詳細介紹
檢測原理:
產(chǎn)品僅用于科研試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
Bovine citrate synthase (CS) ELISA Kit | FS-B5864 |
ELISA試劑盒優(yōu)點:
1、*抗體----高效、靈敏、特異
2、規(guī)范包被操作----吸附均勻,吸附性好,空白值低,孔底透明度高
3、良好的優(yōu)化方案----重復性高,可靠性強
4、購買本公司的ELISA試劑盒,免費代測
5、技術(shù)服務要求:專業(yè),規(guī)范,高效
6、適用于體液、組織勻漿液、細胞培養(yǎng)上清液、尿液等多種類型的樣本
7、可檢測動物類型豐富:人、猴、大鼠、小鼠、豚鼠、黃金地鼠、兔、豬、犬、牛、綿羊、山羊、鵝、雞、蝦、河蟹、鱸魚、斑馬魚等
8、可檢測指標齊全:炎癥因子、血管生成素、動脈粥樣硬化因子、趨化因子、生長因子基質(zhì)金屬蛋白酶、脂肪因子等等
9、經(jīng)濟、實惠、可靠,完善、穩(wěn)定的實驗體系,科研隊伍,良好的實驗設(shè)備、準確可靠的實驗結(jié)果,是您可靠的合作伙伴。
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操作要點:
1)標本的采取和保存:可用作ELISA測定的標本十分廣泛,體液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、糞便)等均可作標本以測定其中某種抗體或抗原成份。有些標本可直接進行測定(如血清、尿液),有些則需經(jīng)預處理(如糞便和某些分泌物)。大部分ELISA檢測均以血清為標本;
2)試劑的準備:所需試劑、蒸餾水、去離子水、自配的緩沖液;
3)加樣:一般有3次加樣步聚,即加標本,加酶結(jié)合物,加底物。
4)保溫:ELISA中一般有兩次抗原抗體反應,即加標本和加酶結(jié)合物后。抗原抗體反應的完成需要有一定的溫度和時間,這一保溫過程稱為溫育。
5)洗滌:洗滌的方式除某些ELISA儀器配有特殊的自動洗滌儀外,手工操作有浸泡式和流水沖洗式兩種。
6)顯色和比色:顯色是ELISA中的后一步溫育反應,此時酶催化無色的底物生成有色的產(chǎn)物。比色前應先用潔凈的吸水紙拭干板底附著的液體,然后將板正確放入酶標比色儀的比色架中。儀器準備為酶標儀。
7)結(jié)果判斷:分定性判定和定量判定。
pertussis,whooping cough百日咳種屬: Streptoverticillium│lilacinoverticillatum丁香輪絲鏈輪絲菌
Carboxylesterase type AA型羧酸酯酶種屬: Streptomyces│europaeiscabiei歐洲瘡痂鏈霉菌
muscarinic acetylcholine receptor毒蕈堿型乙酰膽堿受體種屬: Phytophthora│hibernalis冬生疫霉屬
Mhyopneumoniae antibody肺炎支原體抗體種屬: Salmonella│enterica subsp. enterica serotype Wandsworth腸沙門氏菌腸亞種旺茲沃思血清型
advanced oxidation protein products晚期氧化蛋白產(chǎn)物種屬: PsychrobacillusinsolitusPsychrobacillusinsolitus
Acid antibody脫落酸抗體種屬: Jeotgalibacillus│marinus海洋咸海鮮芽孢桿菌
Lymphocyte factor淋巴細胞因子種屬: Saccharomycopsislipolytica(YarrowYarrowialipolytica)解脂復膜孢酵母(亞羅解脂酵)
Leptin Receptor1瘦素受體1種屬: Halorubrum│alkaliphilum嗜堿鹽紅菌
Leptin Receptor2瘦素受體2種屬: Comamonas│terrae從毛單孢菌(加詞待譯)
phospho calcium;calmodulin-dependent protein kinase-Ⅱ磷酸化鈣調(diào)素依賴性蛋白激酶2種屬: Salinicoccus│albus白色鹽水球菌
hydatid disease Ab包蟲病抗體種屬: Halomonas│eurihalina廣鹽鹽單胞菌
Trichinella IgG antibody旋毛蟲IgG抗體種屬: Rothia│amarae溝羅斯氏菌
Chemokine-like receptor 1 antibody趨化樣因子受體1抗體種屬: Pseudonocardia│benzenivorans解假諾卡氏菌
paraoxonase對氧磷酶種屬: Hericium│erinaceus猴頭菌(猴頭蘑、刺猬菌)
Recombinant Human Chemerin重組人脂肪因子種屬: Williamsia│sterculiaeWilliamsia sterculiae
牛檸檬酸合成酶ELISA檢測試劑盒人睪酮(T)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Actinoplanes missouriensis
小鼠睪酮(T)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Escherichia coli
豬睪酮(T)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Lactobacillus paracasei
大鼠睪酮(T)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Chaetomium cuniculorum
兔子睪酮(T)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Streptomyces sp.
牛孕激素/孕酮(PROG)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Purpureocillium lilacinum
犬孕激素/孕酮(PROG)ELISA Kit,48T/96T 用途: 代謝產(chǎn)物具有弱的抗細菌活性。
人孕激素/孕酮(PROG)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Auricularia auricula
ELISA試驗時,注意事項如下:
1. 正式試驗時,應分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件,待檢樣品應作一式二份,以保證實驗結(jié)果的準確性。有時本底較高,說明有非特異性反應,可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。
2. 產(chǎn)品僅用于科研在ELISA中,進行各項實驗條件的選擇是很重要的,其中包括:
(1) 固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進行篩選:用等量抗原包被,在同一實驗條件下進行反應,觀察其顯色反應是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時,要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時。蛋白質(zhì)包被適濃度需進行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進行包被后,在其它試驗條件相同時,觀察陽性標本的OD值。選擇OD值而蛋白量少的濃度。對于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1~10μg/ml。
(3) 酶標記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進行初步效價的滴定(見酶標記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實驗系統(tǒng)里準確地滴定其工作濃度。
(4) 酶的底物及供氫體的選擇:對供氫體的選擇要求是價廉、安全、有明顯地顯色反應,而本身無色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應注意防護。有條件者應使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時間后,應加入強酸或強堿以終止反應。通常底物作用時間,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入 。