
用途:生化研究。植物油中抗氧劑和催化加氫劑
保存:2~8℃,避光
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。