膠原酶III型

膠原酶III型公司*的商品：小鼠α葡萄糖苷蒲公英甾(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat
人腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅰ蒲公英甾乙酯（標(biāo)準(zhǔn)品）Human
大鼠鈣/鈣調(diào)依賴性蛋白激2蒲黃（標(biāo)準(zhǔn)品）Human, Mouse
小鼠蒲葵子（標(biāo)準(zhǔn)品）Human, Mouse, Rat
人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1七葉膽苷XVII(標(biāo)準(zhǔn)品)Human
大鼠肝脂七葉皂苷AHuman
人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子α七葉皂苷BHu

產(chǎn)品屬于：

商品介紹：

膠原酶（Collagenase）是一種蛋白酶，一種肽鏈內(nèi)切酶，能夠特異性的識(shí)別Pro-X-Gly-Pro序列（該序列高頻率出現(xiàn)在膠原中，很少發(fā)現(xiàn)于其他蛋白中）并切割該序列中性氨基酸（X）和甘氨酸（Gly）之間的肽鍵。許多蛋白酶都能水解單鏈且變性的膠原多肽，但膠原酶是一種可以降解具有三股超螺旋結(jié)構(gòu)的天然膠原纖維的蛋白酶，這種膠原纖維廣泛存在結(jié)締組織內(nèi)。

目前商業(yè)化提供的細(xì)菌膠原酶主要根據(jù)膠原酶活性的差異，分為四種類型：膠原酶I型，II型，III型和IV型，在應(yīng)用上有所偏向：

1）膠原酶I（Type I Collagenase）：含有比較均勻的各種酶活力（包括膠原酶、酪蛋白酶、梭菌蛋白酶、胰蛋白酶活性）。通常用作上皮細(xì)胞、肝、肺、脂肪和腎上腺組織細(xì)胞的制備；

2）膠原酶II（Type II Collagenase）：含有更高的梭菌蛋白酶活性，通常用于心臟、骨、肌肉、胸腺和軟骨等組織來(lái)源細(xì)胞的制備；

3）膠原酶III（Type III Collagenase）：含有較低的蛋白酶活性，常用于乳腺細(xì)胞的制備；

4）膠原酶IV（Type IV Collagenase）：含有低胰酶活性，通常用于胰島細(xì)胞的制備，或者需要維持受體完整性的細(xì)胞制備實(shí)驗(yàn)。

分子量：68-130 kDa

激活劑：Ca2+、Zn2+

抑制劑：EDTA, EGTA,Cysteine, histidine, 2-mercaptoethanol, o-phenanthroline DTT, Hg2+, Pb2+, Cd2+, Cu2+, Zn2+, Not inhibited by DFP or serum

活力單位：在37℃，pH7.5 的條件下，5h內(nèi)水解膠原產(chǎn)生相當(dāng)于1μM L-亮氨酸的酶量定義為1個(gè)酶活力單位。

儲(chǔ)存條件：4℃避光，有效期兩年
培養(yǎng)操作步驟：

1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）；

3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí)；

4．將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；

5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí)，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。

洛莫司汀（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Adenosine-5'-diphosphate disodium salt(ADPna)CD8抗體包裝1g

洛匹那韋（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Adenosine 5'-(trihydrogen diphosphate)/ADP表面趨化因子受體2抗體包裝100g

洛索洛芬鈉（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Saxagliptin monohydrate胱抑B/半胱蛋白抑制劑B抗體包裝25g

麻保沙星;馬波沙星(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Ganciclovir趨化樣蛋白抗體包裝5g

馬來(lái)地平（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Ganciclovir角蛋白20抗體包裝100g

馬來(lái)吡汀(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： 5,6-Dimethoxy-1-indanone鈣激活的中性蛋白2抗體包裝25g

馬來(lái)伏沙明（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： PaeoniflorinCD45RO抗體包裝100g

馬來(lái)桂哌齊特(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Paeoniflorin嗜中性?？乖瑿D177抗體包裝25g

馬來(lái)那敏/撲爾敏(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Paeoniflorin鈣整合結(jié)合蛋白1抗體包裝5g

馬來(lái)曲美布汀（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Paeoniflorin21號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框7抗體包裝100g

馬來(lái)噻嗎洛爾（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Paeoniflorin磷化巨噬集落激因子受體抗體包裝25g

馬來(lái)替加色羅（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： 5-Hydroxytryptophan磷化巨噬集落激因子受體抗體包裝5g

馬來(lái)溴那敏(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： 5-HTP磷化巨噬集落激因子受體抗體包裝1g

馬來(lái)依那普利（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Rivastigmine tartrate磷化巨噬集落激因子受體抗體包裝5g

嗎多明（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Rivastigmine tartrate磷化巨噬集落激因子受體抗體包裝25g

小單孢菌Micromonospora│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,USP色c氧化亞基5A,線粒體試劑盒土荊皮乙;Pseudolaric Ac

馬爾他布魯氏菌 生物Ⅰ型Brucella│melitensis BiovarⅠ 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品色c氧化Ⅵα亞基多肽1試劑盒塔拉薩敏;Talatisamine

: =LMG27494T=CGMCC1.12516T資源名稱: 芽孢八疊球菌 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR,可用于培養(yǎng)色C氧化試劑盒天麻;Gastrodin
膠原酶III型亞磷三乙酯

其他 三乙基亞磷酯；三乙氧基膦

英文名稱： Triethyl phosphite

其他英文名稱： Phosphorous acid triethyl ester

產(chǎn)品規(guī)格： AR，98%

包　　裝： 100毫升

CAS號(hào)：122-52-1

C6H15O3P=166.16

級(jí)別：AR

含量：≥98%

折光率：1.412～1.414

性狀：無(wú)色液體。對(duì)濕敏感。能與乙、 、混溶，不溶于水。相對(duì)密度0.9687。沸點(diǎn) 156.6℃。閃點(diǎn) 54℃。易燃。 有刺激性

用途：生化研究。有機(jī)合成。增塑劑。穩(wěn)定劑。潤(rùn)滑油脂的添加劑。

保存：RT

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。