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上海撫生實(shí)業(yè)有限公司 |
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| 參考價(jià) | 面議 |
更新時(shí)間：2022-04-20 11:17:18瀏覽次數(shù)：183
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 25mg |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | FS-X9641 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
| 主要用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
中文名稱：細(xì)胞增殖示蹤熒光探針
英文名稱：CFDA, SE
產(chǎn)品規(guī)格：25mg
發(fā)貨周期：1～3天
CFDA, SE，英文全稱Carboxyfluorescein diacetate, succinimidyl ester，是一種可對活細(xì)胞進(jìn)行熒光標(biāo)記的細(xì)胞示蹤染料，不僅可用于細(xì)胞增殖的體外實(shí)驗(yàn)，還可用于追蹤細(xì)胞在體內(nèi)的分裂增殖過程。 CFDA, SE是二乙酸熒光素（Fluorescein diacetate，F(xiàn)DA）的衍生物，具細(xì)胞膜滲透性，本身不具有熒光發(fā)光性。當(dāng)通過被動(dòng)運(yùn)輸穿透細(xì)胞膜進(jìn)入活細(xì)胞后，可被胞漿內(nèi)的酯酶催化生成羧基熒光素琥珀酰亞胺酯（carboxyfluorescein succinimidyl ester，CFSE），可發(fā)強(qiáng)烈的綠色熒光，不能穿透細(xì)胞膜，能完好的保留在胞內(nèi)。CFSE還可自發(fā)性并不可逆地與細(xì)胞內(nèi)的氨基結(jié)合從而偶聯(lián)到細(xì)胞蛋白質(zhì)上，同時(shí)過量且未被偶聯(lián)的CFDA, SE通過被動(dòng)擴(kuò)散回到細(xì)胞外培養(yǎng)基內(nèi)，被后續(xù)清洗步驟所清除。經(jīng)CFDA, SE標(biāo)記的非分裂細(xì)胞的熒光非常穩(wěn)定，穩(wěn)定標(biāo)記的時(shí)間可達(dá)數(shù)月，因此非常適用于細(xì)胞群落分析。 |
CFDA, SE標(biāo)記細(xì)胞的熒光非常均一，優(yōu)于以前使用的其他細(xì)胞示蹤熒光探針如PKH26，并且分裂后的子代細(xì)胞的熒光分配也更均一。在細(xì)胞分裂增殖過程中，CFSE 標(biāo)記熒光可平均分配至兩個(gè)子代細(xì)胞中，熒光強(qiáng)度變?yōu)橛H代細(xì)胞的一半，通過流式細(xì)胞儀（FL1通道）根據(jù)熒光強(qiáng)度的不同，可檢測出未分裂細(xì)胞，分裂一次（1/2的熒光強(qiáng)度），二次（1/4的熒光強(qiáng)度），三次（1/8的熒光強(qiáng)度），以及更多分裂次數(shù)的細(xì)胞。CFSA，SE可檢測分裂次數(shù)多達(dá)八次甚至更多。經(jīng)CFDA, SE標(biāo)記的細(xì)胞可用于體外和體內(nèi)增殖研究，且具有不會(huì)使鄰近細(xì)胞染色的功能。CFDA, SE常用于淋巴細(xì)胞的增殖檢測，也可用于成纖維細(xì)胞，自然殺傷細(xì)胞，造血祖細(xì)胞等其他細(xì)胞的增殖檢測。
CFDA, SE標(biāo)記細(xì)胞呈綠色熒光，Ex=494nm，Em=521nm，除了流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞增殖外，還可用熒光酶標(biāo)板定量活細(xì)胞數(shù)目，或者用熒光顯微鏡進(jìn)行均一染色的細(xì)胞示蹤觀察。本品以粉末形式提供，需用DMSO制備儲(chǔ)存液后再使用。
注意事項(xiàng)：
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用，不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底，避免開蓋時(shí)試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用，否則會(huì)影響使用效果。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融，否則將會(huì)增加空白吸收，從而影響檢測結(jié)果。最好小劑量分裝，用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性，則測定不含細(xì)胞，僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小，則可以直接加入 MTS ，如果吸光度相對較大，則需要除去培養(yǎng)基，并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次，然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測。
9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定，對于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可，白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長時(shí)間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測，MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
操作規(guī)程：
1、在96孔板加入細(xì)胞00μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升5000～0000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0～0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及00%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×00
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時(shí)的藥物濃度(IC90)
狀腺結(jié)合球蛋白(TBG)elisa試劑盒英文名稱：TBG ELISA Kit19號(hào)染色體開放閱讀框61抗體包裝5g
狀腺激受體交互子6(TRIP6)elisa試劑盒英文名稱：TRIP6 ELISA Kit19號(hào)染色體開放閱讀框77抗體包裝100g
狀旁腺受體2(PTHR2)elisa試劑盒英文名稱：PTHR2 ELISA Kit核DNA結(jié)合蛋白C1D抗體包裝25g
胎蛋白(αFP)elisa試劑盒英文名稱：αFP ELISA Kit1號(hào)染色體開放閱讀框58抗體包裝25g
基CpG結(jié)合蛋白2(MECP2)elisa試劑盒英文名稱：MECP2 ELISA Kit21號(hào)染色體開放閱讀框66抗體包裝5g
己糖激1(HK1)elisa試劑盒英文名稱：HK1 ELISA KitCDC42效應(yīng)蛋白3抗體包裝25g
幾丁質(zhì)1(CHIT1)elisa試劑盒英文名稱：CHIT1 ELISA Kit7號(hào)染色體開放閱讀框43抗體包裝5g
激肽原1(KNG1)elisa試劑盒英文名稱：KNG1 ELISA Kit磷化非受體酪激c-Abl抗體包裝1g
激肽釋放7(KLK7)elisa試劑盒英文名稱：KLK7 ELISA Kit磷化非受體酪激c-Abl抗體包裝5g
激肽釋放5(KLK5)elisa試劑盒英文名稱：KLK5 ELISA Kit磷化非受體酪激c-Abl抗體包裝10MG
激肽釋放4(KLK4)elisa試劑盒英文名稱：KLK4 ELISA Kit磷化非受體酪激c-Abl抗體包裝1g
激肽釋放3(KLK3)elisa試劑盒英文名稱：KLK3 ELISA Kit磷化非受體酪激c-Abl抗體包裝5g
激肽釋放1(KLK1)elisa試劑盒英文名稱：KLK1 ELISA Kit磷化非受體酪激c-Abl抗體包裝100g
激活AB(ACVAB)elisa試劑盒英文名稱：ACVAB ELISA Kit尾部結(jié)構(gòu)蛋白抗體包裝25g
激活A(ACVA)elisa試劑盒英文名稱：ACVA ELISA Kit5號(hào)染色體開放閱讀框19抗體包裝5g
天山中慢生根瘤菌Mesorhizobium│tianshanense 質(zhì)量規(guī)格：含量> 99%脂多糖結(jié)合蛋白試劑盒異七葉皂苷Ia;Isoescin Ia
根瘤菌Rhizobium│sp. 質(zhì)量規(guī)格：含量> 99%,BR,可用于培養(yǎng)脂多糖/內(nèi)試劑盒異紫堇定堿;(+)-Isocorynol
枯草芽孢桿菌Bacillus│subtilis 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品脂蛋白磷脂A2試劑盒24-乙酰澤瀉A;Alisol A 2
細(xì)胞增殖示蹤熒光探針乙-β-萘酯
其他乙-2-萘酯；醋-β-萘酯；乙2-萘基酯；β-乙萘酯；2-萘基乙酯；醋-2-萘酯；β-萘基乙酯
英文名稱：β-Napthyl acetate
其他英文名稱：2-Napthyl acetate
產(chǎn)品規(guī)格：CP
包 裝： 25克
CAS號(hào)：1523-11-1
C12H10O2=186.21
級(jí)別：CP
熔點(diǎn)：68～71℃（熔程2℃）
乙溶解試驗(yàn)：合格
灼燒殘?jiān)?/span>≤0.1%
性狀：淺紅色針狀結(jié)晶。對濕敏感。易溶于乙和，微溶于水。熔點(diǎn)70℃
性狀：至綠色或黃色薄片或粉末。能溶于水、乙和,水溶性280g/L(20℃),毒性LD50(mg/kg)：大鼠經(jīng)口LD50為1100,動(dòng)物實(shí)驗(yàn)有致癌及致畸作用,密度： 1.138
用途：生化研究。非選擇性除草劑及用于蛋白質(zhì)中色的測定。農(nóng)藥分析標(biāo)準(zhǔn)樣品
保存：RT
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