詳細(xì)介紹
操作規(guī)程:
1、在96孔板加入細(xì)胞00μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升5000~0000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及00%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×00
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時(shí)的藥物濃度(IC90)
中文名稱(chēng):CCK-8法細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒
英文名稱(chēng)
產(chǎn)品規(guī)格:500T
發(fā)貨周期:1~3天
此試劑盒是用于測(cè)定細(xì)胞增殖或毒性試驗(yàn)中活細(xì)胞數(shù)目的一種高靈敏度,無(wú)放射性的比色檢測(cè)法。實(shí)驗(yàn)的靈敏度比其它如MTT, XTT 或MTS 高。由于新型細(xì)胞增殖及毒性檢測(cè)溶液相當(dāng)穩(wěn)定,并且對(duì)細(xì)胞沒(méi)有毒性,可直接加入到細(xì)胞樣品中長(zhǎng)時(shí)間孵育。 |
操作方法
1. 96 孔板加入細(xì)胞100μL/孔(約1×104),置37℃ 5%CO2 細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24 小時(shí)。2.加入適當(dāng)濃度的受試化合物。3.將96 孔板在37℃,含5% CO2 空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4. 向各孔中加入10 μl 的新型細(xì)胞增殖及毒性檢測(cè)溶液。
5. 37℃下孵育1~4 小時(shí)。
6. 酶標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度。
結(jié)果分析
1. 細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加新型細(xì)胞增殖及毒性檢測(cè)溶液,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加新型細(xì)胞增殖及毒性檢測(cè)溶液,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
2. 求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)。
注意事項(xiàng):
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開(kāi)蓋時(shí)試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長(zhǎng)時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會(huì)增加空白吸收,從而影響檢測(cè)結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來(lái)配制待檢測(cè)藥物。如果待測(cè)藥物有還原性,則測(cè)定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測(cè)藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對(duì)較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測(cè)。
9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長(zhǎng)短根據(jù)細(xì)胞的類(lèi)型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定,對(duì)于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長(zhǎng)時(shí)間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測(cè),MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
CD30分子(CD30)elisa試劑盒英文名稱(chēng):CD30 ELISA Kit大腦蛋白2抗體包裝1g
CD19分子(CD19)elisa試劑盒英文名稱(chēng):CD19 ELISA KitB轉(zhuǎn)錄激活因子抗體包裝250mg
CC趨化因子受體6(CCR-6)elisa試劑盒英文名稱(chēng):CCR-6 ELISA KitBCL6B抗體包裝5g
cAMP反應(yīng)元件結(jié)合蛋白(CREB)elisa試劑盒英文名稱(chēng):CREB ELISA KitBAP31蛋白抗體包裝1g
Ca-ATP酶(Ca-ATPase)elisa試劑盒英文名稱(chēng):Ca-ATPase ELISA Kit支鏈基轉(zhuǎn)酶2抗體包裝1g
B因子(BF)elisa試劑盒英文名稱(chēng):BF ELISA KitBCL2相關(guān)蛋白A1抗體包裝250mg
B細(xì)胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)elisa試劑盒英文名稱(chēng):Bcl-2 ELISA KitB淋巴瘤蛋白3抗體包裝5g
B細(xì)胞淋巴瘤-XL(Bcl-xl)elisa試劑盒英文名稱(chēng):Bcl-xl ELISA Kit轉(zhuǎn)錄因子MYB相關(guān)蛋白B抗體包裝1g
B細(xì)胞活化因子(BAFF)elisa試劑盒英文名稱(chēng):BAFF ELISA Kit防御素β1/Defensin β1抗體包裝25g
BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白(Bid)elisa試劑盒英文名稱(chēng):Bid ELISA KitB活化因子受體抗體包裝5g
Bcl-2相關(guān)X蛋白(BAX)elisa試劑盒英文名稱(chēng):BAX ELISA KitTNF家族B激活因子抗體包裝1g
Apelin 13(AP13)elisa試劑盒英文名稱(chēng):AP13 ELISA Kit蛇巴曲酶抗體包裝5g
apelin 12(AP12)elisa試劑盒英文名稱(chēng):AP12 ELISA Kit大腦蛋白2抗體包裝100g
Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)elisa試劑盒英文名稱(chēng):Col Ⅳ ELISA Kit程序性死亡配體1抗體包裝25g
Ⅲ型前膠原肽(PⅢP)elisa試劑盒英文名稱(chēng):PⅢP ELISA KitB7-H4抗體包裝1g
糖還原酶相關(guān)蛋白質(zhì)抗體促狀腺素胚胎因子(TEF)MDM2 antagonist nutlin-3 is a potent inducer of apoptosis.
CCK-8法細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒硬脂鉀
其他 十八鉀
英文名稱(chēng): Potassium stearate
其他英文名稱(chēng): Octadeconoic acid potassium salt;Stearic acid potassium salt
產(chǎn)品規(guī)格: CP,98%
包裝:250克
CAS號(hào):593-29-3
C18H35KO2=322.57
級(jí)別:CP
含量:98.0~103.0%
度(以H+計(jì)):≤3.5mmol/100g
乙溶解試驗(yàn):合格
干燥失量:≤1.0%
性狀:粉末。微有脂肪氣味。易溶于熱水或乙,緩溶于冷水,水溶液對(duì)石蕊和酚酞均呈強(qiáng)堿性,但乙溶液對(duì)酚酞僅呈微堿性。一般商品中含有相當(dāng)比例的棕櫚鹽。
用途:生化研究。表面活性劑。制備紡織品軟化劑
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