培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
產(chǎn)品屬于:
中文名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
廣譜caspase抑制劑(Q-VD-OPh) | Q-VD-OPh | 1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|25mg|50mg | 1~3天 |
商品介紹:
Q-VD-OPha是廣譜caspase抑制劑,具有高效的抗凋亡能力。抑制胱天蛋白酶1,3,8,9的IC50值分別為50,25,100,and430nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1135695-98-5 別名:QVD-OPH;Quinoline-Val-Asp-Difluorophenoxymethylketone 純度:99.26% 分子量:513.49 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀(guān)察圖像并拍照。
糖化酵母巨噬炎癥蛋白2( GROβ)抗體Human NCOR1(Nuclear receptor corepressor 1) ELISA Kit可溶性O(shè)X40L(sOX40L)ELISA試劑盒
側(cè)耳金屬硫蛋白抗體Human FUT6(Alpha-(1,3)-fucosyltransferase) ELISA Kit可溶性E選擇(sE-selectin)ELISA試劑盒
綠色木霉磷化微管相關(guān)蛋白2抗體Human HNRNPK(Heterogeneous nuclear ribonucleoprotein K) ELISA Kit可溶性Endoglin(sENG/sCD105)ELISA試劑盒
芽孢桿菌屬內(nèi)皮MMRN1蛋白抗體Human DEFB1(Beta-defensin 1) ELISA Kit可溶性CD86(B7-2/sCD86)ELISA試劑盒
硬毛栓孔菌磷化絲裂原活化蛋白激激1/2抗體Human CCBL1(Kynurenine–oxoglutaRate transaminase 1) ELISA Kit可溶性CD44變體9(sCD44-v9)ELISA試劑盒
拜氏色鹽桿菌磷化肝生長(zhǎng)因子受體(原癌基因)抗體Human AVP(Vasopressin-neurophysin 2-copeptin) ELISA Kit可溶性CD40配體(sCD40L)ELISA試劑盒
多根硬皮馬勃磷化肝生長(zhǎng)因子受體(原癌基因)抗體Human DEFB4A(Beta-defensin 4A) ELISA Kit可溶性CD38(sCD38)ELISA試劑盒
釀酒酵母磷化髓樣白血病-1抗體Human IRS2(Insulin receptor substRate 2) ELISA Kit可溶性CD30配體(sCD30L)ELISA試劑盒
平菇磷化雙微體2癌基因抗體Human SLC8A1(Sodium/calcium exchanger 1) ELISA Kit可溶性CD28(sCD28)ELISA試劑盒
芽枝狀枝孢磷化肌增強(qiáng)因子2抗體Human ESRRG(Estrogen-related receptor gamma) ELISA Kit可溶性CD276分子(sCD276/sB7-H3)ELISA試劑盒
小馬勃磷化肌增強(qiáng)因子2抗體Human SLC11A2(Natural resistance-associated macrophage protein 2) ELISA Kit可溶性CD21(CR2/sCD21)ELISA試劑盒
溶藻弧菌磷化絲裂原活化蛋白激激1抗體Human INTS3(IntegRator complex subunit 3) ELISA Kit可溶性CD163分子(sCD163)ELISA試劑盒
蟬花*磷化微管相關(guān)蛋白2抗體Human GLUD1(Glutamate dehydrogenase 1, mitochondrial) ELISA Kit可溶性CD146分子(sCD146)ELISA試劑盒
哈茨木霉絲裂原活化蛋白激活化的蛋白激2抗體Human GPX1(Glutathione peroxidase 1) ELISA Kit可溶性CD14(sCD14)ELISA試劑盒
閃光須霉磷化絲裂原活化蛋白激活化的蛋白激2抗體Human LPO(Lactoperoxidase) ELISA Kit可溶性CD105(sCD105)ELISA試劑盒
腸炎沙門(mén)氏菌磷化絲裂原活化蛋白激活化的蛋白激2抗體Human GLUD1(Glutamate dehydrogenase 1, mitochondrial) ELISA Kit可溶性CD100(sCD100)ELISA試劑盒
海科貝特氏菌Cobetia│marina 質(zhì)量規(guī)格:95%,BR齊墩果
白地霉Geotrichum│candidum 質(zhì)量規(guī)格:1:3000,BR青藤堿
大腸埃希氏菌DH5α/797(797-PknB)Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格:≥50 U/mg,sigma 原裝雙氫
廣譜caspase抑制劑(Q-VD-OPh)聚乙烯樹(shù)脂
其他二乙烯基與乙烯的共聚物;芳族的合成吸附劑;色譜載體;鉻姆沙伯102;乙烯-二乙烯共聚物;乙烯-二乙烯基共聚物;StratoSpheres™ PL-PS/DVB樹(shù)脂;聚(乙烯-co-二乙烯基);聚乙烯交聯(lián)二乙烯;聚乙烯樹(shù)脂交聯(lián)
英文名稱(chēng):Polystyrene resin
其他英文名稱(chēng):Chromosorb 102;Poly(styrene-divinylbenzene) cross-linked;StratoSpheres™ PL-PS/DVB resin;Styrene-divinylbenzene Copolymer;Poly(styrene-co-divinylbenzene)
產(chǎn)品規(guī)格:BR
包裝:100克
CAS號(hào):9003-70-7
級(jí)別:BR
用途:生化研究。多肽合成用樹(shù)脂
提醒事項(xiàng):訂購(gòu)請(qǐng)告知取代度(即基團(tuán)載量)、顆粒度(所需目數(shù))、膠聯(lián)度(DVB,以百分比表示)