詳細(xì)介紹
細(xì)胞名稱 小鼠正常肝細(xì)胞;NCTC1469圖片
形態(tài)特性 上皮細(xì)胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細(xì)胞源自新生小鼠肝臟組織,由VJ Evans分離并建立于1952年。檢測結(jié)果顯示該細(xì)胞小鼠痘病毒陰性。
培養(yǎng)條件 DMEM-H:
Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法 1:
3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C6
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶 同工酶鑒定
染色體
使用權(quán)限 A類
小鼠正常肝細(xì)胞;NCTC1469圖片操作流程:
※主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡),co2孵箱。
※細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
?細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng):從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,同時(shí)不斷搖動(dòng)使之迅速融化,然后用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi),在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
?細(xì)胞傳代:原代培養(yǎng)的hek-293細(xì)胞48h換液1次,細(xì)胞長至60%~70%融合時(shí),用0.25%胰酶消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散,為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細(xì)胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
?細(xì)胞形態(tài)的觀察:在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
?生長曲線:取指數(shù)生長期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔,計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)10d,繪制細(xì)胞生長曲線
?細(xì)胞的貼壁率:指數(shù)生長期的細(xì)胞,以0.25%胰酶消化成單細(xì)胞懸液,計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞,加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100%,計(jì)算貼壁率。
?細(xì)胞的計(jì)數(shù):常規(guī)消化細(xì)胞,待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液,用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù),按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液=(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
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人丁型肝炎IgM(HDV IgM)ELISA試劑盒英文名稱:Human Hepatitis D virus IgM,HDV IgM ELISA Kit規(guī)格:96T/48T豬白介素18(IL-18)ELISA Kit,48T/96T 進(jìn)口/國產(chǎn)
人睪酮(T)ELISA試劑盒英文名稱:Human Testoterone,T ELISA Kit規(guī)格:96T/48T鴨白介素4(IL-4)ELISA Kit,48T/96T 進(jìn)口/分裝
人環(huán)孢素A(CsA)ELISA試劑盒英文名稱:Human Cyclosporine A,CsA ELISA Kit規(guī)格:96T/48T兔基質(zhì)金屬蛋白酶2/明膠酶A(MMP-2)ELISA Kit,48T/96T 進(jìn)口/國產(chǎn)
人端粒酶(TE)ELISA試劑盒英文名稱:Human omerase,TE ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T人正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌因子(RANTES)ELISA Kit,48T/96T 進(jìn)口/分裝
人胎球蛋白A(FETU-A)ELISA試劑盒英文名稱:Human Fetuin A,F(xiàn)ETU-A ELISA Kit規(guī)格:96T/48T人腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)ELISA Kit,48T/96T 進(jìn)口/國產(chǎn)
人血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)ELISA試劑盒英文名稱:Human thrombomodulin,TM ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子C(VEGF-C)ELISA Kit,48T/96T 進(jìn)口/分裝
人肺部活化調(diào)節(jié)趨化因子(PARC/CCL18)ELISA試劑盒 英文名稱:Human pulmonary activation regulated chemokine,PARC ELISA Kit規(guī)格:96T/48T大鼠前列腺酸性磷酸酶(PAP)ELISA Kit,48T/96T 進(jìn)口/國產(chǎn)
人巨噬細(xì)胞炎性蛋白1β(MIP-1β/CCL4)ELISA試劑盒 英文名稱:Human Macrophage Inflammatory Protein-1β,MIP-1β ELISA Kit規(guī)格:96T/48T人乙型肝炎病毒前S2抗體(HBV preS2Ab)ELISA Kit,48T/96T 進(jìn)口/分裝
林澤蘭內(nèi)酯CCAS 訂購|咨詢規(guī)格:HPLC≥98%,5mg/支;
仙茅苷CAS 85643-19-2訂購|咨詢規(guī)格:HPLC≥98%,20mg/vial
橙皮油內(nèi)酯;AurapteneCAS 495-02-3訂購|咨詢規(guī)格:20mg
豆蔻CAS 訂購|咨詢規(guī)格:1g
苷CAS 482-38-2訂購|咨詢規(guī)格:HPLC≥98%;20mg
12-O-Tiglylphorbol-1CAS 92214-54-5訂購|咨詢規(guī)格:HPLC≥98%;5mg/支
合成辣椒堿CAS 2444-46-4訂購|咨詢規(guī)格:HPLC≥98%;20mg
熒光素鈉CAS 訂購|咨詢規(guī)格:100mg
甲基當(dāng)藥寧CAS 22172-17-4訂購|咨詢規(guī)格:10mg
隱丹參;CryptotanshinCAS 35825-57-1訂購|咨詢規(guī)格:20mg
法卡林二醇CAS 55297-87-5訂購|咨詢規(guī)格:20mg
酚-4’-葡萄糖苷CAS 52222-74-9訂購|咨詢規(guī)格:HPLC≥98%;10mg