Annexin V-APC/PI細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒

Annexin V-APC/PI細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒公司*的商品：微小染色體維持缺陷蛋白7抗體甜茶苷;甜葉懸鉤子苷(標(biāo)準(zhǔn)品) Schizandrin A
單核趨化蛋白2抗體(小鼠)甜橙黃(標(biāo)準(zhǔn)品) Schizandrin B
單核趨化蛋白3抗體甜瓜蒂（標(biāo)準(zhǔn)品） Schisantherin A
單核趨化蛋白3抗體甜菊苷（標(biāo)準(zhǔn)品） Sipeimine
巨噬炎癥蛋白18抗體甜葉菊（標(biāo)準(zhǔn)品） Croc

中文名稱：Annexin V-APC/PI細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒

英文名稱：

產(chǎn)品規(guī)格：50T|100T

發(fā)貨周期：1～3天

在正常細(xì)胞中，磷脂酰絲氨酸(PS)只分布在細(xì)胞膜脂質(zhì)雙層的內(nèi)側(cè)，而在細(xì)胞凋亡早期，細(xì)胞膜中的磷脂酰絲氨酸(PS)由脂膜內(nèi)側(cè)翻向外側(cè)。在體內(nèi)，巨噬細(xì)胞可以識(shí)別翻轉(zhuǎn)到細(xì)胞膜表面的PS 從而將這些程序性死亡的細(xì)胞清除，因此凋亡過(guò)程中并不伴隨局部的炎癥反應(yīng)，而在細(xì)胞壞死的過(guò)程中則常常伴隨著炎癥反應(yīng)。

AnnexinⅤ是一種分子量為35-36kD的Ca2+依賴性磷脂結(jié)合蛋白，能與細(xì)胞凋亡過(guò)程中翻轉(zhuǎn)到膜外的PS 高親和力特異性結(jié)合。PS 外翻發(fā)生在細(xì)胞核破裂，DNA 片段化以及凋亡相關(guān)蛋白出現(xiàn)之前，這使得Annexin V 與PS的結(jié)合成為凋亡早期的一種重要檢測(cè)標(biāo)志事件。

檢測(cè)原理：

在正常的活細(xì)胞中，磷脂酰絲氨酸(phosphotidylserine，PS)位于細(xì)胞膜的內(nèi)側(cè)，但在早期凋亡的細(xì)胞中，PS 從細(xì)胞膜的內(nèi)側(cè)翻轉(zhuǎn)到細(xì)胞膜的表面，暴露在細(xì)胞外環(huán)境中。

Annexin-Ⅴ能與PS 高親和力結(jié)合。可通過(guò)細(xì)胞外側(cè)暴露的磷脂酰絲氨酸與凋亡早期細(xì)胞的胞膜結(jié)合。用標(biāo)記了APC的AnnexinⅤ作為熒光探針，利用流式細(xì)胞儀或熒光顯微鏡可檢測(cè)細(xì)胞凋亡的發(fā)生。細(xì)胞壞死的過(guò)程中也會(huì)發(fā)生細(xì)胞膜損傷，壞死的細(xì)胞會(huì)結(jié)合Annexin V-APC。

Annexin V-APC 通常與細(xì)胞膜非滲透性核酸熒光染料聯(lián)合使用以檢測(cè)凋亡細(xì)胞。常用的染料是PI。正常細(xì)胞和早期凋亡細(xì)胞的細(xì)胞膜是完整的，核酸染料PI 不能透過(guò)完整的細(xì)胞膜，但在凋亡中晚期的細(xì)胞和壞死細(xì)胞，PI 能夠透過(guò)細(xì)胞膜與細(xì)胞核結(jié)合呈現(xiàn)紅色。

PI/Annexin V-APC試劑盒將Annexin Ⅴ與PI匹配使用，可以將凋亡早期的細(xì)胞和晚期的細(xì)胞以及死細(xì)胞區(qū)分開(kāi)來(lái)。壞死細(xì)胞可以同時(shí)與Annexin V-APC和PI 結(jié)合顯色，而PI 則被排除在活細(xì)胞(APC陰性)和早期凋亡細(xì)胞(APC陽(yáng)性)之外。

Annexin V-APC 細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒可以方便快捷的檢測(cè)凋亡細(xì)胞，使用流式細(xì)胞儀、熒光顯微鏡或其它熒光檢測(cè)設(shè)備進(jìn)行檢測(cè)。

儲(chǔ)存條件：染色液2-8℃避光保存；結(jié)合液2-8℃保存；
注意事項(xiàng)：

1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用，不可用于診斷或治療。

2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心，將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底，避免開(kāi)蓋時(shí)試劑損失。

3、禁止與其他品牌的試劑混用，否則會(huì)影響使用效果。

4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。

5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。

6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。

7、需長(zhǎng)時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融，否則將會(huì)增加空白吸收，從而影響檢測(cè)結(jié)果。最好小劑量分裝，用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。

8、用培養(yǎng)基或 PBS 來(lái)配制待檢測(cè)藥物。如果待測(cè)藥物有還原性，則測(cè)定不含細(xì)胞，僅含有 MTS 的待測(cè)藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小，則可以直接加入 MTS ，如果吸光度相對(duì)較大，則需要除去培養(yǎng)基，并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次，然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測(cè)。

9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。

10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長(zhǎng)短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定，對(duì)于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可，白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長(zhǎng)時(shí)間。

11、如果不是使用 96 孔板檢測(cè)，MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。

操作規(guī)程：

1、在96孔板加入細(xì)胞00μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升5000～0000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～0μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及00%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。

5、每孔加50μL × MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×00

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時(shí)的藥物濃度(IC90)

依澤替米貝;依折麥布英文名稱： Meloxicam卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白51抗體包裝5g

右雷佐生；右亞英文名稱： Memantine HCl卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白125抗體包裝1g

右雷佐生鹽鹽;右亞鹽鹽英文名稱： Memantine hydrochloride卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白50抗體包裝5g

左西孟旦英文名稱： Methotrexate卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白90A抗體包裝100mg

左旋地平/磺左旋地平英文名稱： Methotrexate卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白71抗體包裝100mg

Diabetes Research英文名稱： Nimesulide卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白37抗體包裝1g

MSDC-0160英文名稱： Miconazole Nitrate卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白47抗體包裝5g

Phenformin hydrochloride英文名稱： Miconazole Nitrate卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白17抗體包裝1g

Sotagliflozin(LX4211)英文名稱： Micronomicin Sulfate卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白58抗體包裝25g

艾格列凈;依帕列凈;恩格列英文名稱： Micronomicin Sulfate卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白94抗體包裝5g

伏格列波糖英文名稱： 4-MUG卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白82抗體包裝1g

格列本脲英文名稱： MinoxidilCDK5激活結(jié)合蛋白2抗體包裝250mg

格列吡英文名稱： MinoxidilCDK2相互作用蛋白抗體包裝5g

格列喹酮英文名稱： Minoxidil Sulfate周期蛋白依賴性激14抗體包裝1g

格列美脲英文名稱： Minoxidil Sulfate癌胚抗原相關(guān)粘附分子19抗體包裝5g

: AS4.273資源名稱: 產(chǎn)色鏈霉菌 質(zhì)量規(guī)格：>99.0%血血小板衍生生長(zhǎng)因子AB試劑盒銀杏內(nèi)酯B;Ginkgolide B

成團(tuán)泛菌Pantoea│agglomerans 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品血小板因子3試劑盒異鉤藤堿;Isorhychophylli

: Bt0219資源名稱: 蘇云金芽胞桿菌 質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BR血小板衍生生長(zhǎng)因子CC試劑盒銀杏內(nèi)酯A;Ginkgolide A
Annexin V-APC/PI細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒氧化鈰

其他 二氧化鈰；氧化高鈰；玻璃白；鈰土；氧化鈰(IV)

英文名稱： Cerium(IV) oxide

其他英文名稱： Cerium dioxide；Ceria

產(chǎn)品規(guī)格： 4N

包裝：100克

產(chǎn)品規(guī)格： 3.5N

包裝：250克

CAS號(hào)：1306-38-3

CeO2=172.11

級(jí)別：4N

含量：≥99.99%

其他稀土族：≤0.05%

級(jí)別：3.5N

含量：≥99.95%

性狀：純品為重質(zhì)粉末或立方體結(jié)晶，不純品為淺黃色甚至粉紅色至紅棕色(因含有微量鑭、鐠等)。幾乎不溶于水和。相對(duì)密度7.3。熔點(diǎn)1950℃。有毒，半數(shù)致死量(大鼠，經(jīng)口)約1g/kg。。

用途：生化研究。氧化劑。有機(jī)反應(yīng)催化劑。鋼鐵分析作稀土金屬標(biāo)樣。氧化還原滴定分析。脫色玻璃。玻璃搪瓷遮光劑。耐熱合金。

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