培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
產(chǎn)品屬于:
商品介紹:
DNA 在自由基(如·OH)的攻擊下容易發(fā)生損傷,即脫氧戊糖遭到破壞,磷酸二脂鍵的斷裂,堿基的破壞或脫落,便可進(jìn)一步產(chǎn)生單鏈斷裂或雙鏈斷裂。將細(xì)胞固定于低熔點瓊脂糖中,取少量細(xì)胞涂在載玻片上,用堿高鹽溶液破壞細(xì)胞膜,再用堿溶液使DNA 分子解旋。將載玻片置于電泳液中,在電場的作用下,DNA 分子向陽極移動。如果DNA 損傷嚴(yán)重,碎片多,則電泳速度快。未受損傷的DNA 大分子則由于細(xì)胞膜的阻隔,滯留在原處。用PI 染色或銀染,可觀察到DNA 受損的細(xì)胞形同彗星現(xiàn)象,作定性分析。也可用相關(guān)的軟件作定量分析。 |
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
γ干擾素受體(IFN-γR)elisa試劑盒英文名稱:IFN-γR ELISA Kit芳基硫酯酶A抗體包裝1g
γ干擾素(IFN-γ)elisa試劑盒英文名稱:IFN-γ ELISA Kit擬南芥ACA11抗體包裝1g
γ干擾素(IFNγ)elisa試劑盒英文名稱:IFNγ ELISA KitAHA3抗體(擬南芥)包裝250mg
γ分泌酶(GACE)elisa試劑盒英文名稱:GACE ELISA Kit磷化鈉ATP酶蛋白a1抗體包裝5g
γ-基丁(GABA)elisa試劑盒英文名稱:GABA ELISA Kit磷化凋亡信號調(diào)節(jié)激酶1抗體包裝50MG
γ基丁(GABA)elisa試劑盒英文名稱:GABA ELISA Kit中性膽固酯解酶1抗體包裝1g
β抑制蛋白2(ARRB2)elisa試劑盒英文名稱:ARRB2 ELISA Kit人星形膠質(zhì)抗體包裝5g
β血小板球蛋白/β血栓環(huán)蛋白(β-TG)elisa試劑盒英文名稱:β-TG ELISA Kit縮酶A抗體包裝100g
β細(xì)胞素(BTC)elisa試劑盒英文名稱:BTC ELISA Kit膜粘連蛋白6抗體包裝25g
β位淀粉樣前體蛋白裂解酶1(BACE1)elisa試劑盒英文名稱:BACE1 ELISA Kitβ淀粉樣肽(25-35)抗體包裝500g
β葡萄糖醛苷酶(βGD)elisa試劑盒英文名稱:βGD ELISA Kit血管緊張素I抗體包裝1g
β葡糖苷酶(β-glucosidase)elisa試劑盒英文名稱:β-glucosidase ELISA Kit腎上腺髓質(zhì)素抗體(N端20肽)包裝250mg
β內(nèi)酰胺酶抑制劑(BLI)elisa試劑盒英文名稱:BLI ELISA KitADP核糖基化因子結(jié)合蛋白2抗體包裝5g
β內(nèi)啡肽受體(β-EPR)elisa試劑盒英文名稱:β-EPR ELISA Kit精加壓素受體2抗體包裝25g
β內(nèi)啡肽(β-EP)elisa試劑盒英文名稱:β-EP ELISA Kit凋亡相關(guān)斑點樣蛋白ASC抗體包裝5g
磷化蛋白激酶B抗體基質(zhì)金屬蛋白酶10(MMP10)RG108 (N-Phthalyl-L-tryptophan) 是一種非核苷的 DNA 基轉(zhuǎn)移酶 (DNMTs) 抑制劑 (IC50=115 nM),RG10
彗星電泳法檢測細(xì)胞損傷試劑盒油鉀
其他 十八碳烯鉀;(Z)-9-十八烯鉀鹽;十八烯鉀
英文名稱: Potassium oleate
其他英文名稱: Potassium 9-octadecenoate;(Z)-9-Octadecenoic acid potassium salt
產(chǎn)品規(guī)格: CP
包裝:250克/1公斤
CAS號:143-18-0
C18H33KO2=320.55
級別:CP
重金屬:≤0.002%
灼燒殘渣:25.0~29.0%
游離堿:≤1.5%
乙溶解試驗:合格
性狀:淺黃色或淺棕色固體。質(zhì)軟。溶于水和乙,其水溶液對酚酞呈堿性。
用途:生化研究。乳化劑。清潔劑。
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