詳細介紹
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:鴨肝炎病毒1型RT-PCR試劑盒50次
產(chǎn)品貨號:FS-P013569
產(chǎn)品規(guī)格:50次
產(chǎn)品分類:純化試劑盒
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
實驗過程:
一、試劑準備 1. DNA模板 2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 二、操作步驟 1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。 2.調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。 3.結(jié)束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。 |
注意事項
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器、耗材應獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解,樣本處理過程應在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實驗應該設(shè)置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻,并應瞬時離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在第一次使用前應全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū),并單獨存放。
6.為防止熒光干擾,應避免裸手直接接觸PCR反應管,并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7.儀器擴增相關(guān)參數(shù)應按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
TBX2/T-box2(T-box Protein 2) 新型抑癌基因(多肽)Multi-class antibodies: 0.5mg
SMARCA4/SNF2 beta 抑癌基因SNF2β抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rhesus antibody Rh PEA15 星形膠質(zhì)細胞PEA15抗體 0.2ml
CD31 濃縮液 0.1ml 進口分裝
Trk C 酪激C抗體(神經(jīng)生長因子受體的一種) 0.1ml
Cystatin B 胱抑B/半胱蛋白抑制劑B抗體 0.2ml
SMARCA4/SNF2 beta 抑癌基因SNF2β抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
KLK 1(Human Kallikrein 1) ELISA Kit 人激肽釋放1Multi-class antibodies: 48T
Myelin Protein Zero 外周髓磷脂P0蛋白/P0蛋白抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rhesus antibody Rh IMPDH1 肌苷單磷脫氫1抗體 0.2ml
PAL ELISA Kit 大鼠L丙解 96T
progesterone receptor 孕受體抗體 0.1ml
C19orf2 19號染色體開放閱讀框2抗體 0.1ml
Myelin Protein Zero 外周髓磷脂P0蛋白/P0蛋白抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Donkey Goat IgG/APC APC標記的驢抗羊IgG 0.1ml
GLS2 谷酰胺酰胺解抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh ASBT/SLC10A2 頂膜鈉依賴性膽鹽轉(zhuǎn)運體蛋白抗體 0.2ml
HSP-70/FITC 熒光標記HSP-70蛋白抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit mouse IgG/APC APC標記的兔抗小鼠IgG 0.1ml
Phospho-PNK1 (Ser114/Thr118) /FITC 熒光標記磷化多聚合苷激3磷化抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
鴨肝炎病毒1型RT-PCR試劑盒50次巴西曲霉種屬: Aspergillus brasiliensis提供形式: 凍干粉安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 綜合PDA:20%馬鈴薯汁1L,葡萄糖20g ,KH2PO4 3g, MgSO4.7H2O 1.5g,硫胺微量,瓊脂 15g,pH 自然。生長條件: 25,好氧生長特性: @BNCC在CPDA斜面上生長5-7天,產(chǎn)黑色孢子。
溝鞭藻赫夫勒氏菌種屬: Hoeflea│alexandrii分離基物: 生物樣/海洋腰鞭毛蟲提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: yes應用領(lǐng)域: 模式菌株,用于系統(tǒng)分類鑒定。培養(yǎng)基: 471生長條件: 30℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
海南赤霉種屬: Gibberella│hainanensis提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 192生長條件: 25-28℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
嗜鹽棲鹽芽孢桿菌種屬: Salsuginibacillus│halophilus分離基物: 底泥提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: yes應用領(lǐng)域: 模式菌株培養(yǎng)基: 270生長條件: 37℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導蛋白(Bid)ELISA試劑盒1-甲基吡唑-4-頻哪酯 97%4-三氟甲氧基 99%天狼猩紅
Bcl-2樣蛋白1(BCL2L1)ELISA試劑盒5-甲基吡啶-3- 98%芐基酮 98%DL-2氨基丁(>98.5%,BR)
Bcl-2相關(guān)X蛋白(BAX)ELISA試劑盒2-甲氧基吡啶-3-頻哪酯 97%氧化鉿(IV) 99.99% metals basisDL-2-羧(>98%,BR)
A組鏈球菌菌壁多糖抗體(ASP)ELISA試劑盒2-甲氧基吡啶-5-頻哪酯 97% Standard for GCDL-甘氨(>98%,BC)
A組鏈球菌多糖抗原(ASP Ag)ELISA試劑盒1-BOC-吡咯-3- 98%溶液 AR,30-33 wt. % in absolute ethanolDL-beta-氨(>98%,BR)
A激PRKA錨定蛋白12(Akap12)ELISA試劑盒3- 97%溶液 CP,30-33 wt. % in absolute ethanolDL-肉鹽鹽
AT豐富結(jié)合域1A(ARID1A)ELISA試劑盒2-基-5-降烯 98%2-氨基-2-甲基-1- 97%DL-鳥氨鹽鹽(>98%,BC)
ATP(ATP)ELISA試劑盒嘧啶-5- 98%碳氫 AR,99.5% DL-(>99%,BP)
Apelin12(AP12)ELISA試劑盒吡啶-4- 94%無碳 AR,99%甲基烯二甲氨乙酯(>99%,BR)
Apelin 36(AP36)ELISA試劑盒嘧啶-5-頻哪酯 97%無碳 GR,99.5%D-蘋果(>98%,BR)
apelin 13(AP13)ELISA試劑盒2-(三氟甲氧基) 97%無碳 PTDMS
apelin 12(AP12)ELISA試劑盒2,4,6-三 98% 無碳 SPD-正亮氨(>99%,BC)
AP-5復合物β亞基(PP1030)ELISA試劑盒異辛 GCS,≥99.5% (GC)無碳 99.99% metals basis鹽多巴
Alpha-D 酚/維生E(Alpha-D TPL)ELISA試劑盒異辛 CP,98.0%無碳 99.995% metals basisDST
Agouti相關(guān)蛋白(AGRP)ELISA試劑盒異辛 >99.0% (GC)無碳 ACS, ≥99.0% 2'-脫氧尿苷-5'-三三鈉鹽
AFG3樣蛋白2(AFG3L2)ELISA試劑盒2-溴異丁酰溴 98%硝 AR,99.0%四氫甲基嘧啶羧(>98%,BR)
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設(shè)置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
3.樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。