培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
產(chǎn)品屬于:
商品介紹:
用途: DNA染色 注意事項(xiàng): 鹽酸水解時(shí)間很重要,主要由鹽酸、雪夫試劑、亞等組成。染色結(jié)果為:DNA呈紫紅色,細(xì)胞質(zhì)呈綠色 儲(chǔ)存條件:4℃,避光,6個(gè)月 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
乳酒假絲酵母α1,4-N-乙酰葡糖轉(zhuǎn)移α4Gn-T抗體Human KTN1 ELISA Kit小鼠微管蛋白β3(TUBB3)免疫試劑盒
南海區(qū)交替紅色桿菌芳香乙酰脫乙酰基抗體Human LAMR1/RPSA ELISA Kit小鼠網(wǎng)膜(omentin)免疫試劑盒
路氏腸桿菌芳香乙酰脫乙?;鶚拥鞍?/span>4抗體Human LANCL1 ELISA Kit小鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌基乙二半脫氫磷泛酰巰基乙轉(zhuǎn)移抗體Human Langerin ELISA Kit小鼠脫氧膠原吡啶交聯(lián)(DPD)免疫試劑盒
融粘帚霉賴戊二還原抗體Human KRT81 ELISA Kit小鼠脫氫表雄硫酯(DHEA-S)免疫試劑盒
F56(蘑菇)錨蛋白重復(fù)域6抗體Human KRT80 ELISA Kit小鼠脫氫表雄(DHEA)免疫試劑盒
黃薄芝精2抗體Human KRT6B ELISA Kit小鼠褪黑(MT)免疫試劑盒
食芽胞桿菌固還原家族1成員C3抗體Human KPNA5 ELISA Kit小鼠突觸融合蛋白2(STX2)免疫試劑盒
大腸埃希菌促腎上腺皮質(zhì)激受體Human KPNA4(Karyopherin subunit alpha-4) ELISA Kit小鼠突觸融合蛋白1A(STX1A)免疫試劑盒
肉色曲霉褐黑相關(guān)蛋白ART抗體Human KPNA6(Karyopherin subunit alpha-6) ELISA Kit小鼠透明質(zhì)結(jié)合蛋白(HABP)免疫試劑盒
中溫富鹽菌腎上腺皮質(zhì)線粒體鐵氧還蛋白抗體Human KPTN ELISA Kit小鼠透明質(zhì)(HA)免疫試劑盒
深褐褶菌Allgrove綜合征相關(guān)蛋白抗體Human KRAP/SSFA2 ELISA Kit小鼠銅藍(lán)蛋白(CP/CER)免疫試劑盒
中國(guó)臺(tái)灣根霉腺相關(guān)病5 VP1抗體Human KRAS(GTPase KRas) ELISA Kit小鼠同型半胱(Hcy)免疫試劑盒
禽腺病Ⅶ型脂肪脫氫抗體Human KLHDC5 ELISA Kit小鼠鐵調(diào)(Hepc)免疫試劑盒
木賊鐮孢抗利尿激1A抗體Human KRR1 ELISA Kit小鼠鐵蛋白(FE)免疫試劑盒
富養(yǎng)羅爾斯通氏菌抗利尿激受體1B抗體Human KRI1 ELISA Kit小鼠天門(mén)冬基轉(zhuǎn)移(AST)免疫試劑盒
: AS3.2835資源名稱(chēng): 串珠鐮孢 質(zhì)量規(guī)格:BR白三烯C4試劑盒8-香葉草氧基補(bǔ)骨脂
杉木假單胞菌Pseudomonas│cunninghamiae 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR白三烯B4試劑盒熊果乙酯
堅(jiān)強(qiáng)芽孢桿菌Bacillus│firmus 質(zhì)量規(guī)格:分子生物學(xué)級(jí)白介增強(qiáng)子結(jié)合因子2試劑盒細(xì)辛
福爾根DNA染色液(Feulgen Stain)瓊脂糖凝膠4B
英文名稱(chēng):Sepharose 4B
產(chǎn)品規(guī)格:進(jìn)分
包裝:100毫升/500毫升
產(chǎn)品規(guī)格:國(guó)產(chǎn)
包裝:100毫升/500毫升
CAS號(hào):9012-36-6
級(jí)別:BR
Agarose:4%
Optimal MW Separation range(globular proteins):70×103~20×106
Bead size range:45~165um
Recommend linear flow rate:11.5cm/h
pH stability:long term and working,short term :4~9
Chemical stability:Stable to all solutions commonly used in gel.filtration including 8 M urea and 6 M guanidine hydrochloride
Physical stability:Negligible volume variation due to changes in pH or ionic strength
凝膠類(lèi)型:凝膠過(guò)濾填料,凝膠層析介質(zhì)
結(jié)構(gòu)成分:4%交聯(lián)度瓊脂糖
粒 徑:45-165µm
工作PH值:4-9
操作溫度:4-40℃
分離范圍:70000~20 ×106
性狀:含20%的乙,底部為乳白色膠體。凝膠要反復(fù)使用的話要用純凈水將酒精洗下來(lái),裝到層析柱里就可以用了
用途:生化研究。適合于分離蛋白及多糖、肽類(lèi)分子量的測(cè)定
保存:2~8℃