實(shí)驗(yàn)外包:
1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測(cè)、DNA甲基化檢測(cè)、生物信息學(xué)分析
2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測(cè):DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測(cè):Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測(cè):HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細(xì)胞分選
7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR
8.細(xì)胞及動(dòng)物模型:原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動(dòng)物模型構(gòu)建
組成及試劑配制:
1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋?zhuān)ㄗⅲ翰灰苯釉诎逯羞M(jìn)行倍比稀釋?zhuān)?,分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類(lèi)推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測(cè)稀釋液A:1×10ml。
使用方法:
一、稀釋PCR陽(yáng)性對(duì)照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個(gè)10倍稀釋度為例) 1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照,只提供可以直接使用的DNA片段作為陽(yáng)性對(duì)照。 2. 標(biāo)記6個(gè)離心管,分別為7,6,5,4,3,2。 3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專(zhuān)用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。 4. 在7號(hào)管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。 5. 換槍頭,在6號(hào)管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。 6. 換槍頭,在5號(hào)管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照到5號(hào)管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。 7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。 | 二、樣品DNA的制備 8. 如果有N個(gè)樣品,必須設(shè)置N+2個(gè)提取, 多出的一個(gè)是PC(樣品制備陽(yáng)性對(duì)照), 一個(gè)是NC(樣品制備陰性對(duì)照)。 可以用10μL上步制備的PCR陽(yáng)性對(duì)照的第4號(hào)(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于1萬(wàn)拷貝)或第5號(hào)(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于10萬(wàn)拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。 9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)病毒。 | 三、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,在樣品制備室進(jìn)行) 10. 如果只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個(gè)PCR管,其中N+2個(gè)用于上步得到的N+2個(gè)樣品,1個(gè)用于PCR陰性對(duì)照,6個(gè)用于PCR陽(yáng)性對(duì)照。如果做2-3次重復(fù),則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。 11. 產(chǎn)品僅用于科研在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對(duì)照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照,并且陽(yáng)性對(duì)照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲(chǔ)存好后加) |
PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無(wú)色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無(wú)RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見(jiàn)的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1ml試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無(wú)RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,測(cè)定RNA溶液 濃度和純度。
特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
CD8 大鼠CD8分子Multi-class antibodies: 48T
SUR1 磺酰脲類(lèi)受體1抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Goat Guinea pig IgG/RBITC 羅丹明標(biāo)記的羊抗豚鼠IgG 0.3ml
EMAb ELISA Kit 大鼠抗內(nèi)膜抗體 96T
NPC2 尼曼匹克C2前體蛋白抗體 0.2ml
BAAT 長(zhǎng)鏈脂肪?;鵄解抗體 0.2ml
SUR1 磺酰脲類(lèi)受體1抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
VD R(Human Vitamin D Receptor) ELISA Kit 人D受體Multi-class antibodies: 48T
PMS2 錯(cuò)配修復(fù)基因PMS2抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rhesus antibody Rh HER2/c-erbB2 HER2受體抗體 0.1ml
Beta-EP ELISA Kit 大鼠β內(nèi)啡肽 96T
Puratrophin 1 浦肯野細(xì)胞相關(guān)蛋白1抗體 0.2ml
C9ORF91 9號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框91抗體 0.2ml
PMS2 錯(cuò)配修復(fù)基因PMS2抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rabbit rat IgG/PE-Cy3 PE-Cy3標(biāo)記的兔抗大鼠IgG 0.1ml
GIMAP3 GTPIMAP家族成員3抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh APC/Adenomatous Polyposis Coli 腺瘤樣息肉抗體 0.1ml
IL-17C/FITC 熒光標(biāo)記白介-17C抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit human IgM/FITC FITC標(biāo)記的兔抗人IgM 0.3ml
RAM-11/FITC 熒光標(biāo)記抗RAM-11抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
流感嗜血桿菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒海黃桿菌種屬: Flavobacterium│ponti分離基物: 樣/海提供形式: 凍干物模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 模式菌株 產(chǎn)微生物/ 蛋白培養(yǎng)基: 471生長(zhǎng)條件: 25℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
熱帶假絲酵母種屬: Candida│tropicalis提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 13生長(zhǎng)條件: 25-28℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法
曲霉種屬: Aspergillus│sp.分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0014生長(zhǎng)條件: 25℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
百日咳博德特氏菌種屬: Bordetella│pertussis提供形式: 凍干物安全等級(jí): 2模式菌株: no培養(yǎng)基: CM0119生長(zhǎng)條件: 37℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法
髓性核分化抗原(MNDA)ELISA試劑盒叔丁 CP2-異基 97%去氧孕烯
髓系觸發(fā)受體-1(TREM-1)ELISA試劑盒三(4-基) 97%S(-)-2-甲基-1-丁 98%地索奈德
髓鞘相關(guān)糖蛋白抗體(MAG Ab)ELISA試劑盒烯酰, 96%,含~0.05% 噻吩穩(wěn)定劑D-脯氨甲酯鹽鹽 97%甲磺加貝酯
髓鞘相關(guān)糖蛋白(MAG)ELISA試劑盒乙酰 AR,98.5%吡啶-N-氧化物 95%甲磺加貝酯(標(biāo)準(zhǔn)品)
髓鞘性蛋白抗體(MBP)ELISA試劑盒正丁酰 98%(S)-(-)-1, 2, 4-丁三 98%地松,氟
髓鞘性蛋白抗體(MBP antibody)ELISA試劑盒代異 CP,97%L-絲氨乙酯鹽鹽 99%米松,氟(標(biāo)準(zhǔn)品)
髓鞘蛋白P0(MPZ)ELISA試劑盒代異 GR,99%D-色氨 97%鹽地爾硫卓
髓脂性蛋白(MBP)ELISA試劑盒乙酰 98%1-(2,4,6-三異基基磺酰)咪唑 98%鹽地爾硫卓(標(biāo)準(zhǔn)品)
髓脂P2蛋白(PMP2)ELISA試劑盒3-新戊酰 98%L-纈氨乙酯鹽鹽 98%地美司鈉
髓過(guò)氧化物特異性抗中性粒胞質(zhì)抗體IgG(MPO-ANCA IgG)ELISA試劑盒代正 99%N-α-芐氧羰基-L-2,4-二氨基丁 99%甲磺多拉
髓過(guò)氧化物(MPO)ELISA試劑盒二乙酰 98%防擴(kuò)散逆止閥 NN-62726.090甲磺多瓊(標(biāo)準(zhǔn)品)
性鐵蛋白(AIF)ELISA試劑盒三乙酯 97%2-乙酯 98%鹽多
性神經(jīng)鞘脂(ASM)ELISA試劑盒乙酯 AR,99% 5,6-二并咪唑(5,6-DBI) 99%鹽(標(biāo)準(zhǔn)品)
性(ACP)ELISA試劑盒異丁酰 98%甲 96% 鹽度洛西汀
性富亮氨核蛋白32家族成員E(ANP32E)ELISA試劑盒甲酯 AR,99.0%甲 99%鹽度洛西汀(標(biāo)準(zhǔn)品)
性成纖維生長(zhǎng)因子1(aFGF-1)ELISA試劑盒酯 99%基二膦 98%度他雄