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細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測試劑盒(WST-1法)

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  • 細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測試劑盒(WST-1法)

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更新時間:2022-04-19 16:03:03瀏覽次數(shù):205

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 100次|500次
貨號 FS-X9529 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 公司產(chǎn)品僅用于科研    
細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測試劑盒(WST-1法)正在出售的產(chǎn)品:生精凋亡相關(guān)因6抗體3--L-酪氨 CHLORO-L-TYROSINE, 3-(RG)Human, Mouse, Rat
酪氨激酶C抗體(神經(jīng)生長因子受體的一種)CHLOROTHYMOL(RG)Human
原肌球蛋白抗體膽 CHOLIC ACID(RG)Human, Mouse
促狀腺素受體抗體膽 CHOLIC ACID(P)Human,

詳細(xì)介紹

中文名稱:細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測試劑盒(WST-1法)

英文名稱:WST-1 Cell Proliferation and Cytotoxicity Assay Kit

產(chǎn)品規(guī)格:100次|500次

發(fā)貨周期:1~3天

本試劑盒是一種廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性的快速高靈敏度檢測試劑盒。WST-1是一種類似于MTT的化合物,在電子耦合試劑存在的情況下,可以被線粒體內(nèi)的一些脫氫酶還原生成橙黃色的formazan(參考下圖)。細(xì)胞增殖越多越快,則顏色越深;細(xì)胞毒性越大,則顏色越淺。

WST-1是MTT的一種升級替代產(chǎn)品,和MTT或其它MTT類似產(chǎn)品如XTT、MTS等相比有明顯的優(yōu)點。首先,MTT被線粒體內(nèi)的一些脫氫酶還原生成的formazan不是水溶性的,需要有特定的溶解液來溶解;而WST-1和XTT、MTS產(chǎn)生的formazan都是水溶性的,可以省去后續(xù)的溶解步驟。其次,WST-1產(chǎn)生的formazan比XTT和MTS產(chǎn)生的formazan更易溶解。再次,WST-1比XTT和MTS更加穩(wěn)定,使實驗結(jié)果更加穩(wěn)定。另外,WST-1和MTT、XTT等相比,線性范圍更寬,靈敏度更高(參考下圖)。

本試劑盒可以用于細(xì)胞因子等誘導(dǎo)的細(xì)胞增殖檢測,也可以用于抗癌藥物等對細(xì)胞有毒試劑誘導(dǎo)的細(xì)胞毒性檢測,或一些藥物誘導(dǎo)的細(xì)胞生長抑制檢測等。

本試劑盒檢測非常便捷。無須使用同位素,所有的檢測步驟僅在同一塊96孔板內(nèi)完成。不必洗滌細(xì)胞,不必收集細(xì)胞,也不必采用額外步驟去溶解formazan??梢杂糜诖笈繕悠返臋z測。

酚紅和血清對本試劑盒的測定無明顯影響。WST-1對細(xì)胞無明顯毒性。加入WST-1顯色后,可以在不同時間反復(fù)用酶標(biāo)儀讀板,使檢測時間更加靈活,便于找到最佳測定時間。


注意事項:

由于使用96孔板進(jìn)行檢測,如果細(xì)胞培養(yǎng)時間較長,一定要注意蒸發(fā)的問題。一方面,由于96孔板周圍一圈最容易蒸發(fā),可以采取棄用周圍一圈的辦法,改加PBS,水或培養(yǎng)液;另一方面,可以把96孔板置于靠近培養(yǎng)箱內(nèi)水源的地方,以緩解蒸發(fā)。

注意事項:

1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。

2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時試劑損失。

3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。

4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導(dǎo)致錯誤的結(jié)果。

5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。

6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。

7、需長時間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會增加空白吸收,從而影響檢測結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。

8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性,則測定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測。

9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。

10、加 MTS 溶液后孵育時間的長短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實驗情況而定,對于大多數(shù)情況孵育 1 小時即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長時間。

11、如果不是使用 96 孔板檢測,MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。

胰島素原(PI)elisa試劑盒英文名稱:PI ELISA Kit磷酸化系統(tǒng)性紅斑狼瘡先關(guān)蛋白TREX1抗體包裝1g

胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白6(IGFBP-6)elisa試劑盒英文名稱:IGFBP-6 ELISA Kit磷酸化系統(tǒng)性紅斑狼瘡相關(guān)蛋白TREX1抗體包裝1g

胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白4(IGFBP-4)elisa試劑盒英文名稱:IGFBP-4 ELISA Kit接頭相關(guān)蛋白復(fù)合體AP-2μ鏈1抗體包裝25g

胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2(IGFBP-2)elisa試劑盒英文名稱:IGFBP-2 ELISA Kit磷酸化接頭相關(guān)蛋白復(fù)合體AP-2μ鏈1抗體包裝5g

胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白1(IGFBP-1)elisa試劑盒英文名稱:IGFBP-1 ELISA Kit膜粘連蛋白7抗體包裝100g

胰島素樣生長因子2(IGF-2)elisa試劑盒英文名稱:IGF-2 ELISA Kit3號染色體開放閱讀框15抗體包裝500g

胰島素樣生長因子1受體(IGF-1R)elisa試劑盒英文名稱:IGF-1R ELISA Kit載脂蛋白B受體抗體包裝25g

胰島素樣生長因子1(IGF-1)elisa試劑盒英文名稱:IGF-1 ELISA Kit三磷酸腺苷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運蛋白2抗體包裝5g

胰島素受體β(ISR-β)elisa試劑盒英文名稱:ISR-β ELISA Kit載脂蛋白B抗體包裝1g

胰島素降解酶(IDE)elisa試劑盒英文名稱:IDE ELISA Kit花生四烯酸15脂氧合酶2抗體包裝25g

胰島素(INS)elisa試劑盒英文名稱:INS ELISA Kit載脂蛋白C4抗體包裝5g

原激活肽(TAP)elisa試劑盒英文名稱:TAP ELISA Kit低密度脂蛋白受體銜接蛋白抗體包裝1g

1(trypsin-1)elisa試劑盒英文名稱:trypsin-1 ELISA Kit原始廣泛存在蛋白1抗體包裝250mg

(trypsin)elisa試劑盒英文名稱:trypsin ELISA Kit錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白37抗體包裝5g

α淀(AMY2A)elisa試劑盒英文名稱:AMY2A ELISA Kitα1,4-半乳糖基轉(zhuǎn)移酶1包裝25g

激活素受體2B抗體程序性死亡蛋白1配體1(PDCD1LG1)Rucaparib phosphate (AG-014699 phosphate) 是一種有效、可口服的 PARP 抑制劑,結(jié)合 PARP1 的Ki 為 1.4
細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測試劑盒(WST-1法)棕櫚酸對硝基苯酯

其他 4-硝基苯棕櫚酸酯;十六碳酸4-硝基苯酯;4-硝基苯基棕櫚酸酯

英文名稱: 4-Nitrophenyl palmitate

其他英文名稱: p-Nitrophenyl palmitate;Hexadecanoic acid 4-nitrophenyl ester

產(chǎn)品規(guī)格: BR,98%

包  裝: 1克/5克

CAS號:1492-30-4

C22H35NO4=377.52

級別:BR

含量:≥98.0%

熔點:65~66℃

性狀:粉末。溶解度:100 mg plus 1 ml in CHCl3

用途:生化研究。

保存:-20℃

操作規(guī)程:

1、在96孔板加入細(xì)胞00μL/孔,通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入00微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實驗每孔加入00微升5000~0000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當(dāng)濃度的0~0μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及00%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。

5、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×00

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時的藥物濃度(IC90)

 


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