商品介紹:
Hoechst33342/PI雙染細(xì)胞凋亡檢測試劑盒是采用DNA探針雙染細(xì)胞核的方法檢測細(xì)胞的狀態(tài)。Hoechst33342染色液A可以透過正常細(xì)胞膜,而細(xì)胞凋亡后,細(xì)胞膜對Hoechst33342染色液A的通透性增加,PI染色液B不能透過細(xì)胞膜,對正常細(xì)胞和凋亡細(xì)胞不能染色,而對壞死細(xì)胞可以染色。用兩種染色液對細(xì)胞進(jìn)行雙染后,使用流式細(xì)胞儀或熒光顯微鏡即可對細(xì)胞狀態(tài)進(jìn)行檢測。在雙變量流式細(xì)胞儀的散點(diǎn)圖上,這三群細(xì)胞表現(xiàn)分別為:正常細(xì)胞為低藍(lán)色/低紅色(A+/B+),凋亡細(xì)胞為高藍(lán)色/低紅色(A++/B+),壞死細(xì)胞為低藍(lán)色/高紅色(A+/B++)。 |
儲存條件:A液和B液-20℃避光保存。C液2-8℃保存。
有效期:一年。
產(chǎn)品屬于:
培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
蘋果舒尼替尼英文名稱: Clarithromycin 濃縮2復(fù)合亞基D3抗體包裝500g
羥基脲英文名稱: Clarithromycin 磷化分裂周期蛋白6抗體包裝1g
曲美替尼英文名稱: Clindamycin Phosphate磷化周期依賴激2抗體包裝5g
塞卡替尼英文名稱: Clindamycin Phosphate碳酐12抗體包裝1g
三亞乙基硫代磷酰英文名稱: Clofarabine泛載體蛋白R2抗體包裝250mg
色瑞替尼,LDK378英文名稱: Clotrimazole粘附分子3抗體包裝5g
舒尼替尼堿英文名稱: Clotrimazole整合相關(guān)蛋白CD47包裝1g
順鉑英文名稱: Colchlcine磷化角蛋白8抗體包裝5g
司莫司汀英文名稱: Colchlcine鈣結(jié)合蛋白D28K抗體包裝100g
他克莫司英文名稱: Colistin Sulphate磷化接頭蛋白CrkL抗體包裝100g
他米巴羅汀英文名稱: Colistin Sulphate磷化接頭蛋白CrkL抗體包裝25g
坦度替尼;MLN518英文名稱: Eflornithine HCl促腎上腺皮質(zhì)釋放激受體1抗體包裝500g
坦西莫司, 西羅莫司脂化物英文名稱: Cromolyn sodium磷化絲切蛋白抗體包裝1g
替拉替尼英文名稱: Cromolyn sodium皮層肌動蛋白抗體包裝5g
替莫唑英文名稱: Cyclosporine A促腎上腺皮質(zhì)釋放激受體2抗體包裝25g
: =ATCC-VR31資源名稱: 人??虏《?質(zhì)量規(guī)格:HPLC含量測定胰島樣生長因子2 mRNA結(jié)合蛋白2試劑盒異香蘭;Isovanillin
: =AS2.541資源名稱: 釀酒酵母 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%,BR胰島樣生長因子1受體試劑盒原阿片堿;Protopine
異常漢遜酵母異常變種Hansenula│anomala var. anomala 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR胰島樣生長因子1試劑盒異龍腦;DL-Isoborneol
Hoechst33342/PI雙染試劑盒野黃芩苷
其他 野黃芩甙;燈盞花乙;高黃芩苷;高黃芩甙;印黃芩苷;黃芹
英文名稱: Scutellarin
其他英文名稱: 7-(beta-D-Glucopyranuronosyloxy)-5,6-dihydroxy-2-(4-hydroxyphenyl)-4H-1-benzopyran-4-one
產(chǎn)品規(guī)格: 分析標(biāo)準(zhǔn)品,98%
包 裝: 20毫克
CAS號:27740-01-8
C21H18O12=462.37
級別:Analytical standard
含量:≥98.0%(HPLC)
性狀:為云南*的菊科植物燈盞細(xì)辛中提取
用途:生化研究。
保存:RT