化工儀器網
詳細介紹
實驗外包:
1.基因組學：基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學分析
2.轉錄組學：microRNA芯片、LncRNA芯片、表達譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質組學：2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測：DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質檢測：Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測：HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細胞分選
7.代謝組學：GC-MS、LC-MS、NMR
8.細胞及動物模型：原代細胞、細胞模型、動物模型構建
產品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
50次 | FS-P013574 |
組成及試劑配制:
1、酶標板：一塊（96孔）
2、 標準品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復顛倒/搓動以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液：1×20ml。
4、 檢測稀釋液A：1×10ml。
使用方法：
一、稀釋PCR陽性對照（以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例） 1. 注意：由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原，本產品不提供活體樣品做陽性對照，只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對照。 2. 標記6個離心管，分別為7，6，5，4，3，2。 3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。 4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照，充分震蕩1分鐘，得1×10E7拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。 5. 換槍頭，在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩1分鐘，得1×10E6拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。 6. 換槍頭，在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中，充分震蕩1分鐘，得1×10E5拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。 7. 重復上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。 | 二、樣品DNA的制備 8. 如果有N個樣品，必須設置N+2個提取， 多出的一個是PC（樣品制備陽性對照）， 一個是NC（樣品制備陰性對照）。 可以用10μL上步制備的PCR陽性對照的第4號（濃度為1×10E4 拷貝/μL，10μL相當于1萬拷貝）或第5號（濃度為1×10E5 拷貝/μL，10μL相當于10萬拷貝）再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣，以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品，則PC和NC的體積也必須是200μL。 9. 用自選方法純化樣品的DNA，本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒。 | 三、設置qPCR反應（20 μL體系，在樣品制備室進行） 10. 如果只做1次重復，則標記N+9個PCR管，其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品，1個用于PCR陰性對照，6個用于PCR陽性對照。如果做2-3次重復，則反應設置數(shù)量相應增加2或3倍。 11. 產品僅用于科研在標記管中按下表加入各成分（本表只列出一次重復。樣品管和陰性對照設置完畢后才設置陽性對照，并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加）
|
PCR實驗步驟：
①取凍存已裂解的細胞，室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀將水相上層轉移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1ml試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀?；靹蚝?，4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次，使其*溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值，測定RNA溶液 濃度和純度。
特別提示：本公司的所有產品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！
Human cyclophilin A,CyPA ELISA Kit 人嗜環(huán)蛋白/親環(huán)AMulti-class antibodies： 48T
Smad3 細胞信號轉導分子SMAD3抗體Multi-class antibodies： 0.1ml
Rhesus antibody Rh Goat rabbit IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標記的羊抗兔IgG 0.1ml
Apaf-1(Human apoptosis protease activating factor-1) ELISA Kit 人凋亡蛋白激活因子1 96T
NOX5 還原型Ⅱ氧化5/煙酰胺腺二核苷磷抗體 0.2ml
Phospho-Bad (Ser155) 磷化相關死亡促進因子抗體 0.1ml
Smad3 細胞信號轉導分子SMAD3抗體Multi-class antibodies： 0.1ml
ENA-78/CXCL5(Human Epithelial neutrophil activating peptide 78) ELISA Kit 人上皮中性粒細胞活化肽78Multi-class antibodies： 48T
PLAUR 尿激型纖溶原激活因子受體抗體Multi-class antibodies： 0.1ml
Rhesus antibody Rh HEY2 轉錄因子HEY2蛋白抗體 0.2ml
Des ELISA Kit 大鼠結蛋白 96T
procollagen type IIA Ⅱ型膠原α1 N端前體肽抗體 0.2ml
C9orf37 9號染色體開放閱讀框37抗體 0.2ml
PLAUR 尿激型纖溶原激活因子受體抗體Multi-class antibodies： 0.1ml
Donkey Guinea pig IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標記的驢抗豚鼠IgG 0.1ml
Phospho-Glucocorticoid Receptor (Ser226) 磷化糖皮質受體抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh ASIC1/BNaC2 敏感離子通道1抗體 0.1ml
HSP-20/FITC 熒光標記熱休克蛋白-20抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit mouse IgG/FITC FITC標記的兔抗小鼠IgG 0.3ml
PIM1/FITC 熒光標記前病毒整合位點蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
乙型肝炎病毒C型染料法熒光定量PCR試劑盒普通變形菌（暫無）種屬: Proteus vulgaris提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: yes應用領域: 內切PvuⅠⅡ, Type strain,培養(yǎng)基: 營養(yǎng)肉汁瓊脂 ：蛋白胨10.0 g，牛肉提取物 3.0 g，NaCl 5.0 g，瓊脂 15.0 g，蒸餾 1.0 L，pH 7.0生長條件: 37℃，好氧存儲條件: 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法
香菇種屬: Lentinula│edodes提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 食用、藥用培養(yǎng)基: 0014生長條件: 25℃存儲條件: 液氮超低溫凍結法；礦物油法；定期移植法
嗜鹽四聯(lián)球菌（醬油片球菌）種屬: Tetragenococcushalophilus安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 142生長條件: 30℃
短小芽孢桿菌種屬: Bacillus│pumilus提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 性蛋白培養(yǎng)基: 0002生長條件: 30℃存儲條件: 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法
28S抗核糖體抗體(28S rRNP)ELISA試劑盒甲基納迪克酐 95%2-羥基-3-萘甲 97%硬脂鉛
26S蛋白體非ATP調節(jié)亞基11(PSMD11)ELISA試劑盒硬脂甲酯 CP,45%（GC）楊甲酯 CP,98%硫鉛(>99%,BC)
26S蛋白體(26S PSM)ELISA試劑盒2-吡啶甲 98%楊 AR,99.5%硫鉛(>98%,BR)
25羥基維生D3(25(OH)D3/25 HVD3)ELISA試劑盒二鈉 99%楊 CP,99.0%紅色氧化鉛(>95%,BC)
25羥基維生D3(25 HVD3)ELISA試劑盒錫鈉 CP,53.67% SnO2楊 ACS, ≥99.0% 醋高鉛(>95%,BC)
25羥基維生D2(25 HVD2)ELISA試劑盒癸二 CP,98.0%楊 Ph. Eur., BP, USP, 99.5-100.5%鉛粉(>99%,BC)
20S蛋白體(20SP)ELISA試劑盒三丁酯 CP楊 用于植物培養(yǎng),≥99 %式碳鉛(>99%,BR)
2，3-二甘油(2，3-DPG)ELISA試劑盒三鹽鹽 98%考馬斯亮藍G250 AR雷氏曼著色劑
2，3－二甘油(2,3-DPG)ELISA試劑盒酯 98%考馬斯亮藍G250 AR，無蛋白來普霉B 1%溶液
2,3-二甘油(2,3-DPG)ELISA試劑盒三丁酯 >99.0%(T)考馬斯亮藍G250 70%，用于電泳3,5-二楊鋰(>98%，BC)
2,3Dinor血栓B2(2,3-dinor-TXB2)ELISA試劑盒三丁酯 CP,98% ≥98.0% (HPLC)（劇品）無溴化鋰(>98%,BR)
2 型次核苷脫氫(IMPDH)(IMPDH2)ELISA試劑盒硫代氨基脲 AR,98.5% Standard for GC, ≥99.5% (GC)氟化鋰
1型1-鞘氨受體(S1P1)ELISA試劑盒 分析標準品對甲磺酰 AR，99%偏鋰(>98%,BR)
17酮皮質類固(17-KS)ELISA試劑盒反-丹 分析標準品T 三合物 CP,98%草鋰(>98%,BR)
17-酮類固(17-KS)ELISA試劑盒二基錫 分析標準品T 三合物 ACS, 98%硬脂鋰(>98%,BR)
17羥孕酮(17-OHP)ELISA試劑盒二庚基錫 分析標準品T 三合物 AR,99.0%硫鋰一(分子生物學級)
化工儀器網