化工儀器網(wǎng)
詳細介紹
培養(yǎng)操作步驟：
1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
產(chǎn)品屬于：
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
Cell Apoptosis Detection Kit(PI) | 100T | 1～3天 |
商品介紹：
熒光標記是研究細胞凋亡的基本方法。細胞凋亡的形態(tài)學變化及生化學變化都可以通過熒光標記的的方法而檢測出來，從而區(qū)別鑒別出正常細胞、凋亡細胞、壞死細胞以及不同凋亡時期或細胞周期。 碘化丙啶（Propidium Iodide, PI）是一種DNA 結(jié)合性染料，其激發(fā)和發(fā)射波長分別為536nm 和617nm，產(chǎn)生紅色熒光，但無膜通透性，不能透過活細胞膜，只能染死細胞。 |
在熒光顯微鏡下觀察，正常細胞不能著色，早期凋亡細胞呈微弱紅光，晚期凋亡細胞紅光加強，壞死細胞呈強紅色熒光。采用流式細胞儀檢測細胞周期時，凋亡細胞因內(nèi)源性核酸酶被激活，使DNA 廣泛降解、斷裂，DNA 結(jié)構(gòu)發(fā)生劇變，隨著凋亡的進程，DNA 斷裂產(chǎn)生的小分子量DNA 溢出胞外，細胞總DNA 量降低，于正常G0/G1 細胞群前出現(xiàn)一DNA 低染細胞群，即G1 峰前出現(xiàn)亞二倍體峰（sub-G1）或稱A0 細胞群，即凋亡細胞群。用本試劑盒的PI 直接對細胞DNA 染色后，進行流式細胞儀分析，即可檢測到凋亡細胞DNA的變化。
儲存：2-8℃，避光，有效期一年。
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大??；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
大葉紫珠（標準品）英文名稱： Bromophenol red, sodium saltFAM153B蛋白抗體包裝5g
大棗（標準品）英文名稱： Butyl stearateFAM46C蛋白抗體包裝25ml
大皂角（標準品）英文名稱： C10E6舌癌耐藥相關(guān)蛋白1包裝1g
玳瑁（標準品）英文名稱： C12E10FAM129B蛋白抗體包裝5g
丹參（標準品）英文名稱： C12E9微管動力調(diào)節(jié)蛋白2抗體包裝1g
丹參(標準品)英文名稱： Calcium chloride, anhydrousFAM50A蛋白抗體包裝5g
丹參鈉(標準品)英文名稱： Calcium oxalate, monohydrateFAM113A蛋白抗體包裝5mg
丹參IIA(標準品)英文名稱： Calcium oxide (Lime) powderFAM150A蛋白抗體包裝25ml
丹參IIA-磺鈉(標準品)英文名稱： Calcium oxide lumpFRMD8蛋白抗體包裝5ml
丹參I（標準品）英文名稱： Calcium phosphate, monobasic, monohydrateFGFR1癌基因伴侶蛋白抗體包裝1g
丹酚A（標準品）英文名稱： Calcium pyrophosphateFAM家族蛋白40A抗體包裝5g
丹酚B（標準品）英文名稱： Canada balsamFAM55D蛋白抗體包裝1g
丹酚B二酯英文名稱： Caprolactam組織激活過氧化活化增生受體γ蛋白抗體包裝25g
丹酚C（標準品）英文名稱： Carboxypeptidase YFAM21C蛋白抗體包裝5g
丹酚D(標準品)英文名稱： Castor oilFAM13C1蛋白抗體包裝1g
鏈霉菌屬菌種Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR神經(jīng)粘附分子配體1試劑盒去氫吳茱萸堿;Dehydroevodia
豬霍亂沙門氏菌Salmonella│choleraesuis 質(zhì)量規(guī)格：BR神經(jīng)特異性烯化試劑盒去澤拉木 ;Demethylzeyl
季氏畢赤酵母Pichia│guilliermondii 質(zhì)量規(guī)格：>98%，進口分裝神經(jīng)肽Nesfatin-1 elisa試劑盒13-去羥基印烏堿 ; 13-Dehyd
碘化丙啶PI染色試劑盒伍德合金
其他 鉍鉛錫鎘合金；伍氏金；武德金
英文名稱： Wood’s metal
其他英文名稱： Wood’s metal fusible
產(chǎn)品規(guī)格： AR
包裝：500克
CAS號：76093-98-6
級別：AR
結(jié)晶點：70.0～72.0℃
性狀：灰粒狀固體。有光澤金屬。由鉍50％、鉛26.7％、錫13.3％、鎘 10％所組成的低熔點合金。熔點 70℃。
用途：生化研究。灑水噴灑系統(tǒng)。閥裝置
保存：RT
化工儀器網(wǎng)