詳細(xì)介紹
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:鸚鵡熱衣原體探針法熒光定量PCR試劑盒
產(chǎn)品貨號:FS-P013421
產(chǎn)品規(guī)格: 50次
產(chǎn)品分類:純化試劑盒
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
實驗過程:
一、試劑準(zhǔn)備 1. DNA模板 2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 二、操作步驟 1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。 2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。 3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。 |
注意事項
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實驗服、儀器、耗材應(yīng)獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機(jī)檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在第一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨存放。
6.為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7.儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
LILRB3/CD85a/PirB/FITC 熒光標(biāo)記白細(xì)胞球蛋白樣受體-B抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Survivin/FITC 綠色熒光標(biāo)記Survivin蛋白抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh ADRA2 ADRA2腎上腺能受體2抗體 0.1ml
Rabbit Goat IgM/FITC FITC標(biāo)記的兔抗羊IgM 0.3ml
GRASP 一般受體磷肌醇相關(guān)支架蛋白1抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit dog IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標(biāo)記的兔抗狗IgG 0.1ml
Survivin/FITC 綠色熒光標(biāo)記Survivin蛋白抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
GPI(Human glycophosphatidylinositol) ELISA Kit 人糖磷脂酰肌醇Multi-class antibodies: 48T
Matriptase 蛋白裂解(一種新的癌基因)抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rhesus antibody Rh katanin p80 劍蛋白p80抗體 0.2ml
ADP ELISA Kit 大鼠脂聯(lián) 96T
PYGL 肝糖原磷化抗體 0.2ml
CYP2C9 細(xì)胞色P450 2C9抗體 0.1ml
Matriptase 蛋白裂解(一種新的癌基因)抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rabbit mouse Kappa light chain/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標(biāo)記的兔抗小鼠k鏈 0.1ml
GABA Transporter 3 γ基丁運載蛋白3抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh APAF1(NT) 凋亡蛋白活性因子-1抗體(N端) 0.1ml
IL-17E/IL-25/FITC 熒光標(biāo)記白介-17E抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit human IgM/Cy5 Cy5標(biāo)記的兔抗人IgM 0.1ml
RAR- Alpha /FITC 熒光標(biāo)記維甲受體-α 抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
鸚鵡熱衣原體探針法熒光定量PCR試劑盒黃直絲鏈霉菌種屬: Streptomyces│flavorectus提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 模式菌株。對產(chǎn)朊圓酵母和稻瘟菌菌絲有溶菌作用。培養(yǎng)基: 0012生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
蘇云金芽孢桿菌種屬: Bacillus│thuringiensis提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0002生長條件: 28-32℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
奇異變形桿菌種屬: Proteus│mirabilis提供形式: 其他安全等級: 2模式菌株: no培養(yǎng)基: CM0051生長條件: 37℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
鏈霉菌種屬: Streptomyces│sp.分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0012生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
糖類抗原72-4(CA72-4)ELISA試劑盒山梨 99.8%聚乙烯(PS) 通用型I,一般射出成型用桿菌肽鋅
糖類抗原50(CA50)ELISA試劑盒L-氨甲酯鹽鹽 98%聚乙烯(PS) 通用型II,高強(qiáng)度鹽貝那普利/那普利
糖類抗原19-9(CA19-9)ELISA試劑盒L-精氨乙酯 98%聚乙烯(PS) 通用型III,高強(qiáng)度、押出用、食品用鹽貝那普利/那普利(標(biāo)準(zhǔn)品)
糖類抗原199(CA199)ELISA試劑盒L-氨芐酯對甲磺鹽 98%聚乙烯(PS) 耐沖擊型扎貝特
糖類抗原125(CA125)ELISA試劑盒L-天冬氨-β-芐酯 98%聚乙烯(PS) 高光澤度級扎貝特(標(biāo)準(zhǔn)品)
糖基化依賴的黏附分子(GlyCAM-1)ELISA試劑盒Boc-L-谷氨酰 98%聚乙烯(PS) 擠出級布南色林
糖化血紅蛋白A1c(A1c)ELISA試劑盒BOC-L-絲氨 97%聚乙烯(PS) 食品級溴夫定
糖化血紅蛋白(HbA1C)ELISA試劑盒S-芐基-L-半胱氨 98%2,5-二基噁唑 99%, 閃爍級溴夫定(標(biāo)準(zhǔn)品)
糖化低密度脂蛋白(Gly-LDL)ELISA試劑盒N-芐氧羰基-L-天冬氨 99%異磺酰酯 98%卡巴他賽
糖化蛋白(GSP)ELISA試劑盒N-芐氧羰基-L-纈氨 99%3,4-二甲氧基甲 98%米托蒽醌
糖化白蛋白(GA)ELISA試劑盒N-芐氧羰基-L-亮氨 96%3,4-二甲氧基甲 ≥98%, FG拉莫三
糖蛋白49A(Gp49a)ELISA試劑盒N-芐氧羰基-L-氨 98%愈創(chuàng)木酚 CP,98.0%拉莫三 (標(biāo)準(zhǔn)品)
糖蛋白130(gp130)ELISA試劑盒N-芐氧羰基-L-谷氨 98%球型四氧化三鐵磁粉 100-300nmD-半乳糖
糖聚糖(GAG)ELISA試劑盒Fmoc-L-亮氨 98%鄰二甲 ≥99%D-半乳糖(標(biāo)準(zhǔn)品)
羰基化蛋白(PC)ELISA試劑盒Fmoc-L-異亮氨 99%乙酰 AR,98.5%骨化三
羰基還原[NADPH] 1(CBR1/CBR/CRN)ELISA試劑盒Fmoc-L-精氨 98%乙酰 CP,98.0%坎地沙坦酯
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
3.樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。