詳細(xì)介紹
商品介紹:
英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:1mg|5mg H89 2HCl 是一種有效的PKA 抑制劑,Ki 為48 nM,作用于PKA 比作用于PKG 選擇性高10倍,比作用于PKC, MLCK,鈣調(diào)蛋白激酶II 和酪蛋白激I/II 選擇性高500倍。 |
產(chǎn)品屬于:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
1mg|5mg | 1~3天 |
培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
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木霉Trichoderma│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRP鈣黏蛋白/胎盤鈣黏蛋白試劑盒羅漢松樹脂酚
鏈霉菌屬菌種Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRProminin 2試劑盒雷公藤定堿
H-89(PKA抑制劑)葡聚糖T4
其他葡聚糖D4;右旋糖酐4
英文名稱:Dextran T4
其他英文名稱:Mucrose;Glucose polymer
產(chǎn)品規(guī)格:BR,分子量4000
包裝:10克/100克
CAS號:9004-54-0
分子式:(C6H10O5) n
分子量:~4000
級別:BR
鑒別:呈正反應(yīng)
干燥失重:≤5.0%
重金屬:≤5ppm
性狀:粉末,不溶于乙,在中性溶液中很穩(wěn)定,遇強及升高溫度下被水解,在堿性溶液中端基能被氧化。易溶于水。無臭,無味。其溶液可在100-115℃熱壓30-45min。葡聚糖存在于某些微生物生長過程中分泌的粘液中。主要由D葡萄喃糖以α,1→鍵連接,支鏈點有1-→2,1→3,1→4連接。隨著微生物種類和生長條件的不同,其結(jié)構(gòu)也有差別
用途:生化研究。細(xì)胞研究,沉淀反應(yīng),從全血中分離白細(xì)胞。學(xué)研究。滲透性研究。惰性膠體已占容積和生物細(xì)胞壁體積的測定。
保存:RT,保質(zhì)期3年