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膠原酶III型

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更新時間:2022-04-20 14:34:31瀏覽次數(shù):273

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 100mg
貨號 FS-X9753 應用領域 化工
主要用途 公司產(chǎn)品僅用于科研    
膠原酶III型公司*的商品:小鼠α葡萄糖苷蒲公英甾(標準品)Human, Mouse, Rat
人腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅰ蒲公英甾乙酯(標準品)Human
大鼠鈣/鈣調依賴性蛋白激2蒲黃(標準品)Human, Mouse
小鼠蒲葵子(標準品)Human, Mouse, Rat
人轉化生長因子β1七葉膽苷XVII(標準品)Human
大鼠肝脂七葉皂苷AHuman
人轉化生長因子α七葉皂苷BHu

詳細介紹

產(chǎn)品屬于:

中文名稱

英文名稱

產(chǎn)品規(guī)格

發(fā)貨周期

膠原酶III型

Collagenase III

100mg

1~3天

商品介紹:

本品為III型膠原酶,≥100 U/mg solid,常用于乳腺細胞和胎兒細胞的制備。

本品來源于溶組織梭菌(Clostridium histolyticum),是一種酶粗提物,不僅含有膠原酶(更準確的稱法為梭菌蛋白酶A(clostridiopeptidase A)),能夠降解天然膠原和網(wǎng)狀纖維。還含有其他的一些蛋白酶、多糖酶、脂酶等,分別能夠有效水解結締組織和上皮組織細胞外基質內(nèi)的其他蛋白,多糖和脂質,使得本品非常適用于組織消化。


膠原酶(Collagenase)是一種蛋白酶,一種肽鏈內(nèi)切酶,能夠特異性的識別Pro-X-Gly-Pro序列(該序列高頻率出現(xiàn)在膠原中,很少發(fā)現(xiàn)于其他蛋白中)并切割該序列中性氨基酸(X)和甘氨酸(Gly)之間的肽鍵。許多蛋白酶都能水解單鏈且變性的膠原多肽,但膠原酶是一種可以降解具有三股超螺旋結構的天然膠原纖維的蛋白酶,這種膠原纖維廣泛存在結締組織內(nèi)。

目前商業(yè)化提供的細菌膠原酶主要根據(jù)膠原酶活性的差異,分為四種類型:膠原酶I型,II型,III型和IV型,在應用上有所偏向:

1)膠原酶I(Type I Collagenase):含有比較均勻的各種酶活力(包括膠原酶、酪蛋白酶、梭菌蛋白酶、胰蛋白酶活性)。通常用作上皮細胞、肝、肺、脂肪和腎上腺組織細胞的制備;

2)膠原酶II(Type II Collagenase):含有更高的梭菌蛋白酶活性,通常用于心臟、骨、肌肉、胸腺和軟骨等組織來源細胞的制備;

3)膠原酶III(Type III Collagenase):含有較低的蛋白酶活性,常用于乳腺細胞的制備;

4)膠原酶IV(Type IV Collagenase):含有低胰酶活性,通常用于胰島細胞的制備,或者需要維持受體完整性的細胞制備實驗。

分子量:68-130 kDa

激活劑:Ca2+、Zn2+

抑制劑:EDTA, EGTA,Cysteine, histidine, 2-mercaptoethanol, o-phenanthroline DTT, Hg2+, Pb2+, Cd2+, Cu2+, Zn2+, Not inhibited by DFP or serum

活力單位:在37℃,pH7.5 的條件下,5h內(nèi)水解膠原產(chǎn)生相當于1μM L-亮氨酸的酶量定義為1個酶活力單位。

儲存條件:4℃避光,有效期兩年
培養(yǎng)操作步驟:

1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;

4.將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;

5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

洛莫司?。藴势罚┯⑽拿Q: Adenosine-5'-diphosphate disodium salt(ADPna)CD8抗體包裝1g

洛匹那韋(標準品)英文名稱: Adenosine 5'-(trihydrogen diphosphate)/ADP表面趨化因子受體2抗體包裝100g

洛索洛芬鈉(標準品)英文名稱: Saxagliptin monohydrate胱抑B/半胱蛋白抑制劑B抗體包裝25g

麻保沙星;馬波沙星(標準品)英文名稱: Ganciclovir趨化樣蛋白抗體包裝5g

馬來地平(標準品)英文名稱: Ganciclovir角蛋白20抗體包裝100g

馬來吡汀(標準品)英文名稱: 5,6-Dimethoxy-1-indanone鈣激活的中性蛋白2抗體包裝25g

馬來伏沙明(標準品)英文名稱: PaeoniflorinCD45RO抗體包裝100g

馬來桂哌齊特(標準品)英文名稱: Paeoniflorin嗜中性??乖瑿D177抗體包裝25g

馬來那敏/撲爾敏(標準品)英文名稱: Paeoniflorin鈣整合結合蛋白1抗體包裝5g

馬來曲美布汀(標準品)英文名稱: Paeoniflorin21號染色體開放閱讀框7抗體包裝100g

馬來噻嗎洛爾(標準品)英文名稱: Paeoniflorin磷化巨噬集落激因子受體抗體包裝25g

馬來替加色羅(標準品)英文名稱: 5-Hydroxytryptophan磷化巨噬集落激因子受體抗體包裝5g

馬來溴那敏(標準品)英文名稱: 5-HTP磷化巨噬集落激因子受體抗體包裝1g

馬來依那普利(標準品)英文名稱: Rivastigmine tartrate磷化巨噬集落激因子受體抗體包裝5g

嗎多明(標準品)英文名稱: Rivastigmine tartrate磷化巨噬集落激因子受體抗體包裝25g

小單孢菌Micromonospora│sp. 質量規(guī)格:>98.5%,USP色c氧化亞基5A,線粒體試劑盒土荊皮乙;Pseudolaric Ac

馬爾他布魯氏菌 生物Ⅰ型Brucella│melitensis BiovarⅠ 質量規(guī)格:HPLC>99%,標準品色c氧化Ⅵα亞基多肽1試劑盒塔拉薩敏;Talatisamine

: =LMG27494T=CGMCC1.12516T資源名稱: 芽孢八疊球菌 質量規(guī)格:>98%,BR,可用于培養(yǎng)色C氧化試劑盒天麻;Gastrodin
膠原酶III型亞磷三乙酯

其他 三乙基亞磷酯;三乙氧基膦

英文名稱: Triethyl phosphite

其他英文名稱: Phosphorous acid triethyl ester

產(chǎn)品規(guī)格: AR,98%

包  裝: 100毫升

CAS號:122-52-1

C6H15O3P=166.16

級別:AR

含量:≥98%

折光率:1.412~1.414

性狀:無色液體。對濕敏感。能與乙、 、混溶,不溶于水。相對密度0.9687。沸點 156.6℃。閃點 54℃。易燃。 有刺激性

用途:生化研究。有機合成。增塑劑。穩(wěn)定劑。潤滑油脂的添加劑。

保存:RT

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

 


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