組成及試劑配制:
1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
使用方法:
一、稀釋PCR陽性對照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個(gè)10倍稀釋度為例) 1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對照。 2. 標(biāo)記6個(gè)離心管,分別為7,6,5,4,3,2。 3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。 4. 在7號(hào)管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。 5. 換槍頭,在6號(hào)管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。 6. 換槍頭,在5號(hào)管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號(hào)管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。 7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個(gè)稀釋度的陽性對照。放冰上待用。 | 二、樣品DNA的制備 8. 如果有N個(gè)樣品,必須設(shè)置N+2個(gè)提取, 多出的一個(gè)是PC(樣品制備陽性對照), 一個(gè)是NC(樣品制備陰性對照)。 可以用10μL上步制備的PCR陽性對照的第4號(hào)(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于1萬拷貝)或第5號(hào)(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。 9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒。 | 三、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,在樣品制備室進(jìn)行) 10. 如果只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個(gè)PCR管,其中N+2個(gè)用于上步得到的N+2個(gè)樣品,1個(gè)用于PCR陰性對照,6個(gè)用于PCR陽性對照。如果做2-3次重復(fù),則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。 11. 產(chǎn)品僅用于科研在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲(chǔ)存好后加) |
實(shí)驗(yàn)外包:
1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學(xué)分析
2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測:Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細(xì)胞分選
7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR
8.細(xì)胞及動(dòng)物模型:原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動(dòng)物模型構(gòu)建
Tn-T (Rat Troponin T,Tn-T )ELISA Kit 大鼠肌鈣蛋白TMulti-class antibodies: 48T
Survivin 細(xì)胞凋亡抑制因子抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rhesus antibody Rh Goat human IgG 羊抗人IgG 1mg
(Mouse IgE receptor antibody) ELISA Kit 小鼠抗IgE受體抗體 96T
Nmnat1 煙酰胺腺二核苷1抗體 0.2ml
Phospho-BRCA1(Ser988) 磷化癌易感基因1抗體 0.1ml
Survivin 細(xì)胞凋亡抑制因子抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
HAMA(Human antimous antibody) ELISA 人抗鼠抗體Multi-class antibodies: 48T
Pin1 肽基脯氨酞順反異構(gòu)Pinl抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh HIRA/DGGR1 組蛋白替換精蛋白DGGR1抗體 0.1ml
TpP ELISA Kit 大鼠血栓前體蛋白 96T
PXR 孤兒核受體PAR1抗體 0.2ml
CD75 唾液轉(zhuǎn)移1/α-2,6唾液轉(zhuǎn)移抗體 0.2ml
Pin1 肽基脯氨酞順反異構(gòu)Pinl抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rabbit mouse Kappa light chain/PE-Cy3 PE-Cy3標(biāo)記的兔抗小鼠k鏈 0.1ml
GIMAP1 GTPIMAP家族成員1抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh APBA3/Mint3/X11gamma β淀粉樣前體蛋白結(jié)合蛋白3抗體 0.2ml
IL-27R/TCCR/FITC 熒光標(biāo)記白細(xì)胞介27受體抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit human IgM/Cy5.5 Cy5.5標(biāo)記的兔抗人IgM 0.1ml
RAP1A/FITC 熒光標(biāo)記抗Rap1抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
鸚鵡熱衣原體PCR試劑盒傷寒菌種屬: Salmonella│typhi提供形式: 凍干物安全等級(jí): 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 噬菌體分型用 Vi J1 9,12,Vi d -培養(yǎng)基: CM0051生長條件: 37℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法
納地青霉種屬: Penicillium nalgiovense提供形式: 凍干粉安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 綜合PDA:20%馬鈴薯汁 1L,葡萄糖20g ,KH2PO4 3g, MgSO4.7H2O 1.5g ,硫胺 微量,瓊脂15g, pH 6生長條件: 25-28℃
盧森坦類諾卡氏菌種屬: Nocardiopsis│lucentensis分離基物: Salt marsh soil提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 模式菌株培養(yǎng)基: 0423生長條件: 35℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
熒光假單胞菌種屬: Pseudomonasfluorescens分離基物: 自來安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 2生長條件: 30℃
碳酐9(CA9)ELISA試劑盒Fmoc-L-脯氨 98%乙酰 99%,無色坎地沙坦酯(標(biāo)準(zhǔn)品)
碳酐6(CA-6)ELISA試劑盒Fmoc-L-蘇氨 BR正丁酰 98%卡奈替尼
碳酐3(CA3)ELISA試劑盒Fmoc-L-谷氨酰 BR癸酰 98%GEMSA
碳酐2(CA-2)ELISA試劑盒L-谷氨二甲酯鹽鹽 98%十二酰 98%枸櫞噴托維林/托可拉斯/妥克拉司
碳酐2(CA2)ELISA試劑盒L-氨甲酯鹽鹽 98%異丁酰 98%卡洛芬
碳酐12(CA-12)ELISA試劑盒L-氨芐酯鹽鹽 98%肉豆蔻酰 98%卡洛芬(標(biāo)準(zhǔn)品)
碳酐(CA)ELISA試劑盒L-脯氨芐酯鹽鹽 98%辛酰 99%長春質(zhì)(標(biāo)準(zhǔn)品)
肽-主要組織相容性復(fù)合體復(fù)合物(pMHC)ELISA試劑盒L-絲氨乙酯鹽鹽 99%油酰 80%阿達(dá)唑(標(biāo)準(zhǔn)品)
肽酰脯氨酰異構(gòu)(親環(huán)蛋白)樣1(PPIL1)ELISA試劑盒L-絲氨甲酯鹽鹽 98%固體亞 AR,99%阿達(dá)唑
肽聚糖識(shí)別蛋白L(PGRP-L)ELISA試劑盒L-酪氨甲酯 98%亞溶液 AR,50%溶液西立伐他汀鈉
肽聚糖(PG)ELISA試劑盒L-酪氨乙酯鹽鹽 98%亞溶液 70%亞(溶液)西替利
肽基脯氨酰順反異構(gòu)(PPI)ELISA試劑盒L-酪氨芐酯對甲磺鹽 98%固體亞 99.97% metals basis醋西曲瑞克
胎球蛋白A(Fetuin A)ELISA試劑盒L-纈氨芐酯對甲磺鹽 98%棕櫚酰 >96.0%(T)白屈菜紅
胎球蛋白A(FETU-A)ELISA試劑盒L-纈氨乙酯鹽鹽 99%酰 98%醋己定
胎盤生長因子(PLGF)ELISA試劑盒N-芐氧羰基-L-蘇氨 98%硬脂酰 97%(T),工業(yè)級(jí)氟伐鈉
胎盤泌乳(PL)ELISA試劑盒N-芐氧羰基-L-脯氨 98%硬脂酰 97%(GC)氟伐鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)
PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1ml試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝螅?℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。