轉基因品系大豆G94-19探針法qPCR試劑盒

儲存條件：
14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內毒素的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，收集血液后，3000 轉離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液：3000 轉離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
服務流程：
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數據分析——結果交付——售后服務。

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實驗注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程，通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括定量和相對定量）和定性分析。主要服務：DNA或RNA的定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
實驗過程：
一、試劑準備
1. DNA模板
2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
      10×PCR buffer             5μl
      dNTP mixl                 4μl
      引物1（10pM）               2μl
      引物2（10PM）              2μl
     Taq酶（2U/μl）            1μl
     DNA模板（50ng-1μg/μl）    1 μl
      加ddH2O至               50 μl
    視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，后在72℃ 保溫7min。
3．結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
檢測方法包括以下步驟：
(1)將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值，即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。
其中所述參照基因為本領域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域，其中所述質粒載體為本領域常規(guī)質粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。
步驟(2)為：待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值，即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。
其中所述待測目的基因為本領域常規(guī)待測目的基因，較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴增為本領域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
真核翻譯起始因子4G抗體Aromadendrane-4β,10α-diol別名: 4β,10α-Aromadendranediol分子式: C15H26O2性狀: Powder純度: 99.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞: 香木蘭烷；中藥對照品；中藥標準品；植物提取物；天然產物；天然產物庫

β4整合素結合蛋白抗體Eupatolide別名: 分子式: C15H20O3性狀: Powder純度: 特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞: 細胞毒活性；澤蘭屬；吉瑪烷；吉馬烷；中藥對照品；中藥標準品；植物提取物；天然產物；天然產物庫

食道癌相關基因4蛋白抗體Curcumenone別名: 分子式: C15H22O2性狀: Oil純度: 93.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞: 中藥對照品；中藥標準品；植物提取物；天然產物；天然產物庫

紅細胞生成素抗體β-Rotunol別名: 分子式: C15H22O2性狀: Powder純度: 97.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞: 莎草；桉葉烷；中藥對照品；中藥標準品；植物提取物；天然產物；天然產物庫

胞漿環(huán)氧化物水解酶抗體Armisinin別名: Arannuin; Qinghaosu; Qing Hau Sau分子式: C15H22O5性狀: Powder純度: 98.5%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞: 中藥對照品；中藥標準品；植物提取物；天然產物；天然產物庫

雌激素受體相關蛋白3抗體Eudesma-4(15),7(11)-dien-8-one別名: Selina-4(15),7(11)-dien-8-one分子式: C15H22O性狀: Oil純度: 特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞: 中藥對照品；中藥標準品；植物提取物；天然產物；天然產物庫

雌激素相關受體β抗體Guajadial別名: 分子式: C30H34O5性狀: Powder純度: 98.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞: 植物提取物；天然產物；天然產物庫

上皮細胞膜蛋白2抗體4α,8β-Dihydroxy-3α-(2-hydroxy-3-acetoxy-2-methylbutyryloxy)eudesm-7(11)-en-12,8α-olide別名: 分子式: C22H32O9性狀: Powder純度: 97.5%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞: 植物提取物；天然產物；天然產物庫
轉基因品系大豆G94-19探針法qPCR試劑盒TLC法鑒別98%100mlInterleukin 32,IL32 ELISA Kit

甲鈷 質量規(guī)格：>98%,BR Mecobalamin

AGEs ELISA Kit  大鼠晚期糖基化終末產物CAS號：92923574 抗腦血管內皮細胞抗體檢測試盒500ml胰蛋白酶檢測試盒Insulin

5g1g5溴尿苷FAT;CD36

 大腸桿菌 Escherichia coliL-Glutamine (100X)

IL12/P70(Human Interleukin 12) ELISA KIT  人白介素12CAS號：92842 肌酐酶檢測試盒100ml胰島素檢測試盒Insulinlikegrowthfactor1

25g500ml5溴尿苷guasine mophosphate

右旋洛芬氨丁三醇 質量規(guī)格：>98.5%,BR (S)-Ketoprofen trometamol

百得OEM的genex移液器495023−20°C干燥避光保存N酰L蛋氨HPLC≥98%型肝炎病核心抗體IgM檢測試盒20mgP53Ab標準品,中藥標準品, 蒼術苷A

服務流程：
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數據分析——結果交付——售后服務。

儲存條件：
14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內毒素的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，收集血液后，3000 轉離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液：3000 轉離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

實驗注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程，通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括定量和相對定量）和定性分析。主要服務：DNA或RNA的定量分析、基因表達差異分析、基因分型。

P物質(SP)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Substance P (SP) 96T Rattus norvegicus (Rat)
組織因子通道抑制因子(TFPI)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Tissue Factor Pathway Inhibitor (TFPI) 96T Homo sapiens (Human)
組織因子通道抑制因子(TFPI)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Tissue Factor Pathway Inhibitor (TFPI) 96T Mus musculus (Mouse)
脫氫表雄酮(DHEA)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Dehydroepiandrosterone (DHEA) 96T General
視黃醇結合蛋白1(RBP1)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Retinol Binding Protein 1, Cellular (RBP1) 96T Homo sapiens (Human)
神經激肽A(NKA)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Neurokinin A (NKA) 96T Homo sapiens (Human)
血小板衍生生長因子AB(PDGFAB)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Platelet Derived Growth Factor AB (PDGFAB) 96T Homo sapiens (Human)
C-肽(C-Peptide)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for C-Peptide 96T Homo sapiens (Human)
C-肽(C-Peptide)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for C-Peptide 96T Mus musculus (Mouse)
C-肽(C-Peptide)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for C-Peptide 96T Rattus norvegicus (Rat)
胰島素(INS)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Insulin (INS) 96T Canis familiaris; Canine (Dog)
胰島素(INS)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Insulin (INS) 96T Chicken (Gallus)
胰島素(INS)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Insulin (INS) 96T Homo sapiens (Human)
甲狀腺素(T4)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Thyroxine (T4) 96T General
三碘甲狀腺原氨酸(T3)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Triiodothyronine (T3) 96T General
雌三醇(E3)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Estriol (E3) 96T General
睪酮(Testosterone)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Testosterone 96T General
孕酮(Pg)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Progesterone (Pg) 96T General
雌二醇(E2)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Estradiol (E2) 96T General
皮質醇(Cortisol)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Cortisol 96T General
心肌肌鈣蛋白I(TNNI3)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Troponin I Type 3, Cardiac (TNNI3) 96T Homo sapiens (Human)
肌紅蛋白(MYO)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Myoglobin (MYO) 96T Homo sapiens (Human)
肌紅蛋白(MYO)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Myoglobin (MYO) 96T Mus musculus (Mouse)
肌紅蛋白(MYO)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Myoglobin (MYO) 96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
肌紅蛋白(MYO)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Myoglobin (MYO) 96T Rattus norvegicus (Rat)
內皮素1(EDN1)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Endothelin 1 (EDN1) 96T Homo sapiens (Human)
內皮素1(EDN1)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Endothelin 1 (EDN1) 96T Mus musculus (Mouse)
內皮素1(EDN1)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Endothelin 1 (EDN1) 96T Rattus norvegicus (Rat)
氨基端前腦鈉素(NT-ProBNP)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for N-Terminal Pro Brain Natriuretic Peptide (NT-ProBNP) 96T Homo sapiens (Human)
鐵蛋白(FE)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Ferritin (FE) 96T Equus caballus; Equine (Horse)
鐵蛋白(FE)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Ferritin (FE) 96T Homo sapiens (Human)
載脂蛋白A1(APOA1)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Apolipoprotein A1 (APOA1) 96T Homo sapiens (Human)
組織因子(TF)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Tissue Factor (TF) 96T Homo sapiens (Human)
組織因子(TF)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Tissue Factor (TF) 96T Mus musculus (Mouse)
纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI1)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Plasminogen Activator Inhibitor 1 (PAI1) 96T Homo sapiens (Human)
髓鞘堿性蛋白(MBP)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Myelin Basic Protein (MBP) 96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
髓鞘堿性蛋白(MBP)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Myelin Basic Protein (MBP) 96T Homo sapiens (Human)

HSC 人雪旺細胞 5 x 10^5 cells/vial
HPC 人神經束膜細胞 5 x 10^5 cells/vial
HDMEC 人真皮微血管內皮細胞-成人 5 x 10^5 cells/vial
HDLEC 人真皮淋巴內皮細胞 5 x 10^5 cells/vial
HDMEC-a 人真皮微血管內皮細胞-成人 5 x 10^5 cells/vial
HDVSMC 人真皮血管平滑肌細胞 5 x 10^5 cells/vial
HEK-n 人表皮角質細胞-新生 5 x 10^5 cells/vial
HEK-a 人表皮角質細胞-成人 5 x 10^5 cells/vial
HEK-f 人表皮角質細胞-胎兒 5 x 10^5 cells/vial
HEM-l 人表皮黑色素細胞-淺色素 5 x 10^5 cells/vial
HEM-m 人表皮黑色素細胞-中色素 5 x 10^5 cells/vial
HEM-d 人表皮黑色素細胞-深色素 5 x 10^5 cells/vial
HEM-a 人表皮黑色素細胞-成人 5 x 10^5 cells/vial
牛赤羽病毒RT-LAMP檢測試劑盒HEM-f 人表皮黑色素細胞-胎兒 5 x 10^5 cells/vial
HDF-f 人真皮成纖維母細胞-胎兒 5 x 10^5 cells/vial
HDF-n 人真皮成纖維母細胞-新生 5 x 10^5 cells/vial
HDF-a 人真皮成纖維母細胞-成人 5 x 10^5 cells/vial
HHDPC 人毛乳頭細胞 5 x 10^5 cells/vial
HHGMC 人生發(fā)基質細胞 5 x 10^5 cells/vial
HHORSC 人毛囊外根鞘細胞 5 x 10^5 cells/vial
實驗過程：
一、試劑準備
1. DNA模板
2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
      10×PCR buffer             5μl
      dNTP mixl                 4μl
      引物1（10pM）               2μl
      引物2（10PM）              2μl
     Taq酶（2U/μl）            1μl
     DNA模板（50ng-1μg/μl）    1 μl
      加ddH2O至               50 μl
    視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，后在72℃ 保溫7min。
3．結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
檢測方法包括以下步驟：
(1)將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值，即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。
其中所述參照基因為本領域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域，其中所述質粒載體為本領域常規(guī)質粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。
步驟(2)為：待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值，即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。
其中所述待測目的基因為本領域常規(guī)待測目的基因，較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴增為本領域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。