培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
產(chǎn)品屬于:
商品介紹:
用途:
經(jīng)典膠原纖維染色,可區(qū)分膠原纖維和肌纖維。
注意事項(xiàng):
染核后能更容易區(qū)分膠原纖維和肌纖維,本試劑盒采用經(jīng)典的Weigert蘇木素。其結(jié)果為:膠原纖維呈藍(lán)色,胞核呈藍(lán)褐色肌纖維、紅細(xì)胞等呈紅色。
儲存條件:室溫,避光,12個(gè)月
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
表告依春(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 1-Beta-D-Arabinofuranosylcytosine HClIQCF1蛋白抗體包裝5g
表戈米辛O(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 1-Beta-D-Arabinofuranosylcytosine HClIQCJ蛋白抗體包裝1g
表沒食子兒茶(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Manidipine Dihydrochlorid抑制結(jié)合蛋白抗體包裝25g
表沒食子兒茶沒食子酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Manidipine Dihydrochlorid免疫球蛋白超家族成員3抗體包裝5g
表木栓(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Stanolone/Androstanolone免疫球蛋白超家族成員6抗體包裝1g
表小檗堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Doramectin免疫球蛋白超家族成員9抗體包裝1g
別隱品堿;A-別隱品堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 3,3',5'-Triiodo-L-thyronine免疫球蛋白超家族成員10抗體包裝5g
濱蒿內(nèi)酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Corylifol A大腦和特異性免疫球蛋白超家族成員11抗體包裝1g
檳榔(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Bromfenac sodium干擾α受體抗體包裝25g
檳榔花(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Bromfenac sodium磷化干擾α受體抗體包裝5g
波棱瓜子(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Flupenthixol dihydrochloride磷化胰島受體β抗體包裝1g
波棱英文名稱: Tea polyphenol核因子κB抑制蛋白E抗體包裝5g
博落回(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Tetrahydrocurcumin磷化整合β4抗體包裝1g
薄荷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Tubuloside A磷化整合β4抗體包裝10MG
補(bǔ)骨脂(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 2'-AcetylacteosideIQCD蛋白抗體包裝100g
伯克霍爾德氏菌Burkholderia│sp. 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品醌NADH脫氫1試劑盒葫蘆巴堿;Trigonelline
魯錐梗孢Dissoconium│luensis G.Y. Sun X.R.Zhai& Rong Zhang 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR跨膜結(jié)構(gòu)域4亞家族成員11試劑盒紅花八角;Dunnianol
黑曲霉Aspergillus│niger 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品空泡相關(guān)蛋白A試劑盒紅松內(nèi)酯;Pinusolide
Masson三色染色液(固綠法)羧甲
其他 羧甲基淀粉鈉;淀粉甘鈉;淀粉羧甲基醚鈉鹽;淀粉乙鈉;速崩王;羥基乙淀粉鈉
英文名稱: CMS
其他英文名稱: Sodium starch glycolate;Sodium carboxymethyl starch;Sodium carboxyl methylstarch
產(chǎn)品規(guī)格: BR
包 裝: 500克
CAS號:9063-38-1
級別:BR
PH:5.5~7.5
干燥失重:≤10.0%
重金屬:≤2ppm
鐵鹽:≤0.002%
性狀:或黃色粉末,無臭、無味、無毒、熱易吸潮。溶于水形成膠體狀溶液,對光、熱穩(wěn)定。不溶于乙、等有機(jī)溶劑。 其水溶液具有良好的粘性、穩(wěn)定性、保護(hù)膠體性和成膜性,不易變霉,在大堿性和弱性 條件下穩(wěn)定,在強(qiáng)條件下將產(chǎn)生沉淀。 <br>水溶液在堿中較穩(wěn)定,在中較差,生成不溶于水的游離,粘度降低,因此不適用于強(qiáng)性食品。水溶液在80℃以上長時(shí)間加熱,則粘度降低。
用途:生化研究。與羧甲基纖維(CMC)有相似的性能,具有增稠、懸浮、分散、乳化、粘結(jié)、保水、保護(hù)膠體等多種性能
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