中文名稱:Hoechst 33342/PI雙染試劑盒
英文名稱:Apoptotic Cell Hoechst 33342/PI Detection Kit
產(chǎn)品規(guī)格:100T
發(fā)貨周期:1~3天
熒光染料Hoechst33342 能少許進(jìn)入正常細(xì)胞膜,使其染上低藍(lán)色,而凋亡細(xì)胞的膜通透性增強(qiáng),因此進(jìn)入凋亡細(xì)胞中的Hoechst33342 比正常細(xì)胞的多,熒光強(qiáng)度要比正常細(xì)胞中要高,此外,凋亡細(xì)胞的染色體DNA 的結(jié)構(gòu)發(fā)生了改變從而使該染料能更有效地與DNA 結(jié)合,并且凋亡細(xì)胞膜上的p-糖蛋白泵功能受到損傷不能有效地將Hoechst33342 排出到細(xì)胞外使之在細(xì)胞內(nèi)積累增加等都使凋亡細(xì)胞的藍(lán)色熒光增強(qiáng)。而PI 染料是不能進(jìn)入細(xì)胞膜完整的正常細(xì)胞和凋亡細(xì)胞中,即活細(xì)胞對(duì)PI 染料拒染,而壞死細(xì)胞由于膜完整性在早期即已破損,可被PI 染料染色。 |
用Hoechst33342 結(jié)合PI 染料對(duì)凋亡細(xì)胞進(jìn)行雙染色,就可在流式細(xì)胞儀上將正常細(xì)胞、凋亡細(xì)胞和壞死細(xì)胞區(qū)別開來。在雙變量流式細(xì)胞儀的散點(diǎn)圖上,這三群細(xì)胞表現(xiàn)分別為:正常細(xì)胞為低藍(lán)色/低紅色(Hoechst33342+/PI+),凋亡細(xì)胞為高藍(lán)色/低紅色(Hoechst33342++/PI+),壞死細(xì)胞為低藍(lán)色/高紅色(Hoechst33342+/PI++)
儲(chǔ)存:2-8℃,避光,有效期一年。
注意事項(xiàng):
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時(shí)試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會(huì)增加空白吸收,從而影響檢測結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性,則測定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對(duì)較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測。
9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定,對(duì)于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長時(shí)間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測,MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
操作規(guī)程:
1、在96孔板加入細(xì)胞00μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升5000~0000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及00%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×00
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時(shí)的藥物濃度(IC90)
楤木皂苷A英文名稱: Amikacin成纖維生長因子受體2抗體包裝1g
粗葉懸鉤子甙英文名稱: Aminophyllin hydrate成纖維生長因子受體4抗體包裝5g
醋辛酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ammonium bismuth citrate, hydrate凝血原(纖維介)抗體包裝1g
大波斯菊苷,芹菜-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(標(biāo)準(zhǔn)...英文名稱: Ammonium bromide衰老關(guān)鍵蛋白抗體包裝25ml
大車前苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ammonium iodide凋亡調(diào)節(jié)基因之一抗體包裝5ml
大豆苷,黃豆苷 (標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ammonium iron(II) sulfate, hexahydrate凋亡調(diào)節(jié)基因之一抗體(短型)包裝25ml
大豆,黃豆苷元(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ammonium molybdate, tetrahydrate纖維連接蛋白抗體包裝5ml
大風(fēng)子(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ammonium phosphomolybdate , hydrateFosB蛋白抗體包裝250mg
大腹皮(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ammonium sodium phosphateFRA2/FOSL2抗體包裝1g
大果木姜子(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ammonium succinate叉頭蛋白P3抗體包裝5g
大紅袍(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ammonium thiosulfate成纖維生長因子8抗體包裝50mg
大黃(掌葉大黃)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Amprolium hydrochloride肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白Fascin抗體包裝25g
大黃(藥用大黃)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Antimony (III) oxide線粒體裂變1蛋白抗體包裝5g
大黃酚(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Azomethine-H monosodium salt叉頭蛋白P1抗體包裝25g
大黃酚-8-O-葡萄糖苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Azure C鼠疫F1蛋白/鼠疫耶爾森氏菌莢膜抗原F1單克抗體包裝5g
束梗鏈格孢(犁黑斑病菌)Alternaria│bokurai 質(zhì)量規(guī)格:進(jìn)口原裝Santa,99%腎試劑盒去基川陳皮;Demethylnobi
黃孢原毛平革菌Phanerochaete│chrysosporium 質(zhì)量規(guī)格:含量98.0%~100.5%神經(jīng)軸突絲蛋白試劑盒芹菜-7-O-β-D-葡萄糖苷;Api
#擬雙輪絲鏈輪絲菌Streptoverticillium│biverticillatopsis Yan et al. 質(zhì)量規(guī)格:>99%神經(jīng)元凋亡抑制蛋白試劑盒芹菜-7-O-葡萄糖苷;Apige
Hoechst 33342/PI雙染試劑盒戊二酐
其他 膠酐;戊二酐
英文名稱: Glutaric anhydride
其他英文名稱: Dihydro-2H-pyran-2,6(3H)-dione
產(chǎn)品規(guī)格: BR,98%
包 裝: 25克/100克/500克
CAS號(hào):108-55-4
C5H6O3=114.10
級(jí)別:BR
含量:≥98.0%
熔點(diǎn):55~58℃
水分:≤0.1%
性狀:至微黃色固體。可溶于乙、、、甲和四氫呋喃。吸水后轉(zhuǎn)化為戊二。沸點(diǎn)290℃,密度1.429,閃點(diǎn)173℃。
用途:生化研究。用于塑料、橡膠、樹脂等的和酰胺的制備。
保存:RT