MTT細(xì)胞增值與毒性檢測(cè)試劑盒

MTT細(xì)胞增值與毒性檢測(cè)試劑盒正在出售的產(chǎn)品：脫氫復(fù)合物X蛋白抗體馬來(lái)氟伏沙明 Metamorphosin A
磷烯羧激抗體馬來(lái)那敏/撲爾敏 Neo-Kyotorphin
果糖-2,6-二磷1抗體馬來(lái)溴那敏 Neurokinin A (4-10)
磷化6磷果糖激抗體嗎貝 Neuropeptide W-30 (human)
p21蛋白抗體美芬諾 Neuropeptide W-30 (rat)
P選擇

操作規(guī)程：

1、在96孔板加入細(xì)胞00μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升5000～0000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～0μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及00%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。

5、每孔加50μL × MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×00

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時(shí)的藥物濃度(IC90)

中文名稱(chēng)：MTT細(xì)胞增值與毒性檢測(cè)試劑盒

英文名稱(chēng)：MTT Cell Proliferation and Cytotoxicity Assay Kit

產(chǎn)品規(guī)格：500T

發(fā)貨周期：1～3天

使用說(shuō)明：

1.收集對(duì)數(shù)期細(xì)胞，調(diào)整細(xì)胞懸液濃度，分于96孔板，每孔180μL，3000-10000個(gè)細(xì)胞/孔。

2.置37℃、5%CO2溫箱培養(yǎng)使細(xì)胞貼壁，培養(yǎng)6-24小時(shí)。

3.加入適當(dāng)濃度的受試化合物，繼續(xù)培養(yǎng)適當(dāng)時(shí)間。

4.小心吸去上清，加入90μL新鮮培養(yǎng)液，再加入10μL MTT溶液，繼續(xù)培養(yǎng)4 h。

5.然后吸掉上清，每孔加入110μL Formazan溶解液，置搖床上低速振蕩10 min，使結(jié)晶物充分溶解。在酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀490 nm處測(cè)量各孔的吸光值。

6.同時(shí)設(shè)置調(diào)零孔(培養(yǎng)基、MTT、 Formazan溶解液)，對(duì)照孔(細(xì)胞、相同濃度的藥物溶解介質(zhì)、培養(yǎng)液、MTT、 Formazan溶解液)，每組設(shè)定3復(fù)孔。

儲(chǔ)存條件：-20℃
注意事項(xiàng)：

1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用，不可用于診斷或治療。

2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心，將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底，避免開(kāi)蓋時(shí)試劑損失。

3、禁止與其他品牌的試劑混用，否則會(huì)影響使用效果。

4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。

5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。

6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。

7、需長(zhǎng)時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融，否則將會(huì)增加空白吸收，從而影響檢測(cè)結(jié)果。最好小劑量分裝，用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。

8、用培養(yǎng)基或 PBS 來(lái)配制待檢測(cè)藥物。如果待測(cè)藥物有還原性，則測(cè)定不含細(xì)胞，僅含有 MTS 的待測(cè)藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小，則可以直接加入 MTS ，如果吸光度相對(duì)較大，則需要除去培養(yǎng)基，并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次，然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測(cè)。

9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。

10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長(zhǎng)短根據(jù)細(xì)胞的類(lèi)型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定，對(duì)于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可，白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長(zhǎng)時(shí)間。

11、如果不是使用 96 孔板檢測(cè)，MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。

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C-肽(C-Peptide)elisa試劑盒英文名稱(chēng)：C-Peptide ELISA Kit補(bǔ)體C2a鏈多肽抗體包裝5g

蠟樣芽孢桿菌Bacillus│cereus 質(zhì)量規(guī)格：purity>97%,BR乙型肝炎病e抗原試劑盒野鷲尾苷;Lridin

: ivcas7.00265資源名稱(chēng): 球形賴(lài)芽孢桿菌 質(zhì)量規(guī)格：>98%,單醋鹽乙型肝炎病e抗體試劑盒芫花;Genkwanin

百日咳博德特氏菌Bordetella│pertussis 質(zhì)量規(guī)格：>99.0%,BR乙型肝炎表面抗原試劑盒3－乙?；橄?;alpha-bosw
MTT細(xì)胞增值與毒性檢測(cè)試劑盒衣康

其他 亞甲基琥珀；2-亞甲基丁二；分解烏頭；甲叉琥珀；甲叉丁二；亞甲基丁二；次甲基丁二；2-亞基-1,2-二羧；次甲基丁烯二；伊康

英文名稱(chēng)： Itaconic acid

其他英文名稱(chēng)： Propylenedicarboxylic acid

產(chǎn)品規(guī)格： CP，99%

包裝：100克/500克/5公斤

CAS號(hào)：97-65-4

C5H6O4=130.10

級(jí)別：CP

含量：99.0～101.0%

熔點(diǎn)：162～168℃(2℃)

水溶解試驗(yàn)：合格

灼燒殘?jiān)?/span>(以硫鹽計(jì))：≤0.1%

性狀：結(jié)晶。有特殊氣味。有吸濕性。1G溶于12ml水、5ml乙,極微溶于、、二硫化碳。相對(duì)密度1.63。有刺激性

用途：生化研究。有機(jī)合成

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