培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
產(chǎn)品屬于:
商品介紹:
Sirtinol是sirtuin的抑制劑,24小時(shí)內(nèi)抑制MCF-7細(xì)胞生長的IC50值為48.6μM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:410536-97-9 純度:98.0% 分子量:394.47 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
產(chǎn)氣腸桿菌(現(xiàn)1)抑制A/Inhibin α抗體Human RBM24(RNA Binding Motif Protein 24) ELISA Kit腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體受體3(TRAIL-R3)ELISA試劑盒
布魯氏菌雞傳染性喉氣管炎病糖蛋白E抗體Human RBMS2 ELISA Kit腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體受體2(TRAIL-R2/DR5)ELISA試劑盒
不規(guī)則鹽海菌小腸型脂肪結(jié)合蛋白抗體Human RBM25 ELISA Kit腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體4(TRAIL-R4)ELISA試劑盒
金針菇(毛柄金錢菌、冬菇)白介-7受體a抗體Human RBM26 ELISA Kit腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體3(TRAIL-R3)ELISA試劑盒
畫眉草彎孢整合α3抗體Human RBP2 ELISA Kit腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體1(TRAIL-R1)ELISA試劑盒
殼菌整合β5抗體Human ABCB5(ATP-binding cassette sub-family B member 5) ELISA Kit腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體(sTRAIL)ELISA試劑盒
枯草芽胞桿菌整合α1抗體Human RBMX2 ELISA Kit腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子6(TRAF6)ELISA試劑盒
紫紅曲霉白介2受體β鏈抗體 IL-2RβHuman RBM39 ELISA Kit腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子1(TRAF1)ELISA試劑盒
pBlueScript SK(+)干擾α2b抗體Human RBM28 ELISA Kit腫瘤壞死因子受體超家族成員18(TNFRSF18)ELISA試劑盒
馬賽菌屬誘導(dǎo)協(xié)同激分子配體CD275抗體Human RBM4 ELISA Kit腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)ELISA試劑盒
狹霉鏈霉菌雞傳染性法氏囊病病抗體Human RBM42 ELISA Kit腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)ELISA試劑盒
冷溫木拉克酵母白介-17抗體Human RBM46 ELISA Kit腫瘤壞死因子超家族15(TL1A/TNFSF15)ELISA試劑盒
松口蘑5'肌苷磷脫氫2抗體Human RBM41 ELISA Kit腫瘤壞死因子γ(TNFγ)ELISA試劑盒
大豆慢生根瘤菌即刻早期應(yīng)答基因5樣蛋白抗體Human RASGRP3(Ras guanyl-releasing protein 3) ELISA Kit腫瘤壞死因子β(TNF-β)ELISA試劑盒
腸球菌屬整合αV抗體Human RBM14 ELISA Kit腫瘤壞死因子β(TNFβ)ELISA試劑盒
泡盛曲霉白介-19抗體Human RBM15 ELISA Kit腫瘤壞死因子α轉(zhuǎn)化(TACE)ELISA試劑盒
鼠李糖乳桿菌Lactobacillus│rhamnosus GG 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(GC),標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)升麻-3-O-β-D-吡喃木糖苷
: =ATCC10844=LMG2210資源名稱: 邊緣假單胞菌邊緣致病變種 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(GC),標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)仙鶴草酚B
米氏假單胞菌Pseudomonas│migulae 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(GC),標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)馬錢苷
sirtuin抑制劑(Sirtinol)麗絲胺羅丹明B
其他性羅丹明B;性紅52;二甲紅B;麗絲胺玫瑰紅B;里斯沙明玫瑰紅B200;李斯曼羅丹明B;李斯曼若丹明B;麗絲胺堿性蕊香紅B200;性玫瑰紅B;性桃紅B;柴林紅B;磺化羅丹明B;奇通紅S;硫羅丹明B
英文名稱:Lissamine rhodamine B
其他英文名稱:Sulforhodamine B;Lissamine rhodamine B200;Lissamine rhodamin;Acid rhodamine B;Xylene red B;Acid Red 52;Sulforhodamine B monosodium salt
產(chǎn)品規(guī)格:BS
包裝:25克
產(chǎn)品規(guī)格:高純,75%
包裝:25克/100克/500克
CAS號:3520-42-1
C27H29N2NaO7S2=580.65
級別:BS
級別:High purity grade
性狀:綠色或褐色晶體或結(jié)晶粉末。
用途:生化研究。
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