詳細(xì)介紹
操作規(guī)程:
1、在96孔板加入細(xì)胞00μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升5000~0000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及00%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×00
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時(shí)的藥物濃度(IC90)
中文名稱(chēng):細(xì)胞膜完整性檢測(cè)試劑盒
英文名稱(chēng):
產(chǎn)品規(guī)格:500T
發(fā)貨周期:1~3天
E42細(xì)胞膜完整性檢測(cè)試劑盒是利用E系列探針進(jìn)行細(xì)胞染色的試劑盒。本試劑盒中的E42 細(xì)胞染色探針為紅色熒光標(biāo)記的細(xì)胞探針,具有550/683nm 的大激發(fā)/發(fā)射波長(zhǎng)。 E42探針是對(duì)細(xì)胞膜損傷細(xì)胞進(jìn)行染色的試劑,不能穿透正常細(xì)胞膜,只有當(dāng)細(xì)胞膜完整性受到影響時(shí)才可以染色細(xì)胞,進(jìn)入細(xì)胞后會(huì)與細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)緊密結(jié)合,可有效標(biāo)記膜不完整細(xì)胞。 |
儲(chǔ)存條件:染料-20℃避光保存;避免反復(fù)凍融;稀釋液2-8℃保存。
有效期:一年。
注意事項(xiàng):
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開(kāi)蓋時(shí)試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長(zhǎng)時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會(huì)增加空白吸收,從而影響檢測(cè)結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來(lái)配制待檢測(cè)藥物。如果待測(cè)藥物有還原性,則測(cè)定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測(cè)藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對(duì)較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測(cè)。
9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長(zhǎng)短根據(jù)細(xì)胞的類(lèi)型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定,對(duì)于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長(zhǎng)時(shí)間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測(cè),MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
龍膽;2,5-二羥基(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Activated charcoalG蛋白信號(hào)調(diào)節(jié)蛋白1抗體包裝50mg
龍脷葉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Activated charcoalG基丁受體β2+3/GABAA Rβ2+GABAA Rβ2抗體包裝25g
龍腦(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Activated charcoalG蛋白α抗體包裝5g
植提標(biāo)準(zhǔn)品英文名稱(chēng): Activated charcoalG蛋白β樣蛋白抗體包裝100g
龍血竭(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): 通用轉(zhuǎn)錄因子GTF2B抗體包裝25g
龍血A(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Molecular sieves Type 13X磷化gp130抗體包裝5g
龍芽楤木(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Molecular sieves Type 13X糖脂轉(zhuǎn)移蛋白結(jié)構(gòu)域2抗體包裝1g
龍眼肉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Molecular sieves Type 13X高爾基體膜相關(guān)蛋白6樣蛋白4抗體包裝5g
漏蘆(祁州漏蘆)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Molecular sieves Type 13X胞漿區(qū)相關(guān)蛋白GIPC2抗體包裝5g
蘆丁/蕓香葉苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Molecular sieves Type 13X糖基轉(zhuǎn)移8結(jié)構(gòu)域1抗體包裝100mg
蘆根(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Molecular sieves Type 13X促代謝型谷受體2抗體包裝500mg
蘆薈(好望角蘆薈)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Molecular sieves, 3 ?G蛋白修補(bǔ)結(jié)構(gòu)域蛋白5抗體包裝1g
蘆薈大黃(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Molecular sieves, 3 ?β1-6 N-乙?;咸烟寝D(zhuǎn)移6抗體包裝500mg
蘆薈苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Molecular sieves, 3 ??;?β-基乙磺抗體包裝1g
蘆薈苷B(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Molecular sieves, 3 ?赤霉抗體包裝1g
異常畢赤酵母Pichia anomala 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR前列腺H2試劑盒棉籽糖;Raffinose
平菇(漢玉美平)Pleurotus│ostreatus (Jacq.) P. Kumm. 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定前列腺F2α試劑盒馬來(lái);Maleic acid
釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,EP6.5 前列腺F試劑盒麥冬皂苷B;Ophiopogonin B
細(xì)胞膜完整性檢測(cè)試劑盒維生K3
其他甲萘醌;2-甲基-1,4萘二;2-甲基-1,4-萘醌;2-甲萘醌;β-甲萘醌;2-甲基-1,4-萘酚喹;2-甲基-1,4-萘酚喹;2甲基萘醌;甲奈醌
英文名稱(chēng):VK3
其他英文名稱(chēng):Menadione
產(chǎn)品規(guī)格:BR,98%
包裝:10克/25克/100克
CAS號(hào):58-27-5
C11H8O2=172.18
含量:≥98.0%
熔點(diǎn):105~107℃
鑒別:合格
PH:5.5~8.0
干燥失重:≤0.5%
熾灼殘?jiān)?/span>≤0.1%
重金屬:≤30ppm
性狀:粉末,無(wú)臭,味稍苦。在相對(duì)濕度90%以上時(shí)微有吸濕性。1g溶于1ml水、1.5ml乙和10ml甘油。大吸收波長(zhǎng)261nm(E1%1cm451)。半數(shù)致死量(大鼠,皮下)1.68g/kg
用途:生化研究。配制組織培養(yǎng)基。
保存:RT,避光