商品介紹:
用途:
細(xì)胞和組織的酸性磷酸酶染色
注意事項(xiàng):
主要由萘酚、六氮化對品紅、亞等組成,染色后酶活性部位呈紅色。
儲(chǔ)存條件:-20℃,避光,6個(gè)月
產(chǎn)品屬于:
培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
雞矢藤(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Monensin sodium salt富含亮重復(fù)蛋白6抗體包裝1g
雞血藤(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Monensin sodium salt低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白12抗體(抑制腫瘤蛋白7)包裝25g
雞眼睛(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Hippuric acid磷化相似腫瘤抑制基因HUGL抗體包裝5g
積雪草(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Avicularin低密度脂蛋白受體抗體包裝100g
積雪草苷B英文名稱: Pimobendan瘦抗體包裝25g
積雪草苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 2-Amino-4'-fluorobenzophenone 腫瘤自身抗原LMO4抗體包裝500g
積雪草(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 2-amino-4'-chlorobenzophenone 淋巴特異性蛋白酪激抗體包裝1g
吉馬(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Protostemonine白免疫球蛋白樣受體8抗體包裝25g
吉祥草(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Bullatine A白三烯B4受體1抗體包裝5g
急性子(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: ophiopogonin D'白免疫球蛋白樣受體6抗體包裝1g
蒺藜(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: BendrofluMethiazide淋巴活化基因-3抗體包裝5g
蒺藜皂苷D英文名稱: Plumbagin白相關(guān)免疫球蛋白樣受體1抗體包裝1g
蒺藜皂苷K英文名稱: Lapachol 白分化抗原CD207抗體包裝5g
己可可堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Armillarisin A白三烯B4受體2抗體包裝25g
加蘭他敏(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 17α-Hydroxypregnenolone白相關(guān)免疫球蛋白樣受體2抗體包裝5g
干酪乳桿菌干酪亞種Lactobacillus│casei subsp.casei 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR抗神經(jīng)膠質(zhì)纖維性蛋白試劑盒非洲防己堿;Columbamine
米根霉Rhizopus│oryzae 質(zhì)量規(guī)格:≥97.0%,BR抗殺菌通透性增高蛋白抗體試劑盒佛司可林;Forskolin
大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥99.0%,標(biāo)準(zhǔn)品抗腮腺管抗體試劑盒伏格列波糖;Voglibose
酸性磷酸酶染色液(偶氮偶聯(lián)法)四基溴化銨
其他 四溴化銨;溴化四銨;四正基溴化銨;溴化四基銨
英文名稱: Tetrapropylammonium bromide
產(chǎn)品規(guī)格: AR,98%
包 裝: 25克/100克/500克
CAS號(hào):1941-30-6
C12H24NBr=266.26
級別:AR
含量:≥98.0%
熔點(diǎn):266~272℃
性狀:結(jié)晶或結(jié)晶粉末。有吸濕性。溶于水和。有刺激性。水中溶解度:100g/L
用途:生化研究。離子對色譜試劑
保存:RT