詳細(xì)介紹
組成及試劑配制:
1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
50次 | FS-P013419 |
使用方法:
一、稀釋PCR陽性對照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例) 1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對照。 2. 標(biāo)記6個離心管,分別為7,6,5,4,3,2。 3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。 4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。 5. 換槍頭,在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。 6. 換槍頭,在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。 7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。 | 二、樣品DNA的制備 8. 如果有N個樣品,必須設(shè)置N+2個提取, 多出的一個是PC(樣品制備陽性對照), 一個是NC(樣品制備陰性對照)。 可以用10μL上步制備的PCR陽性對照的第4號(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于1萬拷貝)或第5號(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。 9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒。 | 三、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,在樣品制備室進(jìn)行) 10. 如果只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個PCR管,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,1個用于PCR陰性對照,6個用于PCR陽性對照。如果做2-3次重復(fù),則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。 11. 產(chǎn)品僅用于科研在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加)
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實驗外包:
1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學(xué)分析
2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測:Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細(xì)胞分選
7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR
8.細(xì)胞及動物模型:原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動物模型構(gòu)建
IL-13Ra2/FITC 熒光標(biāo)記白細(xì)胞介-13受體a2抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Survivin/RBITC 紅色熒光羅丹明標(biāo)記 Survivin 蛋白抗體(標(biāo)記抗體)Multi-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh API2 凋亡抑制因子2抗體 0.2ml
Rabbit rat IgM/PE-Cy7 PE-Cy7標(biāo)記的兔抗大鼠IgM 0.1ml
GTDC1 糖基轉(zhuǎn)移樣1抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit human sIgA/Bio 生物標(biāo)記的兔抗人分泌型IgA 0.1ml
Survivin/RBITC 紅色熒光羅丹明標(biāo)記 Survivin 蛋白抗體(標(biāo)記抗體)Multi-class antibodies: 0.2ml
LHRH(Human Luteinizing Hormone-Releasing Hormone) ELISA Kit 人黃體生成釋放Multi-class antibodies: 48T
LH 促黃體生成抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rhesus antibody Rh KLK5 激肽釋放5抗體 0.1ml
ADRA1A(Human adrenergic alpha-1A receptor) ELISA Kit 人能a1A受體 96T
PYK2 富含脯的酪激2抗體 0.1ml
Calsequestrin 肌鈣集蛋白/收鈣抗體 0.2ml
LH 促黃體生成抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rabbit mouse Kappa light chain/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標(biāo)記的兔抗小鼠k鏈 0.1ml
Grpa 半乳糖凝集相關(guān)蛋白A抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh AP2M1/AP-2 接頭相關(guān)蛋白復(fù)合體AP-2μ鏈1抗體 0.2ml
IL-18R Alpha/FITC 熒光標(biāo)記白細(xì)胞介-18受體α鏈抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit human IgM/Bio 生物標(biāo)記的兔抗人IgM 0.3ml
Phospho-Raptor (Ser792) /FITC 熒光標(biāo)記磷化mTOR相關(guān)調(diào)控蛋白抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
非洲馬瘟病毒探針法熒光定量RT-PCR試劑盒米黑根毛霉種屬: Rhizomucormiehei安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 產(chǎn)凝乳培養(yǎng)基: 17生長條件: 37℃
泛養(yǎng)副球菌種屬: Paracoccus pantotrophus分離基物: 廢物處理廠荷蘭提供形式: 凍干粉安全等級: 1模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 模式菌株培養(yǎng)基: 128生長條件: 30℃
山夫登堡沙門氏菌種屬: Salmonella│senftenberg提供形式: 凍干物安全等級: 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 1,3,19 g,s,t -培養(yǎng)基: CM0051生長條件: 37℃存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
太平洋海棲菌種屬: Oceanicola│pacificus分離基物: 沉積物/深海沉積物提供形式: 凍干物模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 模式菌株;潛在的有機(jī)污染物降解菌/分離自多環(huán)芳烴(PAHs)芘富集菌群培養(yǎng)基: 471生長條件: 25℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
透明質(zhì)蛋白聚糖連結(jié)蛋白1(HAPLN1)ELISA試劑盒對二甲 for HPLC, ≥99%印刷標(biāo)簽,用于100G(ML)包裝,尺寸:94mm*55mm鹽阿
透明質(zhì)(HA)ELISA試劑盒黃苷-5'-單鈉 98%印刷標(biāo)簽,用于500G(ML)及以上包裝,尺寸: 105mm*86mm磺氨地平(絡(luò)活喜、安洛地)
銅鋅-過氧化物岐化(SOD1)ELISA試劑盒化鐿(III),六 99.9% metals basis印刷標(biāo)簽,超大號, 95mm*210mm磺氨地平(標(biāo)準(zhǔn)品)
銅藍(lán)蛋白(CP/CER)ELISA試劑盒鉬鋅 99.9%印刷標(biāo)簽,大號,尺寸: 62mm*150mm鹽阿莫羅芬/鹽阿莫洛芬
同源框A3(HOXA3)ELISA試劑盒氫氧化鋯 97%印刷標(biāo)簽,中號, 42mm*98mm鹽阿莫羅芬/鹽阿莫洛芬 (標(biāo)準(zhǔn)品)
同型半胱氨(Hcy)ELISA試劑盒N-芐氧羰基乙二鹽鹽 98%印刷標(biāo)簽,小號, 25mm*100mm氨芐西林鈉/氨芐青霉鈉
鐵調(diào)25(Hepc25)ELISA試劑盒高鋅,六 試劑級印刷標(biāo)簽,超小號,尺寸: 18mm*100mm氨芐西林鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)
鐵調(diào)(Hepc)ELISA試劑盒玉米核苷 97%21mm空白小標(biāo)簽 21mm扁桃苷/苦杏仁苷
鐵-過氧化物岐化(Fe-SOD)ELISA試劑盒N-α-芐氧羰基-L-2,4-二氨基丁 99%阿拉丁小標(biāo)簽 125mm*32mm扁桃苷/苦杏仁苷(標(biāo)準(zhǔn)品)
鐵蛋白重鏈(FTH)ELISA試劑盒酵母聚糖 A阿拉丁大標(biāo)簽 160mm*60mm阿尼芬凈
鐵蛋白(Ferritin)ELISA試劑盒乙 >99.5%(GC)有發(fā)票此處開封 標(biāo)簽 140*20mm安絲菌P-3(束絲放線菌)
鐵蛋白(FE)ELISA試劑盒乙 AR,99.0%內(nèi)有貨單此處開封 標(biāo)簽 140*20mm抗霉 A
調(diào)寧蛋白1(CNN1)ELISA試劑盒乙 99.5%易碎物品 標(biāo)簽 150*120mm阿瑞吡坦;阿瑞匹坦
天青殺/肝結(jié)合蛋白(AZU/HBP)ELISA試劑盒乙 99%L-乳鈣 USP級泰諾福韋;替諾福韋
天青殺(AZU)ELISA試劑盒乙 standard for GC, ≥99.5% (GC)(-)-乳乙酯 98%泰諾福韋;替諾福韋(標(biāo)準(zhǔn)品)
天門冬氨酰-tRNA合成(DARS)ELISA試劑盒2-乙?;? 98%(-)-乳乙酯 99%氫檳榔; 檳榔氫鹽(國產(chǎn))
PCR實驗步驟:
①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1ml試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。