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詳細(xì)介紹
注意事項(xiàng)
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個(gè)檢測(cè)過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作，各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器、耗材應(yīng)獨(dú)立使用，不能混用；實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作；三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè)；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對(duì)照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對(duì)照在第一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨(dú)存放。
6.為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7.儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置；不同批號(hào)試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9.實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：漢灘型漢坦病毒染料法熒光定量RT-PCR試劑盒
產(chǎn)品貨號(hào)：FS-P013432
產(chǎn)品規(guī)格： 50次
產(chǎn)品分類：純化試劑盒
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
實(shí)驗(yàn)過程：
一、試劑準(zhǔn)備 1. DNA模板 2．對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物） 3．10×PCR Buffer 4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5．Taq酶 | 二、操作步驟 1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1（10pM） 2μl 引物2（10PM） 2μl Taq酶（2U/μl） 1μl DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。 2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。 3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。 4．PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。 |
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL；
3.樣本孔中加入待測(cè)樣本50μL；空白孔不加。
4.除空白孔外，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機(jī)洗板）。
6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。
Phospho-LIMK1 (Thr508)/LIMK2 (Thr505) /FITC 熒光標(biāo)記磷化單絲蛋白激1/2抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Stra8/FITC 熒光標(biāo)記視黃激活基因8抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh ADRB3/beta 3 Adrenergic Receptor β3腎上腺能受體抗體 0.1ml
Rabbit Goat IgM/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標(biāo)記的兔抗羊IgM 0.1ml
GPSM1 G蛋白信號(hào)調(diào)節(jié)蛋白1抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit dog IgG/Bio 生物標(biāo)記的兔抗狗IgG 0.3ml
Stra8/FITC 熒光標(biāo)記視黃激活基因8抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
GBM(Human glomerular basement membrane antibogy) ELISA Kit 人抗腎小球基底膜抗體Multi-class antibodies： 48T
Phospho-MK6 (Ser207) 磷化原活化蛋白激MKK6抗體Multi-class antibodies： 0.1ml
Rhesus antibody Rh HSPA6 熱休克蛋白70家族蛋白6抗體 0.2ml
Human PL7-antibody ELISA Kit 人PL7抗體/抗蘇酰tRNA合成 96T
PTPRS 蛋白酪磷PTPσ抗體 0.1ml
CD20L CD20樣蛋白抗體(造血干細(xì)胞4跨膜蛋白3) 0.2ml
Phospho-MK6 (Ser207) 磷化原活化蛋白激MKK6抗體Multi-class antibodies： 0.1ml
Rabbit rat IgG/Cy3 Cy3標(biāo)記的兔抗大鼠IgG 0.1ml
GPRIN1 G蛋白調(diào)節(jié)誘導(dǎo)神經(jīng)突增生蛋白1抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Apelin/Apelin 13 脂肪炎癥因子Apelin抗體 0.1ml
IL-17/PE 熒光PE標(biāo)記白介-17抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit human IgM/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標(biāo)記的兔抗人IgM 0.1ml
Raptor /FITC 熒光標(biāo)記mTOR相關(guān)調(diào)控蛋白抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
漢灘型漢坦病毒染料法熒光定量RT-PCR試劑盒中間蒼白桿菌種屬: Ochrobactrum│intermedium分離基物: Blood culture提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 模式菌株培養(yǎng)基: 2生長(zhǎng)條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
釀酒酵母種屬: Saccharomyces│cerevisiae提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 酒精酵母培養(yǎng)基: CM0013生長(zhǎng)條件: 25-28℃存儲(chǔ)條件: 礦物油法；定期移植法
嗜乳桿菌種屬: Lactobacillus│acidophilus分離基物: 人的排泄物提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 用于益生菌類保健食品。培養(yǎng)基: CM0789生長(zhǎng)條件: 37℃存儲(chǔ)條件: -80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法
球毛殼霉種屬: Chaetomium│globosum提供形式: 斜面培養(yǎng)物；凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 除光學(xué)儀器外的防霉試驗(yàn)菌培養(yǎng)基: 17生長(zhǎng)條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法
腎損傷分子1(Kim-1)ELISA試劑盒乙戊酯 CP,98.5% 丁位癸內(nèi)酯 98%硝唑尼特(標(biāo)準(zhǔn)品)
腎(Renin)ELISA試劑盒茴香 98%鄰甲氨基甲甲酯 98%寡霉A
腎上腺髓質(zhì)前體(Pro-ADM)ELISA試劑盒乙縮 CP,97%位癸內(nèi)酯 98%鹽奧洛他定
腎上腺髓質(zhì)(ADM)ELISA試劑盒乙縮 Standard for GC，>99%（GC)鄰甲氨基甲甲酯 ≥98%, FCC, Kosher鹽奧洛他定(標(biāo)準(zhǔn)品)
腎上腺能a1A受體(ADRA1A)ELISA試劑盒乙縮 98%正癸 98%鹽奧昔布寧
腎上腺(EPI)ELISA試劑盒乙縮 ≥98%, FG1,4-二甲氧基 99%鹽奧昔布寧(標(biāo)準(zhǔn)品)
腎上腺皮質(zhì)抗體(ACA)ELISA試劑盒茴香烯 99%一縮二 99%鹽帕汀
蛋白(nephrin)ELISA試劑盒乙溶液 35 wt. % in H2O一縮二 98%鹽帕(標(biāo)準(zhǔn)品)
腎(RNLS/MAO-C)ELISA試劑盒甲位戊基桂 97%癸 97%吡羅昔康
神經(jīng)元凋亡抑制蛋白(NAIP)ELISA試劑盒楊梅 98%2,5-二甲基吡 98%吡羅昔康(標(biāo)準(zhǔn)品)
神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子4(NT-4)ELISA試劑盒乙戊酯 ≥99%丁位十二內(nèi)酯 98%泊沙
神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子3(NT-3)ELISA試劑盒2,3-丁二 98%乙癸酯 98%泊唑(標(biāo)準(zhǔn)品)
神經(jīng)型一氧化氮合成(nNOS)ELISA試劑盒丁丁酯 Standard for GC, ≥99.5% (GC)乙二甲基原酯 99%利福昔明
神經(jīng)粘著分子(NRCAM)ELISA試劑盒丁丁酯 >99.0%(GC)乙二
神經(jīng)粘附分子配體1(NCAM-L1/CD171)ELISA試劑盒甲芐酯 CP,98.0%2,6-二甲基-2-庚 99%鹽羅匹尼羅
神經(jīng)調(diào)節(jié)1亞型HRGβ1(NRG1)ELISA試劑盒甲芐酯 >99.0%(GC)癸乙酯 99%鹽羅
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