中文名稱(chēng):Caspase 3分光光度法檢測(cè)試劑盒
英文名稱(chēng):Caspase-3 Colorimetric Assay Kit
產(chǎn)品規(guī)格:20T|50T|100T
發(fā)貨周期:1~3天
本試劑盒適用于培養(yǎng)細(xì)胞及新鮮組織caspase-3 檢測(cè)。Caspase 家族在介導(dǎo)細(xì)胞凋亡的過(guò)程中起著非常重要的作用,其中caspase-3 為關(guān)鍵的執(zhí)行分子,與DNA 斷裂、染色質(zhì)凝聚和凋亡小體形成有關(guān)。Caspase-3 在正常狀態(tài)下以酶原的形式存在于胞漿中,沒(méi)有活性;但在細(xì)胞發(fā)生凋亡階段,它被激活,活化的Caspase-3 由兩個(gè)大亞基和兩個(gè)小亞基組成,裂解相應(yīng)的胞漿胞核底物,最終導(dǎo)致細(xì)胞凋亡。Caspase-3 分光光度法檢測(cè)試劑盒就是將caspase-3 序列特異性的多肽偶聯(lián)至發(fā)色基團(tuán)。當(dāng)該底物被Caspase-3 剪切后,發(fā)色基團(tuán)即游離出來(lái),可通過(guò)酶標(biāo)儀或分光光度計(jì)(λ=405nm或400nm)測(cè)定其吸光值,考察caspase-3 的活化程度。 |
注意事項(xiàng)
1. Caspase-3 Substrate 避光保存及使用。
2. 對(duì)某些凋亡誘導(dǎo)劑引起的細(xì)胞凋亡可能存在非依賴(lài)于Caspase-3 活化的機(jī)制,這種情況時(shí)利用本試劑盒檢測(cè)Caspase-3 活性無(wú)明顯改變,需要考慮凋亡機(jī)制中的其他信號(hào)通路。
3. 細(xì)胞數(shù)量需達(dá)到3~5×106 個(gè)或新鮮組織50~100mg,以便能達(dá)到測(cè)定需要的100~200μg 蛋白的要求,因?yàn)镃aspase-3 的活性與細(xì)胞裂解液的蛋白含量有關(guān),如測(cè)定的OD 值偏低,可通過(guò)增加細(xì)胞數(shù)量或組織量的方法來(lái)提高蛋白量。
注意事項(xiàng):
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開(kāi)蓋時(shí)試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長(zhǎng)時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會(huì)增加空白吸收,從而影響檢測(cè)結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來(lái)配制待檢測(cè)藥物。如果待測(cè)藥物有還原性,則測(cè)定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測(cè)藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對(duì)較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測(cè)。
9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長(zhǎng)短根據(jù)細(xì)胞的類(lèi)型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定,對(duì)于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長(zhǎng)時(shí)間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測(cè),MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白B(SP-B)elisa試劑盒英文名稱(chēng):SP-B ELISA Kit芳香基硫酸酯酶家族蛋白1抗體包裝1g
肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)elisa試劑盒英文名稱(chēng):SP-A ELISA Kit腫瘤抑制相關(guān)蛋白PHEMX抗體包裝5g
肺表面活性蛋白D(SP-D)elisa試劑盒英文名稱(chēng):SP-D ELISA Kit精神分裂癥與犰狳重復(fù)基因抗體包裝1g
肥大細(xì)胞類(lèi)胰蛋白酶(MCT)elisa試劑盒英文名稱(chēng):MCT ELISA Kit乙脫氫酶1型抗體包裝25g
肥大/干細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體(Kit/Sl/CD117)elisa試劑盒英文名稱(chēng):Kit/Sl/CD117 ELISA Kit磷酸化乙酰羧化酶抗體包裝5g
芳香酶(ARO)elisa試劑盒英文名稱(chēng):ARO ELISA Kit磷酸化乙酰羧化酶抗體包裝100g
泛素蛋白(Ub)elisa試劑盒英文名稱(chēng):Ub ELISA Kit磷酸化腺苷三磷酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體A1抗體包裝25g
二酰基甘油(DAG/DG)elisa試劑盒英文名稱(chēng):DAG/DG ELISA Kit磷酸化鐵調(diào)節(jié)蛋白1抗體包裝500g
二肽基肽酶Ⅳ(DPPⅣ)elisa試劑盒英文名稱(chēng):DPPⅣ ELISA Kit磷酸化鐵調(diào)節(jié)蛋白1抗體包裝1g
二胺氧化酶(DAO)elisa試劑盒英文名稱(chēng):DAO ELISA Kit磷酸化乙酰羧化酶抗體包裝5g
兒茶酚抑素(CAT)elisa試劑盒英文名稱(chēng):CAT ELISA Kit膜粘連蛋白6抗體包裝100mg
兒茶酚胺(CA)elisa試劑盒英文名稱(chēng):CA ELISA Kit錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白42抗體包裝500mg
多萜長(zhǎng)醇二磷酸寡糖蛋白環(huán)糊精糖基轉(zhuǎn)移酶(DDOST/OST-48)elisa試劑盒英文名稱(chēng):DDOST/OST-48 ELISA Kit胞環(huán)蛋白肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白抗體包裝25MG
多肽YY(PYY)elisa試劑盒英文名稱(chēng):PYY ELISA Kit腺病5結(jié)合蛋白BS69抗體(骨形態(tài)發(fā)生蛋白受體相關(guān)分子1)包裝5MG
多巴胺D1受體(D1R)elisa試劑盒英文名稱(chēng):D1R ELISA Kit載脂蛋白A1抗體包裝1g
銜接蛋白α-Adaptin抗體結(jié)締組織生長(zhǎng)因子(CTGF)3-Methyladenine (3-MA) is a selective PI3K inhibitor for Vps34 and PI3Kγ with IC
Caspase 3分光光度法檢測(cè)試劑盒月桂酸
其他 十二酸;正十二酸;十二烷酸
英文名稱(chēng): Lauric acid
其他英文名稱(chēng): Dodecanoic acid;Laurostearic acid;Dodecoic acid;Hendecane-1-carboxylic acid;Undecane-1-carboxylic acid;Carboxylic acid C12
產(chǎn)品規(guī)格: 色標(biāo),99%
包裝:5克
產(chǎn)品規(guī)格: CP,98%
包裝:250克
CAS號(hào):143-07-7
C12H24O2=200.32
級(jí)別:色標(biāo)
含量:≥99.0%
熔點(diǎn):41~44℃
級(jí)別:CP
含量:98.0~101.0%
熔點(diǎn):41~45℃
灼燒殘?jiān)?/span>≤0.05%
性狀:針狀結(jié)晶或粉末。微有月桂油香。易溶于苯和醇,微溶于丙酮和石油醚。1g溶于1ml乙醇、2.5ml丙醇,不溶于水。半數(shù)致死量(小鼠,靜脈)131±5.7mg/kg。密度:0.869;沸點(diǎn):298℃;閃點(diǎn): 156℃
用途:生化研究。醇酸樹(shù)脂及潤(rùn)濕劑、洗滌劑、殺蟲(chóng)劑的制備
保存:RT
操作規(guī)程:
1、在96孔板加入細(xì)胞00μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升5000~0000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及00%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×00
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時(shí)的藥物濃度(IC90)