詳細介紹
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:寨卡病毒染料法熒光定量RT-PCR試劑盒50次
產(chǎn)品貨號:FS-P013581
產(chǎn)品規(guī)格:50次
產(chǎn)品分類:純化試劑盒
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
實驗過程:
一、試劑準備 1. DNA模板 2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 二、操作步驟 1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。 2.調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。 3.結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。 |
注意事項
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器、耗材應獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解,樣本處理過程應在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻,并應瞬時離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在第一次使用前應全部轉移至標本準備區(qū),并單獨存放。
6.為防止熒光干擾,應避免裸手直接接觸PCR反應管,并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7.儀器擴增相關參數(shù)應按照本說明書相關要求進行設置;不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
Human decay-accelerating factor,DAF ELISA Kit 人降解加速因子Multi-class antibodies: 48T
Smac/DIABLO 線粒體促凋亡蛋白抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rhesus antibody Rh Goat rat IgG whole serum 羊抗大鼠IgG抗血清 1ml
MK(Human Midkine) ELISA Kit 人中期因子 96T
phospho-p95 NBS1 (Ser343) 磷化DNA修復蛋白NBS1抗體 0.1ml
Band3 紅細胞陰離子交換蛋白1抗體 0.1ml
Smac/DIABLO 線粒體促凋亡蛋白抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
STK(Human serine/threonine protein kinase) ELISA Kit 人絲/蘇蛋白磷Multi-class antibodies: 48T
NCX1/SLC8A1 鈉鈣交換蛋白1抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh IL-31RA/CRL3 白介31受體a抗體 0.2ml
MMP-1 ELISA kit 大鼠基質(zhì)金屬蛋白1 96T
PRMT4 組蛋白精甲基轉移CARM1抗體 0.2ml
CPEB1 細胞質(zhì)多聚腺苷結合蛋白1抗體 0.1ml
NCX1/SLC8A1 鈉鈣交換蛋白1抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Donkey Guinea pig IgG/AP 性磷(AP)標記的驢抗豚鼠IgG 0.1ml
GLUD2 谷脫氫2抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh ASPP1 p53凋亡刺激蛋白1抗體 0.1ml
HRG- Beta/FITC 熒光標記抗HRGβ抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit mouse IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標記的兔抗小鼠IgG 0.1ml
P-HP1/FITC 熒光標記抗異染色質(zhì)蛋白1磷化抗體(果蠅)IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
寨卡病毒染料法熒光定量RT-PCR試劑盒50次Kurtzmanomyces shapotouensis種屬: Kurtzmanomyces│shapotouensis分離基物: 土壤結皮提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: yes應用領域: 模式菌株培養(yǎng)基: CM0027生長條件: 25C存儲條件: -80℃冰箱凍結;真空冷凍干燥
鏈霉菌種屬: Streptomyces│sp.分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0012生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法
恥垢分枝桿菌種屬: Mycobacterium│Mycobacterium smegmatis提供形式: 凍干物安全等級: 3模式菌株: no應用領域: 研究生長條件: 37存儲條件: 真空冷凍干燥法
木耳種屬: Auriculariaauricula(L.exHook.)Underw.安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 食用培養(yǎng)基: 17生長條件: 20-25℃
成纖維生長因子9(FGF9)ELISA試劑盒甲 AR,99.0%鎢 AR氘代(100g )
成纖維生長因子23(FGF-23)ELISA試劑盒鄰二甲 AR,99.5%1,1,1,2-四氟乙 99.95%氘代-D6(0.6ml x 10 )
成纖維生長因子23(FGF23)ELISA試劑盒甲合次硫氫鈉 97.5%碳烯酯 99%氘代-D6(0.5ml x 10 )
層粘連蛋白(Laminin)ELISA試劑盒甲次硫氫鈉 98%碳烯酯 CP氘代-D6(0.55ml x 10)
層連蛋白(Laminin)ELISA試劑盒叔戊基 97%碳烯酯 for HPLC, 99.7%氘代-D6(10g )
表皮生長因子受體2(sp185/Her2)ELISA試劑盒雙(4-溴基) 98%碳烯酯 99.7%,無級氘代-D6(10g )
表皮生長因子受體2(Her2)ELISA試劑盒4-溴基 97%對甲氧基 97.0%氘代-D6(25g)
表皮生長因子受體(EGFR/ErbB1)ELISA試劑盒4-溴代三 97%對甲氧基 AR,99.0% 氘代-D6(50g)
表皮生長因子受體(EGF-R)ELISA試劑盒4-溴-4',4''-二甲基三 95%對甲 98%氘代-D6(100g )
表皮生長因子受體(EGFR)ELISA試劑盒聯(lián)芐 99%對氨基酚 CP,98%氘氧化鈉-d(10g )
半乳糖凝集3(Galectin-3)ELISA試劑盒2-叔丁基蒽醌 98%對氨基酚 99% (HPLC)氘氧化鈉-d(50g )
半乳凝3(GAL-3)ELISA試劑盒4,4'-聯(lián)二甲 97%間 CP,98%氘代三(0.50 mL x 10 )
半乳凝3(GAL3)ELISA試劑盒4,4'-二甲基二 97%間 GR,99%氘代三(10 g )
白介8(IL-8)ELISA試劑盒3,4-二甲基二 98%鄰 GR,99%氘代DMSO-D6(0.5ml x 10)
白介7(IL-7)ELISA試劑盒4,4'-二甲氧基二基 98%鄰 GCS,>99.5% (GC) 氘代DMSO-D6(0.5ml x 10)
白介6受體(IL-6R)ELISA試劑盒4,4'-二甲基三 98%鄰 CP,98%氘代DMSO-D6(0.6ml x 10 )
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
3.樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。