參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱(chēng):鴨肝炎病毒1型RT-PCR試劑盒50次
產(chǎn)品貨號(hào):FS-P013569
產(chǎn)品規(guī)格:50次
產(chǎn)品分類(lèi):純化試劑盒
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
實(shí)驗(yàn)過(guò)程:
一、試劑準(zhǔn)備 1. DNA模板 2.對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無(wú)到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 二、操作步驟 1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。 2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。 3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。 4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。 |
注意事項(xiàng)
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個(gè)檢測(cè)過(guò)程應(yīng)嚴(yán)格按照本說(shuō)明書(shū)要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線(xiàn)殺菌裝置。
2.為避免RNA降解,樣本處理過(guò)程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè);樣本處理過(guò)程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過(guò)無(wú)核酶處理。
3.每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽(yáng)性對(duì)照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽(yáng)性對(duì)照在第一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6.為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7.儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說(shuō)明書(shū)相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號(hào)試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9.實(shí)驗(yàn)過(guò)程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無(wú)害化處理后方可丟棄。
TBX2/T-box2(T-box Protein 2) 新型抑癌基因(多肽)Multi-class antibodies: 0.5mg
SMARCA4/SNF2 beta 抑癌基因SNF2β抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rhesus antibody Rh PEA15 星形膠質(zhì)細(xì)胞PEA15抗體 0.2ml
CD31 濃縮液 0.1ml 進(jìn)口分裝
Trk C 酪激C抗體(神經(jīng)生長(zhǎng)因子受體的一種) 0.1ml
Cystatin B 胱抑B/半胱蛋白抑制劑B抗體 0.2ml
SMARCA4/SNF2 beta 抑癌基因SNF2β抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
KLK 1(Human Kallikrein 1) ELISA Kit 人激肽釋放1Multi-class antibodies: 48T
Myelin Protein Zero 外周髓磷脂P0蛋白/P0蛋白抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rhesus antibody Rh IMPDH1 肌苷單磷脫氫1抗體 0.2ml
PAL ELISA Kit 大鼠L丙解 96T
progesterone receptor 孕受體抗體 0.1ml
C19orf2 19號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框2抗體 0.1ml
Myelin Protein Zero 外周髓磷脂P0蛋白/P0蛋白抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Donkey Goat IgG/APC APC標(biāo)記的驢抗羊IgG 0.1ml
GLS2 谷酰胺酰胺解抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh ASBT/SLC10A2 頂膜鈉依賴(lài)性膽鹽轉(zhuǎn)運(yùn)體蛋白抗體 0.2ml
HSP-70/FITC 熒光標(biāo)記HSP-70蛋白抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit mouse IgG/APC APC標(biāo)記的兔抗小鼠IgG 0.1ml
Phospho-PNK1 (Ser114/Thr118) /FITC 熒光標(biāo)記磷化多聚合苷激3磷化抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
鴨肝炎病毒1型RT-PCR試劑盒50次巴西曲霉種屬: Aspergillus brasiliensis提供形式: 凍干粉安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 綜合PDA:20%馬鈴薯汁1L,葡萄糖20g ,KH2PO4 3g, MgSO4.7H2O 1.5g,硫胺微量,瓊脂 15g,pH 自然。生長(zhǎng)條件: 25,好氧生長(zhǎng)特性: @BNCC在CPDA斜面上生長(zhǎng)5-7天,產(chǎn)黑色孢子。
溝鞭藻赫夫勒氏菌種屬: Hoeflea│alexandrii分離基物: 生物樣/海洋腰鞭毛蟲(chóng)提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 模式菌株,用于系統(tǒng)分類(lèi)鑒定。培養(yǎng)基: 471生長(zhǎng)條件: 30℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
海南赤霉種屬: Gibberella│hainanensis提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 192生長(zhǎng)條件: 25-28℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法
嗜鹽棲鹽芽孢桿菌種屬: Salsuginibacillus│halophilus分離基物: 底泥提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 模式菌株培養(yǎng)基: 270生長(zhǎng)條件: 37℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白(Bid)ELISA試劑盒1-甲基吡唑-4-頻哪酯 97%4-三氟甲氧基 99%天狼猩紅
Bcl-2樣蛋白1(BCL2L1)ELISA試劑盒5-甲基吡啶-3- 98%芐基酮 98%DL-2氨基丁(>98.5%,BR)
Bcl-2相關(guān)X蛋白(BAX)ELISA試劑盒2-甲氧基吡啶-3-頻哪酯 97%氧化鉿(IV) 99.99% metals basisDL-2-羧(>98%,BR)
A組鏈球菌菌壁多糖抗體(ASP)ELISA試劑盒2-甲氧基吡啶-5-頻哪酯 97% Standard for GCDL-甘氨(>98%,BC)
A組鏈球菌多糖抗原(ASP Ag)ELISA試劑盒1-BOC-吡咯-3- 98%溶液 AR,30-33 wt. % in absolute ethanolDL-beta-氨(>98%,BR)
A激PRKA錨定蛋白12(Akap12)ELISA試劑盒3- 97%溶液 CP,30-33 wt. % in absolute ethanolDL-肉鹽鹽
AT豐富結(jié)合域1A(ARID1A)ELISA試劑盒2-基-5-降烯 98%2-氨基-2-甲基-1- 97%DL-鳥(niǎo)氨鹽鹽(>98%,BC)
ATP(ATP)ELISA試劑盒嘧啶-5- 98%碳?xì)?AR,99.5% DL-(>99%,BP)
Apelin12(AP12)ELISA試劑盒吡啶-4- 94%無(wú)碳 AR,99%甲基烯二甲氨乙酯(>99%,BR)
Apelin 36(AP36)ELISA試劑盒嘧啶-5-頻哪酯 97%無(wú)碳 GR,99.5%D-蘋(píng)果(>98%,BR)
apelin 13(AP13)ELISA試劑盒2-(三氟甲氧基) 97%無(wú)碳 PTDMS
apelin 12(AP12)ELISA試劑盒2,4,6-三 98% 無(wú)碳 SPD-正亮氨(>99%,BC)
AP-5復(fù)合物β亞基(PP1030)ELISA試劑盒異辛 GCS,≥99.5% (GC)無(wú)碳 99.99% metals basis鹽多巴
Alpha-D 酚/維生E(Alpha-D TPL)ELISA試劑盒異辛 CP,98.0%無(wú)碳 99.995% metals basisDST
Agouti相關(guān)蛋白(AGRP)ELISA試劑盒異辛 >99.0% (GC)無(wú)碳 ACS, ≥99.0% 2'-脫氧尿苷-5'-三三鈉鹽
AFG3樣蛋白2(AFG3L2)ELISA試劑盒2-溴異丁酰溴 98%硝 AR,99.0%四氫甲基嘧啶羧(>98%,BR)
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
3.樣本孔中加入待測(cè)樣本50μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿(mǎn)洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。