產(chǎn)品屬于:
商品介紹:
細(xì)胞脂質(zhì)染色試劑盒(Nile Red)是用一種親脂性的紅色熒光探針進(jìn)行細(xì)胞中性脂質(zhì)染色。Nile Red對環(huán)境非常敏感,在以水為介質(zhì)的環(huán)境中,其熒光強(qiáng)度非常弱,在脂質(zhì)豐富的環(huán)境中具有強(qiáng)烈的熒光。 |
Nile Red 是非常的活體染料,它對細(xì)胞質(zhì)中的脂質(zhì)體具有更好的選擇性,在進(jìn)入細(xì)胞膜之前熒光非常弱,當(dāng)與細(xì)胞脂質(zhì)結(jié)合后其熒光強(qiáng)度大大增強(qiáng)。它進(jìn)入細(xì)胞膜后,在整個(gè)細(xì)胞擴(kuò)散,佳濃度時(shí)可以使整個(gè)細(xì)胞染色,將細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)體染成紅色。Nile Red被激發(fā)后可以發(fā)出紅色的熒光,具有很高的淬滅常數(shù)和激發(fā)態(tài)壽命。通過熒光顯微鏡和流式細(xì)胞
術(shù)來檢測細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)。
Nile Red通常不會(huì)明顯影響細(xì)胞的活力,因此被廣泛用于正向或逆向的,活的或固定的神經(jīng)等細(xì)胞或組織的示蹤劑或長期示蹤劑(long-term tracer)。除了簡單的細(xì)胞脂質(zhì)熒光標(biāo)記外,還可以用于檢測細(xì)胞的融合和粘附,檢測發(fā)育或移植過程中細(xì)胞遷移,通過FRAP(Fluorescence Recovery After Photobleaching)檢測脂在細(xì)胞膜上的擴(kuò)散,檢測細(xì)胞毒性和標(biāo)記脂蛋白等。
儲(chǔ)存條件:Nile Red染色液2-8℃避光保存;長期不用-20℃保存;試劑B 2-8℃保存。
有效期:一年。
培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
靈芝二英文名稱: 3-Phenoxybenzyl alcoholG基丁A型受體α4/GABAA Rα4抗體包裝25g
靈芝烯D英文名稱: PectinG基丁A型受體α6/GABAA Rα6抗體包裝5g
凌霄花(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Tributyl phosphate磷化γ1基丁受體GABAA Rβ1抗體包裝1g
羚羊角(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Tributyl phosphateG基丁受體β2/GABAA Rβ2抗體包裝25g
硫基葡萄糖(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Tributyl phosphateG蛋白偶聯(lián)受體17抗體包裝5g
硫長春質(zhì)堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: BentoniteG蛋白偶聯(lián)受體102抗體包裝25mg
硫黃連堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: BentoniteG蛋白偶聯(lián)受體136抗體包裝1g
硫氫小檗堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Activated charcoalG蛋白偶聯(lián)受體126抗體包裝250mg
硫軟骨(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Activated charcoalG蛋白偶聯(lián)受體105抗體包裝50mg
硫小檗堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Activated charcoalG蛋白偶聯(lián)受體C5B抗體包裝250mg
柳穿魚黃(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Activated charcoalG蛋白偶聯(lián)受體33抗體包裝100g
龍膽(堅(jiān)龍膽)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Activated charcoal谷受體紅藻離子1抗體包裝25g
龍膽(龍膽)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Activated charcoal一般受體磷肌相關(guān)支架蛋白1抗體包裝5g
龍膽花(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Activated charcoal谷受體紅藻離子5抗體包裝1g
龍膽苦苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Activated charcoal棕櫚酰轉(zhuǎn)移GODZ抗體包裝5g
密蘇里游動(dòng)放線菌Actinoplanes│missourieneis 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品前纖維蛋白1elisa試劑盒毛冬青;I1exo1ic acid
咸海鮮芽孢桿菌Bacillus│jeotgali 質(zhì)量規(guī)格:≥98.5%,BR,可用于培養(yǎng)前鐵調(diào)試劑盒馬兜鈴內(nèi)酰;Aristolactam
釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品前列腺性磷試劑盒沒食子兒茶沒食子酯; (-)-Gal
細(xì)胞脂質(zhì)染色試劑盒維生K4
其他1,4-二乙酰氧基-2-甲基萘;2-甲基-1,4-萘二酚雙醋酯;抗出血病維生;維他命K4;2-甲基-1,4-萘酚乙酯;二乙酰甲萘;乙酰甲萘醌
英文名稱:VK4
其他英文名稱:1,4-Diacetoxy-2-methylnaphthalene;2-Methyl-1,4-Naphthalenediol diacetate
產(chǎn)品規(guī)格:BR,98%
包裝:25克/100克/500克
CAS號:573-20-6
C15H14O4=258.27
級別:BR
含量:≥98.0%(GC)
熔點(diǎn):111~115℃
性狀:粉末,性質(zhì)較穩(wěn)定,幾乎不溶于水,微溶于冷乙,能溶于沸乙
用途:生化研究。
重金屬:≤10ppm
水份:≤4.0%
氯化物:≤0.4%
性狀:粉末,易溶于水,水中溶解度2500 g/L (20℃);不溶于、;溶于熱乙
用途:生化研究。能夠促進(jìn)脂肪的分解,在長鏈脂肪的代謝中起著重要作用??梢源龠M(jìn)線粒體的脂肪氧化作用并且達(dá)到其他生化功能
保存:2~8℃
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。