參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:沙眼衣原體PCR試劑盒
產(chǎn)品貨號:FS-P013423
產(chǎn)品規(guī)格: 50次
產(chǎn)品分類:純化試劑盒
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
實(shí)驗(yàn)過程:
一、試劑準(zhǔn)備 1. DNA模板 2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 二、操作步驟 1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。 2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。 3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。 |
注意事項(xiàng)
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在第一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6.為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7.儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9.實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
3.樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。
LIS1/FITC 熒光標(biāo)記無腦回的致病基因LIS1抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
SUR1/FITC 熒光標(biāo)記磺酰脲類受體1抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh ADORA3 腺苷受體A3抗體 0.1ml
Rabbit Goat IgG/Gold 膠體金標(biāo)記的兔抗羊IgG 0.5ml
GPCR6A G蛋白偶聯(lián)受體33抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit dog IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標(biāo)記的兔抗狗IgG 0.1ml
SUR1/FITC 熒光標(biāo)記磺酰脲類受體1抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
HBF(Human cytomegalovirus IgM antibody) ELISA Kit 人胎兒血紅蛋白Multi-class antibodies: 48T
PP2A alpha 蛋白質(zhì)磷-2A抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rhesus antibody Rh Hepatitis C Virus NS4B 丙型肝炎病毒NS4B抗體 0.1ml
ER(Mouse Estradiol receptor) ELISA Kit 小鼠雌二醇受體 96T
PXMP1 過氧化物膜蛋白1抗體 0.2ml
Connexin 43 間隙連接蛋白43抗體 0.1ml
PP2A alpha 蛋白質(zhì)磷-2A抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rabbit rat IgG/Cy7 Cy7標(biāo)記的兔抗大鼠IgG 0.1ml
GIMAP2 GTPIMAP家族成員2抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh APBB1/Fe65 protein 鐵蛋白Fe65抗體 0.1ml
IL-17D/IL-27/FITC 熒光標(biāo)記白介-17D抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit human IgM/Cy7 Cy7標(biāo)記的兔抗人IgM 0.1ml
RAMP-1/FITC 熒光標(biāo)記受體活性調(diào)制蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
沙眼衣原體PCR試劑盒新疆糖單孢菌種屬: Saccharomonospora│xinjiangensis提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 模式菌株培養(yǎng)基: 0234生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
廈門棲東海菌種屬: Donghicola│xiamenensis分離基物: 海提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 模式菌株培養(yǎng)基: 223生長條件: 24℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
赫爾戈蘭簡納西氏菌種屬: Jannaschia│helgolandensis分離基物: 樣/表層海提供形式: 凍干物模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 模式菌株,用于分類學(xué)研究。培養(yǎng)基: 471生長條件: 25℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
布倫登盧普沙門氏菌種屬: Salmonella│braenderup提供形式: 凍干物安全等級: 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 6,7 e,h e,n,z15培養(yǎng)基: CM0051生長條件: 37℃存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
胎盤性(PLAP)ELISA試劑盒N-芐氧羰基-L-色氨 98%正戊酰 98%克林沙星
胎盤核糖核抑止劑(HPRI)ELISA試劑盒氟 99.99% metals basis AR,50 % in H2O 鹽咪唑
胎盤蛋白14(PP14)ELISA試劑盒氟 AR,40.0%DL-3-氨基丁 97%鹽咪唑(標(biāo)準(zhǔn)品)
胎盤蛋白13(PP13)ELISA試劑盒葡萄糖,一 98%(S)-3-氨基-1,2- 98%屈膦二鈉無
胎盤蛋白(PP)ELISA試劑盒葡萄糖,一 USP,藥用級 N-乙酰-D-纈氨 97%屈膦二鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)
胎盤催乳(HPL)ELISA試劑盒玉米淀粉 藥用級5-氨基戊 97%米帕明/咪
胎兒血紅蛋白(HBF)ELISA試劑盒三溴化 99.999%N-乙酰-L-異亮氨 98%米帕明/咪(標(biāo)準(zhǔn)品)
胎兒纖連蛋白(fFN)ELISA試劑盒三溴化 99.9%DL-2-氨基丁 99%硫氫吡格雷 I型
他克莫司(FK506)ELISA試劑盒三氟化乙絡(luò)合物 98%DL-α-氨基異丁 98%硫氫吡格雷 II型(標(biāo)準(zhǔn)品)
鎖鏈(DES)ELISA試劑盒三氟化乙 46.5%BOC-L-纈氨 99%硫氫吡格雷 II型
羧甲基賴氨(CML)ELISA試劑盒三氟化乙 98%BOC-D-絲氨 98%萘丁美酮/萘普酮
羧化基質(zhì)谷氨蛋白(ucMGP)ELISA試劑盒三氟化四絡(luò)合物 48-50%溶液1-芐基哌 97%萘丁美酮/萘普酮(標(biāo)準(zhǔn)品)
羧化不全骨鈣(ucOC)ELISA試劑盒三氟化乙絡(luò)合物 97%BOC-D-纈氨 98%地瑞拉韋
髓樣分化因子初次應(yīng)答基因88(MYD88)ELISA試劑盒三氟化甲絡(luò)合物 50-52 wt% BF3 巴豆 98%沃氏物
髓樣分化因子88(MyD88)ELISA試劑盒丹皮酚 99%Fmoc-beta-氨 99%DL-α-羥基戊二二鈉
髓樣分化蛋白2(MD-2)ELISA試劑盒叔丁 GR,≥99.5% (GC)N-羥基硫代琥珀酰亞 98%地美溴