詳細(xì)介紹
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:猴痘病毒PCR試劑盒
產(chǎn)品貨號(hào):FS-P013434
產(chǎn)品規(guī)格: 50次
產(chǎn)品分類:純化試劑盒
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
實(shí)驗(yàn)過(guò)程:
一、試劑準(zhǔn)備 1. DNA模板 2.對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無(wú)到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 二、操作步驟 1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。 2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。 3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。 4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。 |
注意事項(xiàng)
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個(gè)檢測(cè)過(guò)程應(yīng)嚴(yán)格按照本說(shuō)明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解,樣本處理過(guò)程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè);樣本處理過(guò)程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過(guò)無(wú)核酶處理。
3.每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽(yáng)性對(duì)照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽(yáng)性對(duì)照在第一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6.為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7.儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說(shuō)明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號(hào)試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9.實(shí)驗(yàn)過(guò)程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無(wú)害化處理后方可丟棄。
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
3.樣本孔中加入待測(cè)樣本50μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。
LIMK1 /FITC 熒光標(biāo)記單絲蛋白激1抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
STK/CK II Alpha/FITC 熒光標(biāo)記屬絲/蘇蛋白質(zhì)激抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Adropin 能量平衡相關(guān)蛋白抗體 0.2ml
Rabbit Goat IgM/APC APC標(biāo)記的兔抗羊IgM 0.1ml
GABA A Receptor beta 2 + 3 G基丁受體β2+3/GABAA Rβ2+GABAA Rβ2抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit dog IgG/Cy3 Cy3標(biāo)記的兔抗狗IgG 0.1ml
STK/CK II Alpha/FITC 熒光標(biāo)記屬絲/蘇蛋白質(zhì)激抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Flt-3L(Human FMS-like tyrosine kinase 3 ligand) ELISA Kit 人FMS樣酪激3配體Multi-class antibodies: 48T
Os05g0477200 protein 稻白葉枯病菌Os05g0477200蛋白抗體Multi-class antibodies: 1ml
Rhesus antibody Rh ICAD/DFF-45 Beta Caspase激活的脫氧核糖核抑制劑抗體 0.1ml
PAI-1 ELISA Kit 大鼠纖溶原激活物抑制因子1 96T
PTPRD 酪磷PTPδ抗體 蛋白酪磷D受體抗體 0.2ml
C17orf49 17號(hào)染色體開放閱讀框49抗體 0.2ml
Os05g0477200 protein 稻白葉枯病菌Os05g0477200蛋白抗體Multi-class antibodies: 1ml
Rabbit rat IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標(biāo)記的兔抗大鼠IgG 0.1ml
GNLY 顆粒溶抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Apg10 自噬相關(guān)蛋白10抗體 0.2ml
IL-17/FITC 熒光FITC標(biāo)記白介-17抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit human IgM/RBITC 羅丹明標(biāo)記的兔抗人IgM 0.3ml
Rabbit -mouse IgA/HRP 辣根過(guò)氧化物標(biāo)記兔抗小鼠IgA抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
猴痘病毒PCR試劑盒帚狀曲霉種屬: Aspergillus│penicilloides提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0016生長(zhǎng)條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
冠霉鏈霉菌種屬: Streptomyces│chrestomyceticus提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: Type strain; Produces aminocidin培養(yǎng)基: 0331生長(zhǎng)條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
施氏假單胞菌種屬: Pseudomonas stutzeri分離基物: 人類的腦脊髓液提供形式: 凍干粉安全等級(jí): 1模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 模式菌株、分類研究,減少嘧啶類培養(yǎng)基: NB生長(zhǎng)條件: 37℃,24H,陰性桿菌,菌種純。
斯達(dá)氏油脂酵母種屬: Lipomyces│starkeyi分離基物: 油井提供形式: 斜面培養(yǎng)物;凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 發(fā)酵產(chǎn)油脂培養(yǎng)基: 13生長(zhǎng)條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
神經(jīng)膠質(zhì)纖維性蛋白(GFAP)ELISA試劑盒丁香油 顯微鏡用2-甲基丁乙酯 98%阿莫曲普坦蘋果鹽
神經(jīng)降壓(NT)ELISA試劑盒檸檬 97%乙丁香酚酯 98%阿糖腺苷
神經(jīng)激肽B(NKB)ELISA試劑盒檸檬 ≥96%,F(xiàn)CC反-3-己烯乙酯 98%阿糖腺苷(標(biāo)準(zhǔn)品)
神經(jīng)穿透1(NPTX-1)ELISA試劑盒肉桂 CP,98%呋喃酮 98%氨芐西林/氨芐青霉
神經(jīng)保護(hù)因子(CVNPF)ELISA試劑盒肉桂 standard for GC,>99.5% (GC) 呋喃酮 ≥98%, FCC, FG氨芐西林/氨芐青霉(標(biāo)準(zhǔn)品)
神經(jīng)氨(NA)ELISA試劑盒肉桂 AR,99%呋喃酮 natural, ≥98%, FG(S)-1-氨基-3-甲基丁基蒎二酯三氟醋鹽
上皮中性粒活化肽78(ENA-78/CXCL5)ELISA試劑盒肉桂 分析標(biāo)準(zhǔn)品檸檬 97%阿替美唑鹽鹽
上皮中性?;罨?/span>78(ENA-78)ELISA試劑盒肉桂 98%檸檬 97%, FCC, Kosher阿替美唑鹽鹽(標(biāo)準(zhǔn)品)
上皮粘附分子(Ep-CAM/CD362)ELISA試劑盒肉桂 分析標(biāo)準(zhǔn)品,>99.5%(GC)香葉 98%硫阿托品/硫DL-莨菪
上皮黏附分子(Ep-CAM)ELISA試劑盒肉桂 ≥99.0%, FG香葉 97%硫阿托品(標(biāo)準(zhǔn)品)
上皮特異性抗原(ESA)ELISA試劑盒肉桂 天然, ≥99%, FCC香葉 Standard for GC, ≥99.0% (GC)馬來(lái)阿扎他啶
上皮膜抗原(EMA)ELISA試劑盒香茅 85%,FCC乙香葉酯 96%鹽班布特羅(標(biāo)準(zhǔn)品)
傷寒抗原(St-Ag)ELISA試劑盒香茅 96%乙香葉酯 90%,天然, FCC, Kosher 鹽班布特羅
傷寒抗體(St-Ab)ELISA試劑盒肉桂 98%香葉基酮 97%鹽乙丁
山梨脫氫(SDH)ELISA試劑盒肉桂 分析標(biāo)準(zhǔn)品,>99%(GC)甲香葉酯 85%鹽乙?。?biāo)準(zhǔn)品)
沙眼衣原體抗原(CT)ELISA試劑盒正癸 Standard for GC,≥99.5% (GC)甲香葉酯 85%,FCC, Kosher鹽芐絲肼