操作規(guī)程:
1、在96孔板加入細(xì)胞00μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升5000~0000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及00%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×00
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時(shí)的藥物濃度(IC90)
中文名稱(chēng):ERK1和ERK2活性抑制劑(SCH772984)
英文名稱(chēng):SCH772984 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg SCH772984有效抑制ERK1和ERK2活性,IC50分別為4和1nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):942183-80-4 純度:98.06% 分子量:587.67 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
注意事項(xiàng):
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開(kāi)蓋時(shí)試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長(zhǎng)時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會(huì)增加空白吸收,從而影響檢測(cè)結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來(lái)配制待檢測(cè)藥物。如果待測(cè)藥物有還原性,則測(cè)定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測(cè)藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對(duì)較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測(cè)。
9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長(zhǎng)短根據(jù)細(xì)胞的類(lèi)型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定,對(duì)于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長(zhǎng)時(shí)間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測(cè),MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
楊奇青霉1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框84抗體Human NPYR5(Neuropeptide Y Receptor Y5) ELISA Kit人腎上腺髓質(zhì)(ADM)免疫試劑盒
沙諾氏芽孢桿菌E3泛蛋白連接CHIP蛋白抗體Human NRG-3(Neuregulin 3) ELISA Kit人腎上腺能a1A受體(ADRA1A)免疫試劑盒
幼角鐮孢肉堿O-乙?;D(zhuǎn)移Human OVA sIgE(Ovalbumin Specific IgE) ELISA Kit人腎上腺(EPI)免疫試劑盒
黑色附球霉5號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框45抗體Human OVA sIgG(Ovalbumin Specific IgG) ELISA Kit人腎上腺皮質(zhì)抗體(ACA)免疫試劑盒
大腸埃希菌5號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框48抗體Human OXA(Orexin A) ELISA Kit人蛋白(nephrin)免疫試劑盒
雅致枝霉6號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框136抗體Human NRG-4(Neuregulin 4) ELISA Kit人腎(RNLS/MAO-C)免疫試劑盒
谷棒桿菌6號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框138抗體Human PCIII(Procollagen III) ELISA Kit人神經(jīng)軸突絲蛋白(NAFP)自身抗體免疫試劑盒
季也蒙邁耶氏酵母6號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框145抗體Human PCI(Protein C Inhibitor) ELISA Kit人神經(jīng)元凋亡抑制蛋白(NAIP)免疫試劑盒
大孔菌CD39抗體Human PDIA5(Protein Disulfide Isomerase A5) ELISA Kit人神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子3(NT-3)免疫試劑盒
嗜麥芽寡養(yǎng)單胞菌6號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框106抗體Human PDIA6(Protein Disulfide Isomerase A6) ELISA Kit人神經(jīng)型一氧化氮合成(nNOS)免疫試劑盒
黃色糖多孢菌6號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框115抗體Human PDK4(Pyruvate Dehydrogenase Kinase Isozyme 4) ELISA Kit人神經(jīng)粘著分子(NRCAM)免疫試劑盒
居真菌細(xì)菌屬6號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框123抗體Human PCNA(ProlifeRating Cell Nuclear Antigen) ELISA Kit人神經(jīng)粘附分子配體1(NCAM-L1/CD171)免疫試劑盒
少根根霉6號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框129抗體Human PDP(Pyruvate Dehydrogenase Phosphatase) ELISA Kit人神經(jīng)特異性烯化(NSE)免疫試劑盒
纖維單胞菌6號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框129抗體Human NT-ProANP(N-Terminal Pro Atrial Natriuretic Peptide) ELISA Kit人神經(jīng)肽Nesfatin-1 免疫試劑盒
金黃桿菌6號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框132抗體Human PEX2(Peroxisomal Biogenesis Factor 2) ELISA Kit人神經(jīng)絲蛋白M(NF-M)免疫試劑盒
孔狀短小莖點(diǎn)霉磷化鈣調(diào)磷B亞基B1抗體Human PCPE1(Procollagen C Proteinase Enhancer 1) ELISA Kit人神經(jīng)絲蛋白L(NF-L)免疫試劑盒
海桿菌Marinobacter│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRCD147分子試劑盒大黃葡萄糖苷
小盾殼霉Coniothyrium│minitans 質(zhì)量規(guī)格:>99%,標(biāo)準(zhǔn)品CD146分子試劑盒
: NRRLB-12526資源名稱(chēng): 運(yùn)動(dòng)發(fā)酵單胞菌 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRCD134分子試劑盒多舌飛蓬苷
ERK1和ERK2活性抑制劑(SCH772984)偶氮氯膦mA
其他2-(4-氯-2-膦基偶氮)-7-(3-乙?;嫉?-1,8-二羥基萘-3,6-二磺
英文名稱(chēng):CPA-mA
其他英文名稱(chēng):Chlorophosphonazo mA
產(chǎn)品規(guī)格:顯色劑
包裝:1克
CAS號(hào):86167-87-5
C24H18C1N4O12PS2=684.98
級(jí)別:顯色劑
對(duì)稀土金屬靈敏度試驗(yàn):合格
比耳定律試驗(yàn):合格
水溶解試驗(yàn):合格
性狀:深紫紅色結(jié)晶性粉末。易溶于水,在中性和性溶液中呈紫紅色
保存:RT